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文档简介

1、5.2 DNA基本操作技术蒋耀文1、琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为()A 3006000bpB 251000bpC 20050000bpD 30020000bp2、细菌转化中的电击法转化与温度有关,下列哪个温度最适()A -15-10B 04C 2025D 901003、细菌转化时常需要对受体细菌进行处理,使之成为感受态细胞以增强他们获取DNA的能力。_是制备大肠杆菌感受态最常用的化学方法。4简述什么是细菌转化。答案:C B CaCl2法 细菌转化是指一种细菌菌株由于捕获了外源DNA而导致性状特征发生遗传改变的生命过程。金熙1.PCR技术中文全称为: 2.PCR技术一个循环包括: 、 、 、

2、三个步骤。3.基因组文库必须具有一定的 性和 性4.用荧光检测对整个PCR过程中扩增DNA的累积速率可以进行动态监视的技术为 技术。答案:1、(聚合酶链式反应or聚合酶链反应)2、(高温变性or高温解旋),(低温退火),(中温延伸)3、(代表性)、(随机性)4、(实时定量PCR)5.3 RNA基本操作技术张恩民 康文艳1 下列关于cDNA文库的说法正确的是()A 一个高质量的cDNA文库代表了生物体某一或者组织mRNA中所给的全部或绝大部分信息B 第二链cDNA合成的引物为oligodTC 在cDNA合成的过程中,应选用活性适宜的反转录酶及甲基化dCTPD 在cDNA合成过程中,cDNA两端需

3、加上相同内切酶所识别的接头序列2 cNDA的长度一般为()A0 8 kbB. 0.5 8 kbC. 0.5 10 kbD. 8 10 kb3. 下列选项中不属于基因文库筛选方法的是() A核酸杂交法 BPCR筛选法 C免疫筛选法 DSAMROC筛选法4简述cDNA的合成过程5细胞中RNA可分为 、 、 以及一些 。6mRNA纯化的常用方法为 7. 判断RNA凝胶电泳在变性条件下进行()8判断目前实验室总RNA抽提常用方法是异硫氰酸胍-苯酚抽提法()答案1 A2 B3 D4 以mRNA为模板,以oligodT为引物,用反转录酶催化合成第一链cDNA;第二链以第一链为模板,常以RNaseH切割mR

4、NA-cDNA杂合链中的mRNA序列所产生的小片段为引物,由DNA聚合酶催化合成5 mRNA、rRNA、tRNA、小RNA(sRNA)6 寡聚(dT)-纤维素柱色谱法7 对8 对5.4 SNP的理论与应用周悦媛1、解释SNP的含义2、根据SNP在基因中的位置可分为哪三类?3、基因分型主要包括哪几种方法?4、导致生物性状改变的直接原因答案1.答:单核苷酸多态性,指基因组DNA序列中由于单个核苷酸的突变而引起的多态性。2.答:基因编码区SNP(cSNP)、基因调控区SNP(pSNP)、基因间随机非编码区SNP(rSNP)3.答:基因芯片技术、Taqman探针技术、分子信标技术、焦磷酸测序法。4.答

5、:非同义SNP。5.5 基因克隆技术陈玲 单洁玲1 名词解释RACE技术: 2.填空(1)cdna差示分析法充分发挥了PCR能以 扩增双链DNA模板,而仅以 形式扩增单链模板的特性。(2)Gateway克隆技术主要包括 和 (3)基因的图位克隆法的目的: 3.单选从分子生物学的角度,克隆是(D)A具有相同基因型的同一物种的俩个或数个个体组成的群体B同一受精卵分裂而来的单卵双生子C同一祖细胞分裂而来的一群带有完全相同遗传物质的子细胞D将外源DNA插入具有复制能力的载体DNA,使之得到永久保存和复制4.多选Cdna序列有哪些来源()A序列表达标签B减法cdna库C差式显示D基因文库筛选5.判断Ga

6、teway基因大规模克隆法利用菌体进行位点特异性DNA片段重组。()6.简答举出有关基因克隆的具体技术,并简单描述(1)RACE技术:(2)RDA:(3)Gateway大规模克隆技术:(4)基因的图位克隆法: 答案:1. 利用PCR技术在已知部分CDNA序列的基础上特异性克隆5端或3端缺失序列的方法。2. 1)指数形式 线性2)TOPO反应 LR反应 3)分离未知性状的目的基因3.D4.ABCD5.对6.1)在已知部分CDNA序列的基础上特异性克隆5端或3端缺失序列的方法。2)特异性扩增目的基因片段3)利用菌体进行位点特异性DNA片段重组,实现不需要传统酶切连接过程的基因快速克隆和载体间平行转

7、移,为大规模克隆基因组注释的可译框架提供了保障。4)分离未知性状的基因的一种好办法。5.6蛋白质组与蛋白质组学技术周哲典 马永豪1.Western blot中二抗的作用是A 稳定一抗的结构 B放大信号 C排除非特异性的结合2.以下哪项不是二级抗体的常见分类A放射性标记的抗体 B与酶偶联的抗体 C本身能发光的抗体 D与生物素相偶联的抗体3.双向电泳技术根据蛋白质哪两个特性被分离A颜色 B亲水性 C等电点 D手性碳的个数 E相对分子质量 F热稳定性4.MALDI-TOP与ESI-MS的研究操作对象是 A DNA片段 B RNA片段 C氨基酸 D肽段答案 B、C、C和E、D、6.1基因表达研究技术刘

8、文斌 (马领的题目还没有)1 原位杂交通常分为 和 两大类。2 下列哪些技术属于PCR介导的定点突变技术( ) A盒式诱变 B.大引物诱变法 C.重叠延伸技术 D.FISH技术3 PCR介导的定点突变方法与经典定点突变方法相比,具有以下哪些特点( )? A可在同一试管中完成所有反应 B、快速简便C、突变体回收率高 D、不能用双链DNA作为模版答案:1. RNA原位杂交、染色体原位杂交 2. B C 3. ABC6.2基因敲出技术赵聪还没有出题6.3蛋白质及RNA相互作用技术吕政1.酵母单杂交系统是20世纪90年代中期发展起来的新技术,常用于研究 和 之间的相互作用。酵母双杂交体系巧妙地利用真核

9、生物转录调控因子的组件式特征,因为这些蛋白质往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成,其中 结构域和 结构域是转录激活因子发挥功能所必需的。答案:1.DNA和蛋白质 2. DNA结合 转录激活6.4基因芯片及数据分析曹浩文1. 简易基因芯片一般可以用手工制作或者 2. 为了保证基因芯片数据的可靠性,芯片中还需要加入多个 。3. 简述基因芯片技术的原理4 为什么基因芯片中加入持家基因作为内对照可以保证基因芯片的数据可靠性:参考答案:1.机械手点样 2.持家基因 3.将大量已知或未知序列的DNA片段固定化,将芯片与待研究的CDNA或其他样品杂交,观察处理分析其表达调控状况。 4.持家基因是一类维持

10、细胞正常生长发育的必须基因,其表达水平在细胞内不变,因而可以作为确定其他基因表达信号的相对值李佳1. 基因芯片(GENE CHIP)又称 (DNA microarray)2. 基因芯片分析分为五个基本步骤:生物学问题,样品制备,生物化学反应,检测以及 。3. 简述微珠芯片与其他的芯片技术相比较的优势(写出两个即可):4. 简述生物化学代谢途径分析提出的意义:参考答案:1.DNA微阵列 2.数据模型分析 3.密度高,测试重复性好,定制方便 4.操作性强,而且可以将各基因定位到不同代谢途径中并进行统计分析,更简便更有效的处理基因芯片得到的数据信息6.5 利用酵母鉴定靶基因功能吴临远1.判断:酵母菌

11、有三种交配型,分别是MATa,MAT,MATa/,他们都能分别与另两种交配型交配。2.判断:酵母在有氧和无氧条件下都可以生存。3.选择题:利用Yip对酵母基因组进行基因置换,如果该基因是生存必须,那么四分体孢子分离后可以存活与死亡的比例为A、1:3 B、2:2 C、1:3 D、0答案1.错2.对3.B王洁1.酵母细胞的交配型(A、B、C)A.MATaB.MATC.MATa2. 酵母单倍体和二倍体细胞的差异(A、B、C)A.二倍体细胞直径大约是单倍体的1.3倍。B.二倍体细胞呈长形或卵圆形,单倍体细胞通常接近圆形。C.二倍体细胞按极性方向出芽,单倍体细胞按轴线方向出芽,即出芽方式不同。判断3.二

12、倍体酵母细胞在低氮、无发酵性碳源的条件下能通过减数分裂形成单倍体孢子。4.基因置换一般在单倍体中进行。答案1ABC 2ABC 3对 4 错6.6 其他分子生物技术严天宇1.在噬菌体基因组中,目前发现的基因有60多个,其中一半左右参与了噬菌体生命周期的调控,这类基因称为 ,另外一部分基因称为 2.噬菌体展示可用来研究( )A蛋白质-蛋白质相互作用 B蛋白质-核酸相互作用 C核酸-核酸相互作用 D噬菌体外壳蛋白性质 答案 1. 必须基因 非必须基因 2. A第二章习题2.有关DNA Tm值的叙述,不正确的是?D A.与碱基含量有关 B.无种属特异性 C.与G-C含量成正比 D.与A-T含量成正比3

13、.DNA解键温度指的是:B A.DNA开始解链时所需的温度 B.A260nm达到最大值50%时的温度 C.DNA完全解键时所需要的温度 D.A260nm达到最大值时的温度4.下列有关DNA变性与复性的叙述,正确的是()DA. 复性后的DNA不可能再变性 B.热变形DNA的迅速降温过程称为退火 C.热变性DNA迅速冷却到4可复性 D.热变性DNA经缓慢冷却可复性5.以下哪一项不是维持DNA双螺旋结构稳定性的力是()CA.碱基对之间的氢键 B.双螺旋内的疏水作用 C.二硫键 D.碱基堆积力6.维持DNA双螺旋结构稳定的力不包括()AA.碱基分子内能 B.氢键 C.碱基堆积力 D.van der w

14、aal力7.根据中心法则,遗传信息的传递方式是()BA.RNA-DNA-蛋白质 B.DNA-RNA-蛋白质 C.RNA-RNA-DNA D.蛋白质-RNA-DNA8.以下没有参与DNA复制的酶是:DA.解螺旋酶 B.连接酶 C.引发酶 D.限制性内切酶 9.关于DNA复制的叙述,错误的是?CA.是半保留复制 B.需要DNA指导的DNA聚合酶参加 C.能从头合成DNA链 D. 10.有关DNA复制的叙述,错误的是?DA.新链的方向与模板链方向相同 B.新链的延伸方向是5-3 C.需要DNA聚合酶参加 D.合成的新链与模板链完全相同1.某双链DNA分子中,A的含量为15%,则C的含量为(35%)2

15、.DNA复制过程中,滞后链的引发是由(引发体)来完成的3.所以细胞中都带有不同类型、能识别受损核苷酸位点的糖苷水解酶,它能特异性切除受损核苷酸位点上的N-B-糖苷键,在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点,统称(AP)位点。1.高等真核生物的大部分DNA不是编码蛋白质 T2.所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成亲自链DNA的模板,这样新产生的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成 T3.真核细胞DNA聚合酶和原核细胞的DNA聚合酶一样,都具有核酸外切酶活性 F4.原核生物DNA复制过程中,冈崎片段合成的方向与复制叉移动的方向相同 FCDBDC ABDCD第三章习题1.含有较多稀有碱基的核酸是:

16、BA.rRNA B.tRNA C.mRNA D.线粒体DNA2.关于真核生物mRNA的叙述,正确的是:BA.在细胞质内合成和发挥功能 B.前体是hnRNA C.没有帽子结构 D.半衰期比其他RNA长3.mRNA合成的原料是:BA.ATP,CTP,GTP,TTP, B.ATP,CTP,GTP,UTP C.dATP,dCTP,dGTP,dTTP D.dATP,dCTPd,GTP,dUTP4.以下有关DNA复制和转录的叙述,正确的是: BA.DNA复制过程新链的合成方向是5-3而转录过程新链的合成方向是3-5 B.复制的产物通常大于转录的产物 C.两过程均需要RNA引物 D.在生物体内只有一条DNA

17、链转录5.DNA分子中,被转录的链也称:AA.模板链 B.编码链 C.互补链 D.随从链6.原核生物RNA聚合酶中专门负责识别启动子的是:AA.o因子 B.a亚基 C.w亚基 D.B亚基7.以下有关转录的叙述,正确的是:CA.DNA复制中合成RNA引物不是转录 B.逆转录也需要RNA聚合酶 C.转录就是一种酶促的核苷酸聚合过程 D.转录就是合成mRNA的过程8.有关不对称转录的叙述,正确的是:BA.转录时RNA链可以从5-3延长或3-5延长 B.不同基因的模板链不一定在同一条DNA链上 C.分子中有一条DNA链不含任何结构基因 D.同一条RNA分别自两条DNA链转录9.真核生物中催化生成tRN

18、A和5SrRNA的酶是:DA.RNA聚合酶I B.RNA聚合酶II C. D.RNA聚合酶III10.外显子是:AA.真核生物基因的编码序列 B.真核生物基因的非编码序列 C.不转录的DNA D.基因突变的结果答案: BBBBA ACBDA1.原核生物的DNA指导的RNA聚合酶核心酶的组成是:(a2BBw)2.DNA片段转录时,双链DNA中只有一条链作为转录的模板,这种转录方式叫:(不对称转录)3.在细菌中,有一种启动子突变发生时,Pribnow区从TATAATA变成AATAAT,就会降低其结构基因的转录水平,这种突变叫做:(下降突变)1.原核生物RNA聚合酶全酶的作用是负责链的延伸。 F2.

19、rRNA都是由RNA聚合酶I转录生成的 F3.凡是编码功能蛋白的真和基因都通过RNA聚合酶II进行转录 T4.所有真核生物mRNA都具有poly(A)尾巴 F5.线粒体和叶绿体RNA聚合酶活性不受O-鹅膏蕈碱所抑制 T第四章习题1.蛋白质合成的模板是 BA.DNA B.mRNA C.tRNA D.hnRNA2.tRNA在蛋白质生物合成中的作用是 CA.携带遗传密码 B.提供蛋白质合成的场所 C.运输氨基酸 D.指导氨基酸的合成3.只有一个密码子的氨基酸是CA.亮氨酸和丝氨酸 B.色氨酸和苏氨酸 C.甲硫氨酸和色氨酸 D.甘氨酸和色氨酸4.遗传密码的摆动性指BA.一种密码可与第三位碱基不同的反密

20、码配对 B.一种反密码可与第一位碱基不同的几种密码配对 C.反密码的第三位碱基与密码的第一位碱基不严格配对 D.一种密码可与第一位碱基不同的反密码配对5.反密码子存在于DA.mRNA上 B.核糖体 C.DNA上 D.tRNA上6.关于SD序列的叙述,正确的是DA.富含嘧啶 B.富含嘌呤 C.富含稀有碱基 D.与mRNA的3配对7.以下有关肽链的延伸的描述正确的是AA.包括后续AA-tRNA与核糖体的结合、肽键的生成和移位等步骤 B.需要fMet-tRNA参与 C.后续AA-tRNA与核糖体的结合的过程需要ATP提供能量 D.mRNA内部的AUG有可能被起始tRNA识别8.真核生物蛋白质生物合成

21、的终止信号是由BA.tRNA识别 B.RF识别 C.EF识别 D.IF(或eLF)识别1.蛋白的生物合成包括:(翻译起始;肽链延伸;肽链的终止及释放)三个过程2.tRNA分子中最大的变化发生在(多余)臂上3.原核生物蛋白质合成的起始tRNA是(fMet-tRNAfMet;Met-tRNAfMet)而真核生物的起始tRNA是4.既能识别tRNA又能识别氨基酸,对两种都具有高度的专一性的酶是(胺酰-RNA合成酶)5.大肠杆菌翻译其实过程中,30S小亚基首先与翻译起始因子1F-1、1F-3结合,通过与(SD序列)mRNA模板结合。 1.只要有信号肽链就能保证蛋白质的运转。 F2.5.8S rRNA是

22、真核生物大亚基特有的rRNa T第五章习题1.关于核酸电冰的叙述,错误的是() CA.拥堵速率与分子构象有关 B.聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨率最高 C.分子涌动的方向与净电荷有关 D.涌动速率与分子大小有关2.mRNA的序列是5ACUGAGCU3,那么通过反转录合成的cDNA的序列应该是 BA.5TGACTCGA3 B.5AGCTCAGT3 C.5AGCUCAGU3 D.5ACTGAGCT33.PCR实验的特异性主要取决于 CA.DNA聚合酶的种类 B.反应体系中模板DNA的量 C.引物序列的结构和长度 D.四种dNTP的浓度4.对限制性核酸内切酶的作用,下列那个不正确? DA.识别序列长度一般

23、为4-6bp B.识别序列具有回文结构 C.只能识别和切割双链DNA分子 D.只能识别和切割原核生物DNA分子5.关于cDNA文库与基因文库的叙述中,哪一些是不正确的 CA.cDNA文库代表了mRNA的来源 B.从不同类型细胞制备的cDNA文库可用于奋力差异表达的基因 C.cDNA文库代表的所有的DNA适合于研究基因结构和调节 D.基因组文库在理论上均等的代表了所有基因序列1.大部分真和基因都是由蛋白质编码序列和非蛋白质编码序列两部分组成,其中编码序列称为(外显子),非编码序列称为(内含子)在一个结构基因中,由于编码蛋白质的部分常被非编码序列隔开,所以,真核基因也被称为(断裂基因)2.在噬菌体

24、基因组中,目前发现的基因有60多个,其中一半左右参与了噬菌体生命周期的调控,这类基因称为(必须基因),另外一部分基因称为(非必须基因)3.一种细菌菌株由于捕获了来自另一种细菌菌株的DNA而导致性状特征发生遗传改变的过程叫做(转化),提供DNA的菌株叫做(供体菌株),接受DNA的菌株叫做(受体菌株)第七章习题1.基因的表达产物是DA.DNA B.RNA C.蛋白质 D.以上都不是2.目前认为基因表达调控的主要环节是BA.基因激活 B.转录起始 C.转录后加工 D.翻译后加工3.一个操纵子通常含有 BA.一个启动序列和一个编码基因 B.一个启动序列和数个编码基因 C.启动序列和一个编码基因 D.数

25、个启动序列和数个编码基因4.乳糖操纵子的直接诱导剂是DA.B-半乳糖苷酶 B.葡萄糖 C.乳糖 D.别乳糖5.乳糖操纵子的表达中,乳糖的作用是C A.作为辅阻遏物结合了阻遏物 B.作为阻遏物结合了操纵区 C.使阻遏物变构而失去结合DNA的能力 D.该操纵子结构基因的产物 E.引物6.葡萄糖可参与乳糖操纵子的代谢阻遏的原因 BA.与乳糖操纵子的调控毫无关联 B.与乳糖分解生成葡萄糖,因此葡萄糖的存在可成为细胞内具有正常乳糖水平的信号 C.因为葡萄糖也是B-半乳糖苷酶的底物 D.葡萄糖的存在增加了细胞内乳糖阻抑物的含量7.Lac阻遏蛋白由DA.Z基因编码 B.Y基因编码 C.A基因编码 D.I基因

26、编码 8.紫外线照射引起DNA损伤时,细菌DNA修复酶基因表达反应性增强,多基因是如何进行调控的AA.诱导 B.阻遏 C.正反馈 D.负反馈9.孢子形成、鞭毛合成以及固氮反应中,多基因是BA.多个操纵子受到同步诱导 B.按一定顺序级合成O因子,依次启动基因的转录 C.前一操纵子的终产物依序作为下一操纵的诱导物 D.只涉及单个操纵子,操纵子内含有与每一步骤相关的各个基因10.cAMP在转录的调控作用 CA.cAMP变为CAP B.cAP变为CAMP C.cAMP-CAP形成复合物 D.葡萄糖分解活跃,cAMP增加,促进乳糖利用来扩充能源 E.cAMP是激素作用的第二信使,与转录无关11.shin

27、e-dalgarno顺序(SD-顺序)是指AA.在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 B.在DNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 C.16SrRNA3端富含嘧啶的互补顺序 D.启动基因的顺序特征 E.以上都正确12.ppGpp在何种情况下被合成AA.细菌缺乏氮源时 B.细菌缺乏碳源时 C.细菌在环境温度太高时 D.细菌在环境中氨基酸含量过高时 E.细菌在环境中氨基酸含量过高时13.下列蛋白质的编码基因表达具有组织特异性的是BCDA.磷酸甘油醛脱氢酶 B.胰岛素 C.血红蛋白 D.HMG-COA裂解酶14.直接参与乳糖操纵子调控的有ADA.I基因编码 B.Z基因编码 C.Y基因编码 D.CAP 15.参与原核基因表达调控的因子有 CEA.转录激活因子 B.特异转录因子 C.激活蛋白 D.基本转录因子 E.阻遏蛋白1-5 DBBDC 6-10 BDABC 11-12 AA 13 BCD 14AD 15CE

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