检测方法的确认和验证

1、最新资料推荐检測方法的确认和验证检测方法确认和验证13 / 20? 4. 5. 14检验检测机构应建立和保持检验检测方法控制程序。 检验检测方法包括标准方法、非标准方法（含自制 方法）。 应优先使用标准方法，并确保使用标准的有效版本。 在使用标准方法前，应进行证实。在使用非标准方法（含自制方法）前，应进行确认。 检验检测机构应 跟踪方法的变化，并重新进行证实或确认。 必要时检验检测机构应制定作业指导书。如确需方法偏离，应有文件规定，经技术判断和批准，并征得客 户同意。当客户建议的方法不适合或己过期时，应通知客户。?非标准方法（含自制方法）的使用，应事先征得客户同意，并 告知客户相关方法可能存在

2、的风险。需要时，检验检测机构应建立和保持开发自制方法控制程序，自 制方法应经确认。? 1、检验检测机构应建立和保持检验检测方法控制 程序。检验检测机构应使用适合的方法（包括抽样 方法）进行检验检测, 该方法应满足客户需求，也应是检验检测机构获得资质认定许可的 方法。查：是否建立和保持使用适合的检验检测方法和方法确认的程 序；？ 2、检验检测方法包扌舌标准方法和非标准方法，非标准方法 包含自制方法。? 3、当客户指定的方法是企业的方法时，则不能直接作为资质 认定许可的方法，只有经过检验检测机构转换为其自身的方法并经 确认后，方可中请检验 检测机构资质认定。?4、检验检测机构在初次使用标准方法前，

3、应证实能够正确地运 用这些标准方法。如果标准方法发生了变化，应重新予以证实，并提供相关证明材 料。查：（1）检验检测报告是否使用检验检测标准的有效版本。（2）方法使用前是否进行验证，保留方法验证记录，以证实检 验检测机构能有效使用这些方法。5、检验检测机构在使用非标准方法前应进行确认，以确保该方法 适用于预期的用途，并提供相关证明材料。查：非标准方法（含自制方法）使用前是否经确认，方法变更后 是否重新进行确认，保留确认和验证记录。如果方法发生了变化，应重新予以确认，并提供相关证明材料。查方法变更后是否进行验证，保留方法验证记录，以证实检验检 测机构能有效使用这些方法。6、如果标准、规范、方法不

4、能被操作人员直接使用，或其内容不 便于理解，规定不够简明或缺少足够的信息，或方法中有可选择的 步骤，会在方法运用时造成因人而异，可能影响检验检测数据和结 果正确性时，则应制定作业指导书（含附加细则或补充文件）。查：是否制定必要的作业指导书，查证作业指导书目录，审核其 内容是否满足要求。查：核查检验检测细则（或作业指导书）是否满足要求。（必要时，细化标 准要求）?7、偏离指一定的允许范围、一定的数量和一定的时间段等条件下 的书面许可。检验检测机构应建立允许偏离方法的文件规定。不应将非标准方法作为方法偏离处理。查：方法偏离是否同时满足：有方法偏离文件规定和经技术判定 不影响结果、经批准和客户同意四

5、个条件，实施方法偏离时，是否 保留记录。? 8、当客户建议的方法不适合或己过期时，应通知 客户。如果客户坚持使用不适合或已过期的方法时，检验检测机构应在 委托合同和结果报告中予以说明，应在结果报告中明确该方法获得 资质认定的情况。查查：客户建议的检验检测方法不适当时，机构是否通知客户， 是否有必要的记录。?9、检验检测机构应制定程序规范自己制定的检验检测方法的设计开 发、资源配置、人员、职责和权限、输入与输出等过程，自己制定的 方法必须经确认后使用。?查：非标准方法的使用，是否与客户达成协议。协议中是否包扌舌能否满足客户要求的说明。?查：非标准方法（含自制方法）的使用，事先征得客户同意， 并告

6、知客户相关方法可能存在的风险等情况记录。?在方法制定过程中，需进行定期评审，以验证客户的需求能得 到满足。使用自制方法完成客户任务时，需事前征得客户同意，并告知客 户可能存在的风险。查：检验检测机构应建立和保持开发自制方法控制程 序（无参照 方法情况），?查：是否有自定方法，是否是有计划及指定有资格经 验的人员进行该项工作（查人员要求）。?查：是否进行方法的可靠性确认和验证、规定方法的评价和使 用等。是否实施受控管理并保存记录。比较证实对象目的确认非标方法是否使用偏离标准、非标临时使 用、非常态技术判定（一定误差范围内、一定的数量、一定的 时间段）标准方法是否有能力按照标准方法展开检测校准工作

7、从“人机料法环测”去证明方法用五种方法来 确认或组合时限使用 一段时间在转化为标准方法前偏离后仍需回归常态?确认应是以下五种中的一种或组合，是成 本、风险和技术可行性 的一种平衡（不确定度、检出限、方法的选择性、线性、重复性、 稳健度、基体干扰等）？1、使用参考标准或参考物质；2与其他方 法比较；3、实验室间比对；4、对影响结果因素系统评价；5、不确 定度的评定？保留确认和验证记录检测方法的研究验证？参照实验室质量控制规范 食品理化检测（GB/T 27404-2008）对选择的检测方法应 分别对方法选择性、回收 率、标准（校准）曲线、精密度等技术要素进行确认，必要时测定 低限、准确度、稳定性、

8、适用性（耐用性）提取效率、不确定度（SD） 等要素进行确认。选择性？对所选的方法，根据配方中各成分可能存在的干扰分别进行 试验。在功效成分（如总黄酮）来源于配方多种物质，应研究各物质对其 指标的贡献。选择性是衡量某一方法在实用中受其他因素影响程度大小的一 种量度。较高的选择性，是获得较高准确度的条件之。?用某种分析方法测定某组分时，能够避免样品中其他共存组分 干扰的能力。选择性的表示通常在指定的测量准确度下，共存组分的允许量与 待测组分含量的比值。?n=W （共存组分）/W （待测组分），比值越大，表明在指定的准确度下，该仪器方法的抗干扰能力越强，即选择性越好。提高分析方法的选择性是分析化学中

9、的一个研究内容。?可以通过不同的途径加以改善或提高。常取途径有二：从仪器上改进，例如，采用高效液相色谱法可 以大大提高色谱分析的选择性。在紫外-可见分光光度法中采用多阶导数处理，不仅可以使灵敏 度得到提高，更重要的是使方法选择性得到改善。改进分析对应的条件，合理选择反应的酸度、介质、反应离子 的价态以及使用隐蔽剂等。 回收率？回收率是在没有标准物质情况下，测定的平均值与真值相符 的程度。应在标准值点、标准值点的上下20%,或标准曲线内的高中低进 行三水平试验，或在方法测定低限、两倍方法测定低限和十倍方法 测定低限进行三水平试验;对于己制定最高残留限量(MRL)的，回收 率应在方法测定低限、MR

10、L、选一合适点进行三水平试验;对于未制 定MRL的，回收率应在方法测定低限、常见限量指标、选一合适点 进行三水平试验。用回收率表示方法，加入的标准物质的回收率按式(1)进行计算。P二(xl-x2)/m (1)式中：P加入的标准物质的回收率；m 加入的标准物质的量；XI加标试样的测定值；X2未加标试 样测定值。回收率的参考范围见表2o表2回收率范围被测组分含量/(mg/kg)回收率范围/% >100 95-1051-10090-1100. IT 80-110<0.160 一120? ?标准（工作）曲线？应描述校准曲线的数学方程以及校准曲线的工 作范围，浓度范围尽可能覆盖一个数量级，至

11、少作5个点（不包括空 白）。相关系 数（r）不应低于0. 99,测试溶液中被测组 分浓度应在 校准曲线的线性范围内。?回归方程的计算在绘制标准曲线时，可用 直线回归方程式计 算，然后根据计算结果绘制。用最小二乘法计算直线回归方程的公式y=a+bXo精密度？同一样品的各测定值的符合程度为精密度。精密度试验值应在标准值点或20%,或标准曲线内的高中低三 水平试验值内。对于已制定MRL的，精密度 实验应在方法测定低限、MRL、选一 适合点三个水平进行；对于未制定MRL的，精密度实验应在方法测 定低限、常见限量指标中选一适合点三个水平进行。重复测定次数至少为6。实验室内部的变异系数参考范围见表3o在某

12、一实验室，使用同一操作方法，测定同一稳定样品时，允许 变化的因素有操作者、时间、试剂、仪器等，测定值之间的相对偏 差即为该方法在实验室内的精度。表3实验室内变异系数(CV)/%被测组分含量CV%被测组分含量 CV% 0. 1 U g/kg 43 100 mg/kg 5. 3 1 U g/kg 30 1 000 mg/kg 3. 8 10 n g/kg 21 1% 2. 7 100 u g/kg 15 10% 2. 0 1 mg/kg 11 100% 1. 3 10 mg/kg 7. 5?检测限、定量下限测定低限（主成分测定可不需 要）？把3倍空白值的标准偏差（测 定次数n220）相对应的质量或

13、浓度称为检出限。方法的测定低限按式（2）计 算：CL二3Sb/b （2）式中：CL方 法的测定低限；Sb空白值标准偏差（一般平行测定20次得到）；b- 方法校准曲线的斜率。色谱法（GC、HPLC）设：色谱仪最低响应值为S二3$ （N为仪器噪 音水平），则检出限按式（3）进行计算。检岀限二最低响应值/b = S/b （3）式中：b标准曲线回归 方程中的斜率，响应值/Ug或响应值/ng； S为仪器噪音的3倍, 即仪器能辨认的最小的物质信号。7. 5.2吸光法和荧光法按国际理论与应用化学家联合（IUPAC） 规定。全试剂空白响应值按式（4）进行计算。XL二平均值+Ks （4）式中：XL全试剂空白响应

14、值（除不加 试样外，采用完全相同的分析步骤、试剂和用量（滴定法中标准滴定 液的用量除外），进行平行操作所得的结果。平均值测定n次空白溶液的平均值（nN20）； sn次空 口值的标准偏差；K根据一定置信度确定的系数。对于已制定MRL的物质，方法测定低限加上样品在MRL处的标准 偏差的三倍，不应超过MRL值。对于禁用物质，方法测定低限应尽可能低。准确度？重复分析标准物质（实物标样）或水平测试样品，测定含量（经回收率校正后）平均值与真值的偏差指导范围见表3o?表3测定值与真值的偏差指导范围？真值含量/（mg/kg）偏差 范围/% ? <O . 001 -50+20 ? 0 . 0010. 01

15、 -30+10 ? 0 . 01010 -2010 ? 10、1000 <15 ? 100010000 <10 ? 10 000 <519 / 20最新资料推荐稳定性？在测定的浓度下，设置不同的时间段进行测定，经过实验证明样品稳定的时间。耐用性？方法应具有对可变试验因素的抗干扰能力，当测定条件发生 细小变动时，方法应具有一定的保持测定结果不受影响的承受程 度。并给出平行两次测定的允差。?例如，分析中的样品性质、？ pH值、温度、所用试剂品种及 使用量、人员等分析条件在适当的范围内改变时，对测定值的稳定 性进行的研究结果。其中，试样性质是需要重点考虑的内容之一，任何一种方法都有 其试样适应范围，能否针对某种试样采用该分析方法需要经过严格 的验证，技术参数符合要求时方可采用，并形成相应的报告。?不同的色谱柱、试剂批号和牌号之