仪器分析(同名6061)

1、临床检验仪器1. 一个优良的检验仪器应具有以下几个性能指标：灵敏度、 精度高；噪音、误差小； 分辨率、重复性好；响应迅速；线性范围宽和稳定性好等。2. 临床检验仪器常用的性能指标：灵敏度、误差、噪音、最小检测量、精度、可靠性、重复 性、分辨率3. 误差通常有两种表示方法。一是绝对误差，二是相对误差4. 分辨率是仪器设备能感觉、 识别或探测的输入量 （或能产生、 影响应的输出量） 的最小值。5. 选用临床检验仪器应要求仪器的：精度等级高、应用范围广、检测范围宽、稳定性好、 灵敏度高、 噪音小、 响应时间短等； 要求仪器的检测速度快、 检测参数多、 结果准确可靠、 可靠性好；用户操作程序界面全中文

2、显示， 操作简便，快捷；有国内生产的配套试剂盒 供应； 仪器不失效的性能、 寿命、 可维修性和保存性能好， 如仪器的装配合理、 材料先进、 采用标准件及同类产品通用零部件的程度高、 售后维修服务好； 能充分体现高效益、 低成 本等。6光学显微镜的工作原理：被观察物体位于物镜的前方，被物镜作第一级放大后成一倒立的 实像， 然后此实像再被目镜作第二级放大， 得到最大放大效果的倒立的虚像， 位于人眼的明 视距离处。7物体与物镜间煤质的折射率与光学显微镜的放大率成正比，使用油镜只为了增大介质的折射率从而增加放大率。8光学显微镜的分辨率为 0.2卩m。9. 荧光显微镜与普通光学显微镜结构基本相同，主要区

3、别在于光源和滤光片不同。光源：通常用高压汞灯作为光源， 可发出紫外线和短波长的可见光。滤光片：有二祖， 第一组称激发 滤片，位于光源和标本之间，仅允许能激发标本产生荧光的光通过（如紫外线）；第二组是 阻断滤片， 位于标本与目镜之间，可把剩余的紫外线吸收掉， 只让激发出的荧光通过， 这样 既有利于增强反差，又可保护眼睛免受紫外线的损伤。10. 显微镜使用完后需将 4倍镜头对准镜台头。11. 离心现象是指物体在离心力场中表现的沉降运动现象。应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术。12相对离心力是指在离心力场中， 作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度“ g”。13沉降

4、系数：样品颗粒的质量或密度越大，它表现出的沉降系数也越大。14.差速离心法的优点是： 操作简单，离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开，并可使用容量较大的角式转子；分离时间短、重复性高；样品处理量大。缺点是：分辨率有限、分离效 果差， 沉降系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开， 不能一次得到纯颗粒； 壁效应严 重，特别是当颗粒很大或浓度很高时， 在离心管一侧会出现沉淀； 颗粒被挤压， 离心力过大、 离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。15差速离心和速率区带离心主要是根据样品组分的沉降系数不同而进行分离的，而等密度区带离心则根据样品组分的密度不同来进行分离。16分析性超速离心法的应用范围：测

5、定生物大分子的相对分子重量生物大分子的纯度估 计分析生物大分子中的构象变化。17高速离心机最大转速为 20000-25000r/min，最大相对离心力为 89000 x g。18.最大容量：通常表示为 mx n。19使用75%乙醇对离心机消毒时不能跟驱动杆和轴承接触。20. 光的吸收定律：朗伯-比尔定律；该定律是比色分析的基本原理，表达了物质对单色光吸 收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。21. 紫外-可见分光光度计基本结构都由光源、单色器、样品池、检测器和放大显示系统五 部分组成。22. 光源是提供入射光的装置，在紫外 -可见分光光度计中常用的光源有钨灯，其使用波长范围为 320-25

6、00nm 之间。23. 200-400nm 为紫外光区， 400-800nm 为可见光区。24. 单色器是将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置。25. 吸收池是用来盛放被测溶液的器件，在可见光范围内，常用无色光学玻璃或塑料制作。26. 检测器需将光信号转换成电信号的变化进行定量测量，这种把光信号转换为电信号的装 置称为光电转换器即检测器。27. 信号显示系统是把放大的信号以适当的方式显示或记录下来的装置。28. 色谱法是一种物理分离技术， 实质上是利用混合物中各个组分在互不相容的两相 （固定 相和流动相） 之间的分配的差异而使混合物得到分离的一种方法， 也有人称之为色层法、

7、 层 析法等。29. 在相同体积的情况下，尽量增加固定相的表面积，以利于样品与之充分接触，提高分离 效率，这就是大比表面积的固定相的意义所在。30. 整个气相色谱系统的核心是分析柱。31. 温度控制的稳定与否与气相色谱仪的正常工作及其测量结果的可靠性有着密切的关系。32. 气象色谱仪检测器的综合技术指标：灵敏高最小检测量低线性范围宽噪音低、 漂移小选择性问题响应时间快33. 电泳（EP）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的 现象。34. 电泳的基本原理：物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷量相等，故不显 示带电性。 但是在一定的物理作用或化学反应条件下，

8、 某些物质分子会成为带电的离子 （或 粒子）；不同的物质由于其带电性质、颗粒形状和大小相同，它们在一定的电场中移动方向 和移动速度也不同，因此可使它们分离。35. 影响电泳的外界因素：电场强度、溶质的PH值、溶液的离子强度、电渗作用、粒子的迁移率、吸附作用36. 迁移率为带电粒子在单位电场强度下的移动速度，主要与颗粒直径、形状以及所带的净 电荷量等有关。37. 聚丙烯酰胺凝胶可用于蛋白质、核酸等分子大小不同的物质的分离、定性和定量分析。还可结合去垢剂十二烷基硫酸钠（SDS ,以测定蛋白质亚基的相对分子质量。38. 常用电泳仪： 稳压稳流电泳仪全自动醋酸纤维薄膜电泳仪全自动荧光 / 可见光双系-

9、 液相色谱 - 质谱联用高效毛细管DNA测序系统血红蛋白电泳、 糖化血红蛋白电泳、pH 的敏感程度取决于电极的玻璃统电泳仪全自动琼脂糖电泳仪双向电泳及双向电泳 电泳及高效毛细管电泳 -质谱联用毛细管电泳芯片39. 区带电泳在医学检验中应用最为广泛。40. 目前用于临床医学检验的电泳主要有血清蛋白电泳、 血清脂蛋白电泳、尿蛋白电泳、脑脊液蛋白电泳。41. 银- 氯化银电极为常用的内参比电极。玻璃电极对溶液 膜。42. 电解质分析仪主要检测K、 Na、 Cl43. 电极斜率降低主要原因有：电极模版上吸附蛋白质过多空气湿度太大温度太低 寿命限将至，需要更换电极44. 临床检验常用的电化学分析仪器主要

10、是电解质分析仪和血气分析仪两种。45. 目前微生物鉴定的自动化系统大致分为两大类： 一类是自动血培养检测和分析系统， 主 要功能是检测标本中是否有微生物存在， 计算机自动扫描进行连续监测， 当微生物生长代谢 导致某些生长指数超标时， 仪器自动报警提示有细菌生长； 另一类是自动微生物鉴定及药敏 分析系统，主要功能是将分离的微生物进行鉴定，同时进行抗生素敏感试验。46. BacT/Alert 系统感受器上的指示剂溴麝香草酚蓝由绿变黄；BACTE係统利用荧光法作为检测手段。47. 数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式， 给每种细菌的反应模式赋予一组数码， 建立数据库或编成

11、检索本。 通过对未知菌进行有关生化实验并将 生化反应结果转换成数字（编码） ，查阅检索本或数据库，得到细菌名称。其基本原理是计 算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。随着电脑技术的进步，这一过程已变得非常容易。48. 自动化抗生素敏感试验使用药敏测试板（卡）进行测试，其实质是微型化的肉汤稀释试 验。将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育， 仪器每隔一定时间自动测定细菌生长的浊度， 或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性 物质的水解， 观察细菌的生长情况得出待检菌在各药物浓度的生长斜率， 经回归分析得到最 低抑菌浓度值，冰根据CLS

12、I标准得到相应敏感度： 敏感“S”、中度敏感“ MS和耐药“ R”。49. 测试卡（板）是系统的工作基础，各种不同的测试卡（板）具有不同的功能。最基本的 测试卡（板）包括革兰阳性菌鉴定卡（板） 、革兰阴性菌鉴定卡（板） 、革兰阳性菌药敏试验 卡（板）、革兰阴性菌药敏试验卡（板） 。使用时应根据涂片和格兰染色结果进行选择。50. 菌液接种器将配好的菌液接种到测试卡中，大致可分为真空接种器和活塞接种器，以真 空接种器较为常用。51. 测试卡（板） 接种菌液后放入孵箱 /读数器中进行培养和监测； 监测系统每隔一定时间对 每孔的透光度或荧光物质的变化进行检测， 并将检测的数据传递给数据管理系统； 数据

13、管理 系统将这些电信号转换成数码，与原已储存的对照值比较，推断出菌种的类型及药敏结果。52. 数据管理系统就像整个系统的神经中枢， 始终保持与孵箱 /读数器、 打印机的联络， 控制 孵箱温度，自动定时读数，负责数据的转换及分析处理。53. 2003 年 5 月 9 日美国疾病控制中心发布了最新的实验室生物安全级别标准，即生物安 全三级（ BSL-3） 标准。54. 气溶胶是指悬浮于气体介质中、 粒径一般为 0.001100um 的固态、 液态微粒所形成的胶 溶态分散体系。55. 目前世界上生物安全柜领域执行的最重要的标准是欧洲标准 EN12469 和美国国家卫生 基金会的第 49号标准（ NS

14、F49）。56. 生物安全等级3级（P3）的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物，但感染后可治愈。57. I级生物安全柜是指用于保护操作人员与环境安全、而不保护样品安全的通风安全柜。适用于对处理样品安全无要求且生物危险度等级为1、2、3级的媒质的操作；n级生物安全柜是指用于保护操作人员、 处理样品安全与环境安全的通风安全柜， 为达到此目的， 柜内保 持负压状态， 位于前部操作窗口开口区域的气流由于存在压力差而向内吸入；从安全柜顶部垂直吹下的气流为经 HEPA过滤器过滤的净化空气；安全柜排出的气体须经 HEPA过滤器过滤 后再排放到大气中。n级生物安全柜通常使用于生物危险度等级为1、2、3及的媒

15、质的操作；川极生物安全柜是完全密闭、 不漏气结构的通风安全柜， 适用于生物危险度等级为 1、2、3、 4 级的媒质的操作。58. 空气过滤系统的主要功能是保证洁净空气不断地进入工作室，使工作室内的垂直气流保持一定的流速（一般0.3m/s ）,同时使外排的气体也被净化，防止环境污染。59. 生物安全柜实验操作注意事项：平行摆放柜内物品操作宜缓慢：在安全柜内进行操 作时，手臂从柜内缓慢抽出， 避免将柜内污染空气带出柜内移动物品时应尽量避免交叉污染，按照低污染物品向高污染物品移动的原则避免震动，尽量避免将离心机、漩涡震荡器等仪器安装在柜内， 以免使用此类仪器时产生震动， 使积留在滤膜上的颗粒物质抖落

16、， 导致 柜内洁净度降低， 同时有些仪器的散热片排风口气流还可能影响柜内的正常气流方向。柜内尽量不要使用明火， 因明火使用过程中产生的细小颗粒杂质会被带入滤膜， 这些高温杂质 会损伤滤膜。60. 目前世界上生物安全柜领域执行的最重要的标准是欧洲标准EN12469和美国NSF49号标准。61. 添加 10-20的血清培养液是为了维持细胞较快生长增值速度。62. CO2浓度范围在0% -20 %。63. 流式细胞仪的分选原则：当某类细胞的特性与要分选的的细胞相同时，FCM就在形成液滴时给含有这种细胞的液滴充以特定的电荷， 而不符合分选条件的含细胞液滴及不含细胞的 空白液滴不被充电， 即不带电荷。

17、带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时， 依所带电 荷的不同分别向左偏转或向右偏转， 落入指定的收集器内。 不带电的液滴不发生偏转， 垂直 落入废液槽中被排出，从而达到细胞分类收集的目的。64. 激光是一种相干光源， 它能提供单波长、 高强度及稳定性高的光照， 所以激光是细胞微 弱荧光快速分析的理想光源。65. 当细胞携带荧光素标记物，通过激光照射区时，细胞内不同物质产生不同的波长的散射 光信号和荧光信号。66. 散射光分为前向角散射和侧向角散射；前向角散射与被测细胞的大小有关。目前采用这 两个参数组合， 可区分裂解红细胞后外周血白细胞中淋巴细胞、 单核细胞和粒细胞三个细胞 群体，或在未进行

18、裂解红细胞处理的全血样品中找出血小板和红细胞等细胞群体。67. 一般对DNA倍体测量时采用荧光信号的面积，荧光信号的宽度常用来区分双联体细胞。68. 荧光染料的选择和标记细胞的方法是保证荧光信号产生的关键技术。69. 外周血中 RBC:WBC:PLT=500:1:3070. 血细胞分析仪（BCA）是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的常规检验仪 器，其主要功能时血细胞计数、白细胞分类、血红蛋白测定、相关参数计算等。71. 按对白细胞的分类水平可分成二分群、三分群、五分群、五分群+网织红 BCA72. 电阻抗法血细胞检测原理： 血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体， 其电阻值比稀

19、释液的大； 当血细胞经过检测器微孔的孔径感受区时， 检测器内外电极之间的恒流源 电路上， 电阻值瞬间增大， 产生一个电压脉冲信号； 产生的脉冲信号数， 等于通过的细胞数， 脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比。 根据欧姆定律， 在恒电流电路上， 电压变化与电 阻变化成正比。 电阻值又同细胞体积成正比， 血细胞体积越大，电压越高， 在甄别器的脉冲 幅度就越大， 各种大小不同细胞产生的脉冲信号分别送入仪器内电脑的各个通道，经运算得出各种细胞参数。73. 第一群是小细胞区，主要是淋巴细胞，体积在 3590fl ；第二群是单个核细胞区，也称 为中间细胞群，第三群为大细胞区，主要是中性粒细胞。74. 白

20、细胞分类技术的方法有：容量、电导、光散射联合技术光散射与细胞化学联合检 测技术多角度激光散射、电阻抗联合检测技术电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术75. 网织红细胞检测原理： 采用激光流式细胞分析技术与细胞化学荧光染色技术联合对网织红细胞进行分析，即利用网织红细胞中残存的嗜碱性物质RNA在活体状态下与特殊的荧光染料结合；激光激发产生荧光， 荧光强度与RNA含量成正比；用流式细胞技术检测单个的网 织红细胞的大小和细胞内 RNA勺含量及血红蛋白的含量；由计算机数据处理系统综合分析检测数据，得出网织红细胞计数及其他参数。76. 国际ICSH推荐的氢化高铁（HICN法的最大吸收峰在 540nm。77.

21、 电阻抗检测系统：由检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿 装置组成。78. 血凝仪使用的检测方法主要有：凝固法、底物显色法、免疫学法、干化学法等。半自动 血凝仪基本上以凝固法检测为主。79. 凝固法通过检测血浆在凝血酶激活剂作用下一系列物理量的变化。80. 双磁路珠法不受溶血、黄疸及高脂血症的影响。81. 血凝仪性能评价的标准：精密度（即重复性）线性准确性携带污染干扰可 比性分析82. 仪器和加珠器（磁珠法）都必须远离强电磁场干扰源。83. 血凝仪的临床应用：凝血系统的检测：常规筛选实验如PT、APTT TT测定；单个凝血因子含量或活性的测定如 fib、凝血因子n、v、忸

22、、区、x、xi、xn。抗凝系 统的检测纤维蛋白溶解系统的检测临床用药的监测84. 凝固法是血液凝固分析仪（ACA使用的最基本、最常用的方法。85. 尿液分析临床意义：是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一，通过对尿液物理学检查 和化学检查， 可观察尿液物理性状和化学成分的变化。 在尿液沉渣检查中能够看到的有形成 分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细菌、精子及由尿液中沉析 出来的各种结晶 （包括药物结晶）等。这些检查资料对肾和尿路疾患的诊断、鉴别诊断以及 疾病的严重程度和预后的诊断，都有极重要的意义。86. 尿液分析仪按测试项目分类为： 8项尿液分析仪、 9项尿液分析仪、 1

23、0项尿液分析仪、11项尿液分析仪和12项尿液分析仪。检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿PH尿酮体、尿胆红素、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C和浊度。87. 空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出的测试误差，提高测量准确度而设置的。88. 多联试剂带结构：尼龙膜、绒制层、吸水层、塑料底层。89. 尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化。90. 试剂带侵入尿样的时间为 2 秒。91. 迄今为止尿沉渣分析仪大致有两类， 一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析， 得出 相应的技术资料与实验结果；另一类是流式细胞术分析。92. 流式细胞术尿沉渣分析仪工作原

24、理：当一个尿液标本被稀释并经染色液染色后，靠液压 作用通过鞘液流动池， 反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时， 被一种无粒子颗粒的鞘 液包围，使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心 （竖直） 轴线， 在这里每个尿液细 胞被氩激光光束照射。 每个细胞有不同程度的荧光强度， 从染色尿液细胞发出的荧光， 主要 反映细胞的定量特性，如细胞膜、核膜、线粒体和核酸；前向散射光强度，它成比列地反映 细胞的大小和电阻抗的大小 （电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比） 。仪器是将这种荧光、 散射光等光信号转变成电信号， 并对各种信号进行分析， 最后得到每个尿液标本产生出的直 方图和散射图。通过分析这些图形，

25、即可区分每个细胞并得出有关细胞的形态。93. 流式细胞术全自动尿沉渣分析仪包括光学检测系统、 液压系统、 电阻抗检测系统和电子 系统。94. 前向散射光信号主要反映细胞体积的大小。前向散射光强度反映细胞横截面积；前向散射光脉冲宽度Fscw反映细胞的长度。95. 前向荧光信号主要反映细胞染色质的长度。荧光强度主要反映细胞染色质的强度； 前向荧光脉冲宽度FI w反映细胞染色质的长度。96. 尿沉渣分析仪的检测项目红细胞（ RBC）白细胞，上皮细胞（EC）,管型，细菌，导电 率的测定。97. 影响红细胞沉降的因素很多，主要包括红细胞的形态和大小、红细胞的变形性、红细胞 的聚集性、红细胞间的相互作用、

26、血细胞比容、血浆介质和上升流动、沉降管的倾斜度等。98. 红细胞沉降过程表现为悬浮、聚集、快速、缓慢沉降四核阶段。99. 要求在30秒钟内完成1ml左右的采血且不能淤血和溶血，标准化方法要求使用新鲜人血，血沉值为 15-105mm/h.100. 根据仪器反应装置结构不同，自动生化分析仪可分为连续流动式、离心式、分立式和 干化学式。101. 离心自动生化分析仪由加样系统和分析系统两部分组成。102. 分立式自动生化分析仪是目前国内外应用最多的一类自动生化分析仪。103. 自动生化分析仪大多采用卤素灯，工作波长为325-800nm,少数采用氘灯，工作波长为285-750nm。104. 自动生化分析

27、仪测定时主波长的吸光度减去副波长的吸光度可消除溶血、浊度等干扰 物的影响,提高测定结果的准确性。105. 常用的自动生化分析仪分析方法有：终点分析法：是通过测定反应开始至反应达到平衡时的产物或底物浓度的总变化量来求出待测物浓度或活性的方法。可分为一点法： 指样品和试剂混合后, 反应一定时间到达终点时, 通过吸光度的检测计算待测物浓度。 两点 法又称固定时间法, 包括单试剂两点法和双试剂两点法。 单试剂两点法是指样品和单一试剂 混合后分别读取延滞期后和反应一定时间后的吸光度,计算待测物浓度； 双试剂两点法是指双试剂，加入样品后分别读取试剂i、n吸光度值，即样品空白值和实际呈色反应值，计算待测物浓

28、度。双波长法：通过双波长检测消除非呈色反应吸光度，对溶血、黄疸和混合标本起校正作用，并对电源波动有补偿作用。连续监测法：又称速率法，是通过连续测定酶 促反应过程中某一反应产物或底物的吸光度, 根据吸光度随时间的变化求出待测物浓度或活 性的方法。 比浊测定法： 是一种浊度测定, 通过检测物质对光的散射或透射强度来测定物 质,可分为化学比浊法和免疫比浊法。106. 由酶标仪的工作原理方框图和光路图可以看出它和普通光电比色计的不同之处：一是盛装比色液的容器不是使用比色皿, 二是使用塑料微孔板。 塑料微孔板常用透明的聚乙烯材 料制作。 采用塑料微孔板来做固相载体, 是利用它对抗原或抗体有较强的吸附这一

29、特点。 二 是酶标仪的光束是垂直通过待测液即微孔板的。三是酶标仪是使用光密度OD来表示吸光度。107. 酶标仪的性能指标： 滤光片波长精度检查及其峰值测定： 检测值与标定值之差即为滤 光片波长精度，其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好。灵敏度和准确度： 灵敏度（其吸光度应0.01A）;准确度：其吸光度应在 0.4A左右。线性测定：采用双波 长平行检测 8 次。108. 酶免疫分析仪的临床应用： 病原体及其抗体的检测各种免疫球蛋白和细胞因子肿 瘤标志物的检测多种激素的检测药物和毒品的检测109. 电化学发光免疫分析的原理：电化学发光免疫分析是电化学发光和免疫测定相结合的技术,是一种在电

30、极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学2+ 发光两个过程。化学发光剂三联吡啶钉 Ru（bpy） 3 2+标记抗体,通过抗原抗体反应和磁颗粒 分离技术,根据三联吡啶钉在电极上发出的光强度的大小对待测的抗原或抗体进行定量或定性检测。110. Elecsys 分析仪应用了三种抗原抗体反应方法： 竞争免疫法夹心免疫法侨联免疫法。111. 发光免疫分析仪的临床应用： 甲状腺系统性腺系统血液系统肿瘤标记物心血 管系统血药浓度感染性疾病112. 时间分辨荧光免疫检测原理：其基本原理是用镧系三价稀土离子及其螯合物（如Eu3+螯合物）作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质,当免疫反应

31、发生后,根据稀土离子 螯合物的荧光光谱的特点 （特异性强，巨大 Stokes 位移、 荧光寿命长） ，用时间分辨荧光分 析仪延缓测量时间， 排除标本中非特异性荧光的干扰， 所得信号完全是稀土元素螯合物发射 的特异荧光， 测定免疫反应最后产物的特异性荧光信号。 根据荧光强度判断反应体系中分析 物的浓度，达到定量分析的目的。113. 时间分辨荧光免疫分析的特点：特异性强灵敏度高标记物稳定荧光信号强； 时间分辨荧光免疫检测动态范围宽， 可达 4-5 个数量级； 标记物制备简单， 稳定性好， 有效 使用时间长，多数可达 6 个月，标记蛋白时反应条件温和，免疫活性很少受损；测量快速， 每秒钟测一个样品；

32、 易于自动化； 已开发出性能优良的数据处理软件， 以及多标记物的使用 等也是其突出优点。114. PCR技术的原理：PCR技术的本质是核酸扩增技术，通过加热使双链 DNA解开螺旋，在 退火温度条件下引物同模板 DNA杂交，在TaqDNA聚合酶、dNTPs M2+和合适PH缓冲液存在 条件下延伸引物，重复上述“变性退火引物延伸” 过程至 2540 个循环，呈指数级扩 大待测样本中的核酸拷贝数，达到体外扩增核酸序列的目的。115. 实时荧光定量PCR（RQ-PCR技术是在PCF反应体系中加入特异性的荧光染料或探针， 荧光信号的变化真实的反应了体系中模板的增加，通过检测荧光信号，可以实时监测整个PC

33、F反应过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。定量PCF仪通常由PCR系统和荧光检测系统两部分组成。116. 温度控制是决定 PCR反应能否成功的关键。117. 不论是变性、退火还是延伸都需要准确控制温度。118. 用同样的样品，同样的PCR反应程序，最后的结果差异非常明显， 或许就是因为不同样 品孔的温度不均一性所致。119. 不同模式下的相同温度特性主要针对梯度 PCF仪而言。还应考虑仪器在梯度模式和标准 模式下是否具有同样的温度特性。 如果存在差异， 则可能导致在梯度模式下得出最佳反应条 件，并以此条件在标准模式下单独做，但结果却不如大意。120. 热盖：可使样品管顶部温度达到150 C左右，避免蒸发的反应液凝集于管盖而改变PCR反应体积。 无需加石蜡油， 减少了后续试验的麻烦。 旋转加压的热盖需注意旋转压力的控制， 过松则使热盖没有充分接触反应管而影响结果； 过紧则会导致反应管变形， 甚至可能造成热 盖的机械故障。121. 荧光强度减弱或不稳定原因有滤光片发霉或有水汽等，需工程师检修； 或光源损耗 （以卤钨灯为光源的） ，需要更换光源；或需调节检测元件灵敏度，也需工程师调试。122. 目前DNA测序仪的工作原理主要利用 San ger双脱氧链末端终止法或 Maxam-Gilbert 化学降解法。123.