不同采收季节瓶尔小草黄酮类化合物含量分析(一).doc

1、不同采收季节瓶尔小草黄酮类化合物含量分析(一)作者：赵保发张志信张仕秀黄保贵沐建华【摘要】目的确定瓶尔小草的最佳采收季节。方法对夏（8 月）、秋（10月）、冬（12 月）三季节采收的瓶尔小草中的总黄酮进行了提取，以芦丁为对照品，用紫外分光光度法对其含量进行了测定。结果不同季节采收的瓶尔小草中黄酮类化合物的含量有着显著的差异，夏季（8 月）其含量为 58.42(mg/gDW)，秋季（10 月）为 39.32(mg/gDW)，冬季（12月）为 28.14(mg/gDW)。结论瓶尔小草的最佳采收季节应为每年8 月。【关键词】瓶尔小草；黄酮类化合物；紫外分光光度法Abstract：ObjectiveT

2、ostudythebestharvestseasonofOphioglossumvulgatumL.MethodsThispaperreportedtheextractionandthepreliminarydeterminationofflavonoidsinOphioglossumvulgatumL.fromthesamplesofAugust,October,DecemberbyUV-spectrophotometrywithrutinascomparisonsample.ResultsThecontentsofflavonoidshadsignificantdifferenceinOp

3、hioglossumvulgatumL.atdifferentseassons.ThehighestflavonoidcontentinOphioglossumvulgatumL.ofAugustwas58.42(mg/gDW)andthecontentsofthesampleinJunewas39.32(mg/gDW),andthecontentofthesamplesinDecemberwas28.14(mg/gDW).ConclusionThebestharvestseassonforOphioglossumvulgatumL.isAugust.Keywords：Ophioglossum

4、vulgatumL；.Flavonoids；UV-spectrophotometry瓶尔小草科植物瓶尔小草OphioglossumvulgatumL又.称一支箭、 一支枪、独叶一支箭、 单枪一支箭、 一矛一盾、矛盾草、蛇须草。以全草入药，功能清热解毒，消肿止痛。用于小儿肺炎、脘腹胀痛、毒蛇咬伤、疔疮肿毒；外用治急性结膜炎、角膜云翳、眼睑缘炎。分布于东北、陕西、湖北、云南、贵州、广西、台湾及长江下游等地1，2。黄酮类化合物广泛存在于植物中，生理活性作用广泛：维持血管正常的渗透压、防止血管脆化，对多种炎症、冠心病、心绞痛等均有良好的疗效。同时，黄酮类化合物还是一种良好的活性自由基清除剂，具有调整免

5、疫和内分泌作用，还有抗癌、抗炎等多种医疗保健作用，是一类重要的生物活性因子。瓶尔小草的叶中主要含3-O-甲基槲皮素-7-O-双葡萄糖苷 -4-O-葡萄糖苷，其功效与黄酮类化合物有着密切关系。本研究探讨了瓶尔小草中总黄酮TotalflavonesofOphioglossumvulgatumL.（ FOV）的提取、测定 ,分析了瓶尔小草中总黄酮随季节的变化，以期为充分利用瓶尔小草资源提供实验依据。1 器材1.1 仪器 UV-160 紫外分光光度计（日本岛津） ；AEL-40SM十万分之一天平（日本岛津）；干燥箱 CS-101-2CS（重庆实验仪器厂）；微波炉，MideaPJ21F-B(C2)。1.

6、2 试剂芦丁对照品购于中国药品生物制品检定所；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯。1.3 药材瓶尔小草全株于2006 年 8，10，12 月采集于云南文山县杨柳井，经云南文山师范高等专科学校沐建华讲师鉴定，每次采样3 次重复。2 方法2.1 标准曲线的制作3精密称取 120干燥至恒重的芦丁对照品10mg用 20ml 乙醇溶解后，转移到 100ml 容量瓶中，加水至刻度，摇匀即得（每毫升溶液中含无水芦丁 0.1mg）。精密吸取芦丁标准液 0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0ml。分别置于 50ml 容量瓶中，各加水至 12ml，加 5%NaNO2溶液 2ml，混匀，放置

7、6min,加 10%Al(NO3)3溶液 2ml，混匀，放置 6min,加 4%NaOH20ml,再加水至 50ml，放置 15min,以不加芦丁对照品的试剂作空白对照。按分光光度法4在 503nm（全波长扫描，在 503nm 处有最大吸收）波长处测定吸光度。以所取标准液含有的芦丁标样量mg 数和吸光度数据经回归处理，得到回归方程,回归方为程： Y=0.2196X-0.0112，相关系数 r=0.9993。2.2 黄酮类化合物的提取和测定方法5瓶尔小草粉碎（过 60 目筛），称取 5g，用 70%乙醇溶液为溶剂，浸泡24h，微波提取 10min（微波加热 2min，间隔 1min，用于补充溶剂损耗），抽滤，提取液用 70%乙醇溶液定容至 200ml，取 1ml 按“2.1项”下方法测定吸光度，根据回归方程计算出 1ml 提取液中的总黄酮的 mg 数，按下式计算瓶尔小草中的黄酮含量 (mg/gDW)。样品中的总黄酮含量（以芦丁计） ：总黄酮含量（ mg/gDW）=200CW式中： C 为 1ml 样品液含总黄酮量 (mg)，W 为样品的质量 (g)。2.3 回收率的测定准确称取夏季采收的瓶尔小草样品5g，共 3 份，分别加入一定量的芦丁对照品，按“2.2操”作