分光光度法测定保健食品中D_氨基葡萄糖盐酸盐

1、 理化检验-化学分册P TCA(PAR T B:C H EM1ANAL.2008年第44卷知识与经验分光光度法测定保健食品中D2氨基葡萄糖盐酸盐朱骤海1,何俊婷1(陕西新药技术开发中心,西安710065郭楠2,李稳宏2,刘明霞2,高蓉2 (西北大学化工学院,西安710069中图分类号:O657.32文献标识码:B文章编号:100124020(2008022*D2氨基葡萄糖盐酸盐(GCSM是甲壳素经盐酸水解得到的白色晶体,它是合成抗癌药物氯脲霉素的主要原料,是骨关节止痛药及抗生素的增效剂,也是食品甜味剂、抗氧剂,又是双歧杆菌培养基的主要成分之一124。因此,多年以来人们一直在研究和开发含GCSM

2、类的保健食品甚至相关药物,为保证开发保健食品的质量,其中有效成分GCSM含量的准确测定具有十分重要的意义。目前,对含90%的GCSM保健食品分析测定已有报道5,而对含40%左右GCSM保健食品分析却未见报道。本研究以含40%的GCSM保健食品为对象,采用紫外2可见分光光度法对其有效成分进行分析。1试验原理5D2氨基葡萄糖在碱性条件下与2,42戊二酮缩合可形成生色原22甲基232二乙酰吡咯衍生物,生色原与对2二甲氨基苯甲醛(PDABA在酸性条件下结合呈现红色,利用上述显色原理通过紫外2可见分光光度计分别测定样品中有效成分的含量。2试验部分2.1主要仪器与试剂2501vp型紫外2可见分光光度计;B

3、M F26B (SM型超微粉碎机;SND2000型超声提取仪。磷酸三钠2四硼酸钠溶液:将0.33molL-1磷酸三钠溶液和0.25molL-1四硼酸钠溶液以98比2混合。2,42戊二酮溶液:取磷酸三钠2四硼酸钠溶液19.3mL,加入2,42戊二酮0.7mL,摇匀,临用前收稿日期:2006210217配制。PDABA溶液:称取PDABA溶液1.6g,加入浓盐酸15mL,搅拌溶解后,再加入异丙醇105mL 混合备用。GCSM标准溶液:称取GCSM标准品(纯度99%0.012g于100mL热水中,配制成120mg L-1标准溶液。2.2试验方法5移取适量样品溶液于25mL具塞比色管中,用水补至2mL

4、;再加2,42戊二酮溶液1.5mL,摇匀, 100水浴加热30min;冷却至室温后,加PDABA 溶液5mL,具塞摇匀,放置5min。以空白样为参比,在525.5nm波长处测定吸光度,求出GCSM的含量。3结果与讨论3.1最大吸收波长选择分别移取GCSM溶液1mL于25ml具塞比色管中,用水补至2mL;再加入2,42戊二酮溶液1.5mL,按试验方法进行测定。试验结果表明: GCSM标准溶液在525.5nm波长处有最大吸收。3.2标准曲线的绘制分别吸取120mgL-1GCSM标准溶液0.25, 0.50,0.75,1.00,1.50mL(相当于30,60,90,120, 180g GCSM,用水

5、补至2.0mL,空白样为2.0mL蒸馏水,按试验方法测定吸光度,并对其进行回归计算,回归方程为y=0.0039x-0.0163,相关系数为0.9993。3.3样品测定结果称取粉末样品0.0304g,用水溶解后定容于250mL容量瓶中,取样品溶液2mL于25mL具塞比色管中,按试验方法对样品进行分析,测定结果分381 理化检验-化学分册朱骤海等:分光光度法测定保健食品中D 2氨基葡萄糖盐酸盐别为27.61%,32.39%,38.74%。试验结果表明:样品中GCSM 含量极不稳定,分析其主要原因是含40%GCSM 的样品,其余成分为淀粉、糊精等添加辅料,其混合度、均质化程度的水平直接影响了分析的精

6、度,故对此类样品必需进行预处理。经试验,样品的预处理步骤628为:先将样品粉碎至一定的粒径,然后与定量的水混合,用超声波提取仪处理一定的时间,反复多次过滤,即可得到均匀度和透明度均好的待测样品。分别吸取处理过的样品溶液2mL 于25mL 具塞比色管中,按试验方法进行测定,结果为32.71%,36.25%,31.46%,33.33%,32.39%,34.68%,平均值为33.47%,标准偏差为1.73%,相对标准偏差为5.2%。经过计算该试验的置信区间为0.01120.03469,而标准偏差为0.00173,在置信区间范围内。按试验方法处理样品,并加入GCSM 标准进行回收试验,结果见表1。表1

7、回收率试验结果(n =6T ab.1R esults of recovery test本底值Content of GCSAin sample m /mg标准加入量Am t of std.GCSA addedm /mg 测定总量Total am t ofGCSA foundm /mg 回收率Recovery /%本底值Content of GCSAin sample m /mg标准加入量Am t of std.GCSA addedm /mg 测定总量Total am t ofGCSA foundm /mg 回收率Recovery /%34.0012.2546.42101.423.0515.493

8、9.10103.637.4611.5948.9198.846.397.9954.41100.424.6014.9039.1097.345.608.2053.7198.9参考文献:1仇立干.D (+2氨基葡萄糖盐酸盐质量的检测及其质量标准的拟定J .扬州教育学院学报,2000(3:25.2张惟杰.糖复合物生化研究技术M .杭州:浙江大学出版社,1999:17.3李南,李继珩.D 2氨基葡萄糖盐酸盐的制备研究J .中国药科大学学报,1997,28(1:56.4陈来同,唐运.41种生物化学产品生产技术M .北京:金盾出版社,1994:175.5陈金东.李蔚.滴定分析法和分光光的法测定保健食品中D 2

9、氨基葡萄糖盐酸盐含量的研究J .中国卫生检验杂志,2002,4(2:143.6盖国胜,徐政.超细粉碎过程中物料的理化特性变化及应用J .粉体技术,1997,3(2:41.7李伟雄,周晓梅,曲敬来,等.超声粉碎法测定痰中弹性蛋白酶活力的研究J .中华医学丛刊杂志,2002,2(2:1.8刘呈华,张念森,张循格,等.环丙沙星注射液制备工艺的改进J .中国药业,2002,10,7:53.(上接第176页(1+110mL 溶解并蒸至近干,加水溶解盐类,煮沸赶尽氮的氧化物,取全量或分量(使铋质量在0.54.0g 之间于50mL 容量瓶中,补加锌基体溶液至含锌400mg ,其余操作方法同2.3节方法,在工作曲线上计算标样中铋的含量。锌标准样品(By040524的标准值为5.010-4%,测定值(n =9为5.010-4%,相对标准偏差为3.9%。同时进行加标准回收试验,加入量分别为1.00,2.00,3.00g ,回收量分别为1.01,2.10,2.96g ,回收率分别为101.0%,105.0%,98.5%。本法适用于高纯锌中质量分数为210-5%110-2%铋的测定。参考文献:1G B/T 13293.2-1991氢化物发生2无色散原子荧光光谱法测定铋量S.2冯先进,符斌.氢化物2原子荧光光谱法同时测定金属镍和氧化镍中微量砷和锑J .矿冶,1997,6(3:87292.3李春玉.氢化物发