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文档简介

1、实验一 尿肌酐和尿比重的测定 （一）尿肌酐的测定-分光光度法 肌酐又称肌酸酐，是肌酸和磷酸肌酸的代谢终产物，主要有肌肉中磷酸肌酸的非酶促反应生成，通过尿液排除体外，正常人每日尿中排出的肌酐量是恒定的，浓度随尿量的多少而变化，用来校正尿液浓度值。正常范围是0.41.3g/L。 实验目的 掌握碱性苦味酸法测定尿肌酐的原理；熟悉实验操作步骤和分光光度计的使用；了解尿肌酐的测定方法的注意事项。实验原理 肌酐与过量苦味酸在碱性条件下反应生成橙红色苦味酸肌酐后，在波长490nm处比色定量。实验仪器与试剂 1.仪器 分光光度计，比色杯 2.试剂 饱和苦味酸溶液（15g/L） 氢氧化钠溶液（100g/L） 碱

2、性饱和苦味酸溶液 盐酸 肌酐标准溶液 实验步骤 1.样品的采集和保存 按所接触毒物或其代谢产物所规定的采样时间，用50ml聚乙烯塑料瓶收集尿样，冷藏运输，于4摄氏度下可保存2周。 2.标准曲线绘制及样品的测定 样品处理：取0.1ml尿样至于10ml比色管中，加水至3ml 试剂空白：取3ml水置于10ml比色管中。 标准曲线的绘制：取6支10ml比色管，按下表配置标准溶液 向各管中加入2.0ml碱性苦味酸溶液，混匀，于室温下反应2030分钟。加5ml水混匀后，以零管做参比，波长490nm下测吸光值，在0.5小时内比色完毕。每个浓度测定3次，求平均吸光值。 测定：求标准曲线。 （肌酐）=1f （肌

3、酐）-尿中肌酐的浓度。 1-标准曲线上计算的肌酐浓度。 f-尿样稀释倍数，30.注意事项：1.注意非特异的色素原干扰。 2.温度在1520显色稳定，反应温度控制在30.（二）尿比重的测定-光折射法 尿比重作为估计肾浓缩稀释功能的指标，与尿中水分、盐类及有机物的含量有关。常被用来校正尿液的浓度变化。我国推荐尿比重校正参照值为1.020. 实验原理 掌握尿比重的测定原理和过程；熟悉尿比重折射仪的使用。了解尿比重测定的注意事项。 实验原理 利用溶液中总固体量与溶液对光的折射率之间存在的相关性，以纯水做参考，测定尿液比重。仪器与试剂 尿比重计 胶头滴管 尿杯 纯水实验步骤 1.样品采集和保存 2.尿样的测定 尿比重折射仪的调零：用纯水洗净棱镜表面并用软纸吸干。用胶头滴管滴23滴纯水在棱镜表面，按调零按钮调零。 尿样测定：洗净棱镜并吸干，滴23滴尿样。 测定数值即为尿样的比重值。注意事项1.尿液不可冷冻。会导致沉淀。2.尿样如浑浊，应离心后，取上清液测定。3.尿

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