钙磷镁的测定

1、2021/3/261 第十二章第十二章 钙磷镁和微量元素检验钙磷镁和微量元素检验 目标目标: 1. 钙、磷、镁代谢情况及功能钙、磷、镁代谢情况及功能 2. 微量元素的功能微量元素的功能 3. 它们的测定方法它们的测定方法 2021/3/262 钙磷占第五、六位钙磷占第五、六位 镁占第十一位镁占第十一位 微量元素有重要的生物作用和临床意义微量元素有重要的生物作用和临床意义 2021/3/263 第一节第一节 概述概述 一、钙、磷代谢和调节一、钙、磷代谢和调节 二、镁代谢和生理功能二、镁代谢和生理功能 三、微量元素与疾病三、微量元素与疾病 2021/3/264 一、钙、磷代谢和调节一、钙、磷代谢和

2、调节 （一）钙代谢（一）钙代谢: 1. 钙的含量、分布和血钙钙的含量、分布和血钙 骨骨:99% 体液、组织体液、组织:1% 可扩散钙可扩散钙:影响代谢、功能影响代谢、功能 非扩散钙非扩散钙:与血浆蛋白结合与血浆蛋白结合 2021/3/265 血钙受血钙受H+影响影响: pH升高升高-结合钙增加结合钙增加-Ca2+减少减少 H+ Ca2+ =K- HCO3- 2021/3/266 2. 钙的吸收和排泄钙的吸收和排泄 影响吸收的因素影响吸收的因素: VD3 年龄年龄 溶解状态溶解状态:乳糖、乳酸、氨基酸提高乳糖、乳酸、氨基酸提高 草酸、植酸抑制草酸、植酸抑制 Ca:P=2:1时时,吸收最好吸收最好

3、 排泄排泄: 肠道肠道:食物中未吸收及肠道分泌钙食物中未吸收及肠道分泌钙 肾脏肾脏:点总排钙量的点总排钙量的20% 2021/3/267 （三）磷代谢（三）磷代谢: 分布分布: 骨骨:86% 各组织体液各组织体液:14% 吸收吸收:易吸收易吸收,较少缺磷较少缺磷 排泄排泄:肾脏。排泄量可血中磷酸盐成正比肾脏。排泄量可血中磷酸盐成正比 2021/3/268 （三）钙、磷代谢的调节（三）钙、磷代谢的调节 甲状旁腺素甲状旁腺素: 促进肾脏对促进肾脏对Ca、P重吸收重吸收 促进破骨细胞生成促进破骨细胞生成,促进骨盐溶解促进骨盐溶解 促进钙、磷重吸收促进钙、磷重吸收 Ca2+上升上升 2021/3/26

4、9 降钙素降钙素: 抑制肾脏对钙、磷的重吸收抑制肾脏对钙、磷的重吸收 促进骨盐沉积促进骨盐沉积 抑制抑制Ca、P吸收吸收 降低降低Ca2+ 2021/3/2610 VD3 促进肾脏对钙、磷的重吸收促进肾脏对钙、磷的重吸收 促进溶骨作用促进溶骨作用 促进肠道促进肠道Ca、P吸收吸收 升高升高Ca2+ 2021/3/2611 （四）钙、磷的生理功能（四）钙、磷的生理功能 1. 钙的作用钙的作用: （1）凝血因子之一）凝血因子之一 （2）增强心肌收缩、降低神经肌肉兴奋性）增强心肌收缩、降低神经肌肉兴奋性 （3）降低毛细血管通透性）降低毛细血管通透性,减少渗出减少渗出 （4）做为酶的激活剂、抑制剂）做

5、为酶的激活剂、抑制剂 （5）激素的）激素的“第二信使第二信使”,参与代谢调节参与代谢调节 2021/3/2612 2. 磷的作用磷的作用 (1)参与核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白的分子组成参与核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白的分子组成 (2)参与高能磷酸化合物生成参与高能磷酸化合物生成 (3)共价修饰调节共价修饰调节 (4)HPO42/H2PO4是缓冲体系是缓冲体系 2021/3/2613 二、镁代谢和生理功能二、镁代谢和生理功能 （一）镁的代谢（一）镁的代谢 骨骨:60% 骨骼肌骨骼肌:20-30% 其它组织其它组织:10% 血浆中血浆中: 重碳酸、柠檬酸、磷酸盐重碳酸、柠檬酸、磷酸盐 Mg2+ Mg

6、-血浆蛋白复合物血浆蛋白复合物 2021/3/2614 （二）镁的生理功能（二）镁的生理功能 1. 酶的辅助因子酶的辅助因子:约约300种酶需种酶需Mg2+ 2. 对神经肌肉兴奋性有降低作用对神经肌肉兴奋性有降低作用 2021/3/2615 三、微量元素与疾病三、微量元素与疾病 （一）微量元素对各种生命活动的影响（一）微量元素对各种生命活动的影响 1. 促进机体生长发育促进机体生长发育 2. 对神经系统结构和功能的影响对神经系统结构和功能的影响 3. 内分泌的影响、内分泌的影响、 4. 免疫系统的影响免疫系统的影响 5. 对心血管疾病的影响对心血管疾病的影响 6. 对肿瘤发生、发展和治疗对肿瘤

7、发生、发展和治疗 7. 对胚胎及胎儿发育的影响对胚胎及胎儿发育的影响 测复合物的活性测复合物的活性 免疫化学法免疫化学法 2021/3/2616 （三）微量元素的生物学作用及代谢（三）微量元素的生物学作用及代谢 1. 铁铁: 吸收吸收: 贮量少时贮量少时-吸收多吸收多 酸性酸性-吸收多吸收多 Fe2+比比Fe3+ -吸收多吸收多 代谢代谢:Fe2+-Fe3+ -运铁蛋白运铁蛋白-合成血红素合成血红素 功能功能:合成血红素合成血红素-血红蛋白、肌红蛋白、细血红蛋白、肌红蛋白、细 胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶 2021/3/2617 2. 锌锌 分布分布: 肌肉肌肉

8、:62.2% 骨骨: 28.5% 功能功能:1. 与酶的合成与活性有关与酶的合成与活性有关 2. 与免疫功能有关与免疫功能有关 2021/3/2618 3. 铜铜 吸收吸收:肠粘膜肠粘膜-合成铜蓝蛋白合成铜蓝蛋白 排出排出:胆道胆道-肠道肠道 功能功能:1. 参与许多酶的组成参与许多酶的组成 2. 促进促进Fe3+-Fe2+,促进铁吸收促进铁吸收 2021/3/2619 4. 硒硒: 肠道吸收肠道吸收-尿汗排出尿汗排出 多种酶的组成成分。如谷胱苷肽过氧化物酶多种酶的组成成分。如谷胱苷肽过氧化物酶 抗氧化作用抗氧化作用 2021/3/2620 5.铬铬 葡萄糖耐量因子葡萄糖耐量因子-使胰岛素与受

9、体使胰岛素与受体 形成形成-S-S-键键 6. 锰锰 参与多种酶的组成（精氨酸酶、丙酮酸参与多种酶的组成（精氨酸酶、丙酮酸 羟化酶、过氧化物岐化酶等）羟化酶、过氧化物岐化酶等） 2021/3/2621 8. 钼钼 骨牙中。对骨牙形成有重要作用骨牙中。对骨牙形成有重要作用 黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧 化酶化酶 9. 氟氟 10. 碘碘 甲状腺素甲状腺素T3、T4合成合成 2021/3/2622 2021/3/2623 （一）钙测定（一）钙测定 第二节第二节 钙、磷、镁和微量元素测定钙、磷、镁和微量元素测定 一、血清钙、磷、镁的测定一、血清钙、磷、镁的测定 1

10、. 离子钙的测定离子钙的测定: 离子选择电极法离子选择电极法 2021/3/2624 （二）总钙测定（二）总钙测定 1. 邻甲酚酞络合酮比色法邻甲酚酞络合酮比色法: 2. 甲基麝香草酚蓝法甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与钙螯合碱性溶液中与钙螯合-淡绿变蓝淡绿变蓝 3. 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 高温高温-Ca2+-气态钙离子气态钙离子-吸吸 收收422.7nm光谱光谱 2021/3/2625 4. EDTA络合滴定法络合滴定法 碱性下碱性下-Ca2+与钙红结合与钙红结合-淡红色淡红色 EDTA滴入滴入-夺取夺取Ca2+-钙红重新游钙红重新游 离离-变蓝色变蓝色 2021/3/2626

11、 （二）血清磷的测定（二）血清磷的测定 1. 磷钼酸还原法磷钼酸还原法 2. 磷酸盐与钼酸磷酸盐与钼酸-无色磷钼酸无色磷钼酸- 3. 加还原剂加还原剂-蓝色复合杂聚物钼蓝蓝色复合杂聚物钼蓝 2. 磷钼酸非还原法磷钼酸非还原法 酸性溶液中磷酸酸性溶液中磷酸+钼酸铵钼酸铵-磷钼酸铵杂聚化合物磷钼酸铵杂聚化合物 3. 酶法酶法 2021/3/2627 （三）血清镁的测定（三）血清镁的测定 1. 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法: 2. 镁灯镁灯-激发激发-285.2nm光谱光谱-标标 本中基态镁原子蒸汽吸收本中基态镁原子蒸汽吸收-吸收吸收 量与镁浓度成正比量与镁浓度成正比 2. 甲基麝香草酚蓝法

12、甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与镁螯合碱性溶液中与镁螯合-蓝紫色化合物蓝紫色化合物 3. Calmagite比色法比色法 碱性下碱性下,镁与镁与Calmagite染料生成紫红色化合物染料生成紫红色化合物 2021/3/2628 4. 达旦黄比色法达旦黄比色法 碱性下碱性下-Mg2+-Mg(OH)2胶体胶体- -与达旦黄生成橘红色复合物与达旦黄生成橘红色复合物 2021/3/2629 二、尿液中钙镁磷的测定二、尿液中钙镁磷的测定 先将尿液酸化先将尿液酸化,溶解尿中盐溶解尿中盐 2021/3/2630 三、铁、铜、锌测定三、铁、铜、锌测定 （一）铁测定（一）铁测定 1. 血清铁血清铁 酸性酸性-Fe

13、3+与运铁蛋白分离与运铁蛋白分离-还原剂还原剂- Fe2+-络合显色剂络合显色剂-比色测定比色测定 2. 总铁结合力总铁结合力 加过量加过量Fe-使运铁蛋白饱和使运铁蛋白饱和- 除去多余除去多余Fe2+-上清上清-测测Fe 2021/3/2631 NH2-CH-C H O OH 甘甘氨氨酸酸 NH2-CH-C H O OH 甘甘氨氨酸酸 NH-CH-C H OH O O H 甘甘氨氨酸酸 + -HOH 甘氨酰甘氨酸甘氨酰甘氨酸 肽键 NH2-CH-C-N-CH-C O OHHHH O NH2-CH-C-N-CH-C O OHHHH O 2021/3/2632 2021/3/2633 (二）铜测

14、定二）铜测定 1. 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 2. 血清铜比色法血清铜比色法 稀酸稀酸Cu2+与蛋白分离与蛋白分离-除蛋白除蛋白-上上 清与二乙基二醇代氨基甲酸钠清与二乙基二醇代氨基甲酸钠-金黄金黄 色化合物色化合物 2021/3/2634 （三）锌测定（三）锌测定 酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的 磷钨酸、磷钼酸磷钨酸、磷钼酸-蓝色化合物蓝色化合物 加上加上Cu2+,结合双缩脲法结合双缩脲法,提高灵敏度提高灵敏度 适于测单一蛋白适于测单一蛋白,且适用于蛋白含量较少且适用于蛋白含量较少 的样品的样品 2021/3/2635 4 比浊法比浊法 酸性试剂

15、酸性试剂+蛋白质蛋白质-沉淀沉淀 5 染料结合法染料结合法 酸性条件下酸性条件下,蛋白质蛋白质-NH3+酪酪,与染料与染料 中阴离子产生颜色反应。中阴离子产生颜色反应。 氨基黑、考马斯亮兰氨基黑、考马斯亮兰 2021/3/2636 6 紫外分光光度法紫外分光光度法 色氨酸、酪氨酸色氨酸、酪氨酸 在在280nm有吸收峰有吸收峰 保持蛋白活性保持蛋白活性 7 折光测定法折光测定法 溶于溶液中的固体可增加它的光折射溶于溶液中的固体可增加它的光折射 率率 固定波长、固定温度下固定波长、固定温度下,光折射率与蛋白光折射率与蛋白 浓度成正比浓度成正比 2021/3/2637 血清总蛋白血清总蛋白-临床意义

16、临床意义: 升高升高:多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。 降低降低:白蛋白合成减少白蛋白合成减少,或蛋白丢失或蛋白丢失 2021/3/2638 二、血清白蛋白测定二、血清白蛋白测定 1. 染料结合法染料结合法 白蛋白与染料结合白蛋白与染料结合,球蛋白很少与染料结球蛋白很少与染料结 合合 溴甲酚绿溴甲酚绿,溴甲酚紫溴甲酚紫 白蛋白（白蛋白（pH4.2, +) +BCG-蓝绿色化蓝绿色化 合物合物-OD与白蛋白浓度成正比与白蛋白浓度成正比 2021/3/2639 2. 盐析法盐析法 球蛋白先沉淀球蛋白先沉淀 3. 电泳法电泳法 4. 2免疫化学法免疫化学法 抗原抗体反应抗

17、原抗体反应;抗体过量抗体过量 2021/3/2640 临床意义临床意义 合成减少合成减少 吸收减少吸收减少 丢失过多丢失过多 2021/3/2641 七、脑脊液蛋白质测定七、脑脊液蛋白质测定 脉络膜的毛细血管壁超滤形成脉络膜的毛细血管壁超滤形成,及少量及少量 中枢神经系统合成中枢神经系统合成 浊度法浊度法 染料结合法染料结合法:考马斯亮兰考马斯亮兰,邻苯三酚红钼络邻苯三酚红钼络 合显色法。合显色法。 2021/3/2642 临床意义临床意义: 神经系统疾病神经系统疾病 血脑屏障通透性增加血脑屏障通透性增加;血管性脑水肿血管性脑水肿,细胞细胞 含量过多含量过多,神经细胞坏死等神经细胞坏死等 2021/3/2643 三、血清球蛋白测定三、血清球蛋白测定 球蛋白中色氨酸占