园艺产品储运加工学实验指导书

1、园艺产品储运加工学实验指导书园艺产品贮藏加工学实验实习指导书陈守江 杜传来 编安徽科技学院工学院食品科学系二00七年三月说 明园艺产品贮藏加工学是我校食品类和园艺类相关专业的一门专业技术课，它是研究果蔬原料的贮藏和果蔬食品加工的一门应用学科。它以植物生理学、微生物学、化学、物理学、食品技术原理、食品工程原理以及食品工艺学导论等课程作为广泛的理论基础。它是以新鲜的果蔬原料为研究对象，了解它们的采后生理，并据此采取科学的处理来努力维持其在新鲜状态时的优良品质；以及根据果蔬原料的化学特性和加工适性来加工开发丰富多彩而又能长期保存的果蔬制品。通过本课程的学习，使学生掌握果蔬贮藏和加工的基本理论，培养学

2、生实际生产操作技能及解决果蔬贮藏及加工中实际问题的能力。园艺产品贮藏加工学是一门实践性很强的专业课，为了满足本课程的教学需要，编写了这本实验实习指导书。内容主要包括果蔬的贮藏保鲜和加工两大部分，在实际教学过程中，可根据教学安排和实验室的具体条件加以选择的进行实验。实验规则1、实验前必须预习实验指导书。2、实验前须认真检查仪器、试剂、用具及实验材料。如有破损、短缺应立即报告指导教师，经同意后方可调换和补充。3、实验过程中不得随便挪动外组的仪器、用具和实验材料。不得随意拨动仪器开关或电源开关，须按实验要求进行。4、实验材料、药品的使用，应在不影响实验结果的前提下注意节约，杜绝浪费。5、实验室应保持

3、肃静，不得谈笑喧哗，不许搞其他动作，以免影响他人实验。6、清洗仪器、用具、材料时，须将固形物倒入指定容器内，不得直接倒入水槽，以免造成水管堵塞。7、实验过程中，须按操作规程仔细操作，注意观察试验结果，应及时记录。不得抄写他人的实验实习记录，否则，须重做。如有疑问，应向指导教师询问清楚后方可进行。8、实验完毕后，须将玻璃仪器、用具等清洗干净，按原来的位置摆设放置。如有破损须报告指导教师，并填写仪器损坏登记簿。9、在进行实验过程中，不得随意食用原料和加工品。10、实验结束后，由值日生负责打扫实验室，保持室内整洁，注意关上水、电、窗、门。目 录园艺产品贮藏加工学实验指导1实验一 果蔬一般物理性状的测

4、定1实验二 果蔬含糖量的测定（折光仪测定法）3实验三 果蔬含酸量的测定4实验四 果蔬维生素c含量的测定6实验五 果实硬度测定8实验六 果胶质的测定(质量法)9实验七 单宁含量的测定(滴定法)10实验八 果蔬呼吸强度测定11实验九 果蔬贮藏环境中乙烯浓度的测定14实习十 贮藏环境中的温、湿度的测定18实验十一 不良环境对植物细胞膜的伤害22实验十二果蔬中乙醇含量的测定25实验十三 果蔬贮藏环境中o2和co2含量的测定27实验十四 果品贮藏保鲜品质鉴定30实验十五 果蔬加工中护色实验与水果酶促褐变的防止31实验十六 果蔬加工过程中的美拉德反应33实验十七 果蔬的化学去皮34实验十八 脱水蒜片35实

5、验十九 杏干36实验二十 果脯蜜饯37实验二十一 苹果酱的制作38实验二十二 果冻(山楂冻)的制作40实习二十三 糖水桃子罐头42实验二十四 糖水桔子罐头45实验二十五 青豌豆罐头47实验二十六 果蔬汁的制作49实验二十七 果蔬速冻保藏试验51园艺产品贮藏加工学实习指导54实习一 果蔬的人工催熟54实习二 果蔬类的气调贮藏58实习三 茄子、黄瓜的贮藏60实习四 青花菜的贮藏61实习五 礼品菜的包装62实习六 典型果品化学防腐保鲜处理63实习七 常见果蔬贮藏病害识别64实习八 黄花菜的干制65实习九 葡萄干的加工66实习十 酱菜制作67实习十一 泡菜的制作69实习十二 果酒酿造71实习十三 其它

6、果蔬制品73果蔬贮藏与加工综合实训75一、参观果蔬贮藏库75二、典型果蔬贮藏质量检查78三、果蔬贮藏加工产品市场调查81附 录87部分蔬菜水果中英文名称对照87园艺产品贮藏加工学实验指导实验一 果蔬一般物理性状的测定一、目的与原理物理性状的测定是用一些物理测定方法来表示果蔬的重量、大小、容重、硬度等物理性状。其中也包含了某些感官的反映，色泽、新鲜度和成熟度等。果实在成熟、采收、运输、贮藏及加工期间的物理特性的变化，反映其组织内部一系列复杂的生理生化变化的结果。因此对物理性状的测定是进行化学测定的基础。果蔬的物理性状测定是确定采收成熟度，识别品种特性，进行产品标准化的必要措施。新鲜果实是活的有机

7、体，与外界环境条件的统一是保证贮藏特性的主要因素。欲控制适合于新鲜果蔬的环境，首先就要通过在贮藏期中进行物理性状的测定，是了解其加工适应性与拟定加工技术条件的依据。二、材料与用具 苹果、梨、柑桔、葡萄、甜椒、番茄、茄子等。 卡尺、托盘台秤、果实硬度度、榨汁器、比色卡片、排水筒、量筒等。三、操作方法1、单果重（g/个）：取10个果实，放在托盘台秤上称重。记录重量，求出其平均果重。2、果形指数（纵径/横径）：取10个果实，用卡尺测量果实的纵径和横径（cm） ，求出果形指数，以了解果实的形状和大小。3、果面特征：取10个果实进行总体观察，记载果皮的粗细，底色和面色的状况，果实底色可分深绿、绿、浅绿、

8、绿黄、黄、乳白等，也可用特制的比色卡进行比较，分成若干级。果实因种类和品种不同，显出的面色有所差别，应根据实际观察到的情况，记载颜色的种类和深浅、占果实表面积的百分比。4、果肉比率（%）：取10个果实，除去果皮、果心、果核和种子，分别称各部分的重量，以求果肉（或可食部分）的百分率。汁液多的果实，可将果汁榨出，称果汁重量，求果实的出汁率。5、果实硬度：果实硬度是果实成熟度的重要指标之一。取10个果实，在对应两面薄薄地削去一小块果皮，用果实压力硬度计，测定果肉的硬度，以每平方厘米面积上承受的压力数表示。在用mnagness-tylor 型硬度计测定时，注明测头直径英寸数，压力以磅数表示（例如测头为

9、7/16英寸，压力为16磅）。硬度越大，表明质地越致密。硬度与果实的贮藏性往往呈现一定的正相关性。6、果实比重（g/cm3） 重量（w）果实比重=- 体积（v） 取10个果实，在托盘台秤上称果实重量w。 将排水筒装满水，多余的水由溢水孔流出，至不滴水为止。置一量筒于溢水孔下面，将果实轻轻放入排水筒水中，此时溢水孔流出的水盛于量筒内，再用细铁丝将果实全部没入水中，待溢水孔水滴滴尽为止。用量筒量出果实的排水量，即果实体积v，用上式计算果实的比得。7、果蔬容量（kg/m3） 果蔬容重是指1m3容积果蔬的重量，它与果蔬的包装、运输和贮藏关系十分密切，可选用包装容器，如竹筐、纸箱、木桶、或特制一个1m3

10、的容器，装满某种水果或蔬菜，取出并称其重量（kg），计算容器的容积（m3）即可求出该种果蔬的容重。实验二 果蔬含糖量的测定（折光仪测定法）一、目的要求果蔬含糖量是果蔬贮藏保鲜过程中的重要品质指标。通过实验，使学生掌握折光仪的使用和含糖量的测定方法，为贮藏期果实品质的鉴定提供依据。二、基本原理 果蔬含糖量测定的方法有：斐林试剂法、折光仪测定法、比色法测定。生产上常使用手持折光仪来测定果蔬中可溶性固形物的含量，由于果实中可溶性固形物主要是糖，故可用其代表果蔬中的含糖量。这个方法简便易行，速度快，手持折光仪携带操作方便，野外、室内都适用。三、操作方法1仪器校正：掀开照明棱镜盖板，用柔软的绒布（或镜头

11、纸）仔细将折光仪棱镜拭净，注意不能划伤镜面，取蒸馏水或清水12滴，于折光棱镜上，合上盖板，使进光窗对准光源，调节校正螺丝将视场分界线校正为零。2用同样方法擦净折光棱镜，取果汁或菜汁液数滴，于折光棱镜面上，合上盖板，让进光窗对准光源，调节目镜视度圈，使视场内分划线清晰可见，于视场中所见明暗分界线相应的读数，即果汁或菜汁液中可溶性固形物含量百分数，用以代表果蔬中的含糖量。注意：测定时温度最好控制在20，或者接近20左右范围内观测，其准确性较好。 四、结果分析：对实验结果进行分析。实验三 果蔬含酸量的测定一、 目的要求 果蔬中含酸量的多少亦是衡量其品质优劣的一个重要指标。它与新鲜果蔬及加工处理后成品

12、的风味密切相关。因此，了解其含量对鉴定果蔬品质及进行合理加工有重要作用。通过实验，要求了解果蔬总酸量测定的原理并掌握测定的方法。二、 基本原理 果蔬中含有各种有机酸，主要有苹果酸、柠檬酸、酒石酸、草酸等。由于果蔬种类不同，含有机酸的种类也不同，同一果蔬品种，其成熟度不同有机酸的含量也有很大差异。果蔬含酸量的测定是根据酸碱中和的原理，即用已知浓度的氢氧化钠溶液滴定，故所测出的酸为可滴定酸。还有少量的酸，由于受果蔬中缓冲物质的影响，不易测出。计算时以该果实所含的主要酸来表示，如仁果类、核果类主要含苹果酸，以苹果酸计算，其毫摩尔量为0.134g；柑桔类以柠檬酸计算，其毫摩尔量为0.192g，葡萄以酒

13、石酸计算，其毫摩尔量为0.150g。三、材料、仪器用具、试剂（一）材料 苹果、桃、葡萄、柑桔、菠萝、番茄、猕猴桃等；本实验用的试材是猕猴桃。（二）仪器用具 分析天平、碱式滴定管，100ml三角瓶、250ml烧杯、200ml和1000ml容量瓶、10ml移液管、漏斗、滤纸、研钵或组织捣碎器、脱脂棉、纱布、小刀等。（三）试剂0.1moll氢氧化钠标准溶液、酚酞指示剂。四、操作方法1称取均匀样品20g，置研钵中研碎，注入200ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度。混匀后，用脱脂棉或滤纸过滤到干燥的250ml烧杯中。2吸取滤液20ml放入100ml三角瓶中，加酚酞指示剂两滴，用0.1mol/l氢氧化钠滴定，直

14、至呈淡红色为止。记下氢氧化钠用量。重复滴定三次，取其平均值。有些果实容易榨汁，而其汁含酸量可代表果实含酸量，榨汁后，取定量汁液510ml，加蒸馏水稀释至20ml，直接用01mol/l氢氧化钠滴定。3结果计算vc换算系数果蔬含酸量（%）=100wvnaoh溶液用量（ml）；cnaoh溶液浓度（mol/l）；w滴定时所取样液中样品克数（g）或用于测定的果蔬汁液的量（ml）。换算系数：以果蔬主要含酸量种类计算，一般苹果为0.067，柑桔为0.064，猕猴桃为0.064。五、结果分析：对实验结果进行分析。实验四 果蔬维生素c含量的测定果蔬维生素c含量的测定，目前多采用两种方法：2,6-二氯靛酚钠测定法

15、和碘测定法；本实验采用2,6-二氯靛酚钠测定法。一、 目的要求 维生素c（抗坏血酸）是人体不可缺少的营养物质，近年来医药上又发现它有许多新的功能。水果和蔬菜是食品中维生素c的主要来源。因此，维生素c在果蔬中含量多少，是鉴定其营养价值的重要指标。 通过实验，使学生了解果蔬中维生素c测定的原理并掌握其测定方法。一、 基本原理 天然的抗坏血酸有还原型和脱氢型两种，还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇结构，故为一种极敏感的还原剂它可失去两个氢原子而氧化为脱氢型抗坏血酸。利用染料2，6一二氯靛酚钠盐作为氧化剂，氧化抗坏血酸后本身被还原成无色的衍生物。2，6一二氯靛酚钠盐易溶于水，其碱性或中性水溶液呈蓝色，在酸

16、性溶液中呈桃红色，用这个变化来鉴别滴定的终点。三、材料、仪器用具试剂（一）材料 柑桔、鲜枣、苹果、猕猴桃、番茄、辣椒、洋葱等；本实验用的试材是猕猴桃。（二）仪器用具 微量滴定管（或25ml碱式滴定管）、100ml容量瓶、10ml移液管、100ml三角瓶，小刀、研钵或组织捣碎器、漏斗、滤纸、分析天平、离心机、白陶土等。（三）试剂的配制与标定1试剂 标准抗坏血酸溶液、2草酸溶液、2，6一二氯靛酚钠盐溶液。2配制与标定 标准抗坏血酸溶液：精确称取抗坏血酸50mg（土 0.1mg）用2草酸溶解，小心地移入250ml容量瓶中，用草酸稀释至刻度，算出每毫升溶液中抗坏血酸的毫克数。2，6一二氯靛酚钠盐溶液标

17、定：称取2，6一二氯靛酚钠50mg，溶于50ml热蒸馏水中，再加人碳酸氢钠42mg，待盐完全溶解冷却后，加水稀释至250ml，过滤后盛于棕色瓶内，保存在冰箱中，同时用刚配好的抗坏血酸标定。吸取标准抗坏血酸溶液2ml，加2草酸5ml，用2，6一二氯靛酚钠盐溶液滴定，至桃红色15秒钟不褪即为终点，根据已知标准执坏血酸溶液和染料的用量，计算出每ml染料溶液中相当的抗坏血酸mg数。四、操作方法 1称取切碎的果蔬样品1020g放入研体中，加2草酸溶液少许研碎，注人100ml容量瓶中，加2草酸稀释至刻度，摇匀，过滤备用。如果滤液色泽较深，在滴定时不易辨别终点，可先用白陶土脱色，过滤或用离心机沉淀备用。2吸

18、取滤液10ml于三角烧杯中，用已标定过的2，6一二氯靛酚钠盐溶液滴定，至桃红色15秒钟不褪为终点，记下染料的用量。取三次平均值。3吸取2草酸溶液10ml，用染料作空白滴定，记下用量。取三次平均值。结果计算： (v-v)a维生素c（mg100g） 100wv滴定样品所用染料的体积（ml），v1空白滴定所用染料的体积（ml）alml染料相当的抗坏血酸量（mg）w滴定时吸取的样品溶液中含样品克数（g）。五、注意1由于抗坏血酸在许多因素影响下都易发生变化，因此，取样品时应尽量缩短操作时间，并避免和铜、铁等金属接触。2对带有颜色的样品液，可用中性的白陶土脱色，吸取澄清液进行测定。3经过熏硫或亚硫酸及其盐

19、类处理的样品，在制备样品液时，应加甲醛（纯）5ml以除去二氧化硫的影响，然后再定容。六、结果分析：对实验结果进行分析。实验五 果实硬度测定一、 目的要求：果蔬的硬度是反映果实贮藏品质的一个重要指标，通过实验，使学生掌握手持硬度压力测定计的使用和果实硬度的测定方法。二、基本原理 果实硬度是指果肉抗压力的强弱,随着果实的成熟，果实的硬度逐渐下降，因此，生产上常使用手持硬度压力测定计来判断果实的成熟度。该方法操作简便。一、 用具和材料：1.用具:秦勒果实硬度计或圆盘式硬度计。2.材料： 苹果、桃、梨、番茄、黄瓜等；本实验用的试材是苹果。四、操作方法1仪器回零：测定前要使仪器回零。2测定：在果实胴部两

20、面对应削去厚2mm，直径为1cm的圆形果皮。用一手握住果实，削面与硬度计的测头垂直，另一只手握住硬度计，对准已削好的果面，借助于臂力，使测头顶端部分压入果肉中为止。以每cm2面积上承受的压力来表示硬度(ib/cm2或kg/cm2)。每一个果实测24次，取其平均值。五、结果分析：对实验结果进行分析。实验六 果胶质的测定(质量法)一 方法原理利用果胶酸钙不溶于水的特性，先用水将果酸质从样品中提取出来，再加氯化钙使之形成果胶酸钙沉淀，测定其质量并换算成果胶质量。二 仪器与试剂 (1)仪器烘箱、分析天平、称星瓶、古氏柑涡、抽滤瓶、电炉250ml容量瓶、250ml移液管等。(2)试剂。1moll醋酸(c

21、h3c430h)溶液：以583ml冰醋酸(化学纯)加水稀释至1000ml。1moll1/2cacl2溶液：称取纯无水氯化钙5518加水稀释至50ml。0.1mollnaoh溶液：称取氢氧化钠4g溶于1000ml水中，摇匀贮于橡胶塞的试剂瓶中。2硝酸银溶剂：称取硝酸银2g溶于100ml水中摇匀后贮于棕色滴瓶中。三 操作步骤 准确称取新鲜样品50g，捣碎，置250ml烧杯中加150ml水小心加热煮沸1h(间歇搅拌并加水补充蒸发损失)，冷却后移入250ml容量瓶中，加水至刻度、摇匀。用于滤纸抽滤(最好用古氏坩锅抽滤)。准确吸取滤液25ml于500ml烧杯中，加01mll氢氧化钠溶液100ml，静置3

22、0mim，而后加50mll moll ch3cooh溶液搅拌，5mim后加入50 moll 05 moll1/2cacl溶液，摇拌，放置1h煮沸5min、立即用烘干至恒重的滤纸过滤，以沸水洗涤沉淀，直至洗涤液加入硝酸银溶液无白色沉淀为止。然后将带有滤渣垢的滤纸放在预先烘干至恒重的称量瓶内，置105烘箱中烘至恒重。四 结果计算式中 m1滤渣质量g m样品质量，g 25/250-稀释倍数09235果胶酸钙换算为果胶质的系数实验七 单宁含量的测定(滴定法) 一方法原理 单宁物质为一强还原剂，极易被氧化。以高锰酸钾为氧化剂，根据单宁被活性炭吸附前后的氧化值之差计算单宁物质的含量。靛红(靛蓝二磺酸钠)能

23、被高锰酸钾氧化，从蓝色变为黄色，从而指示终点。二仪器与试剂 (1)仪器：烧杯、量简、200ml滴瓶、250ml容量瓶、10ml及25ml移液管、滴定管、研钵、漏斗、滤纸等。(2)试剂；高锰酸钾、靛红、活性炭。001mollkmn04溶液：将158g高锰酸钾(kmn04)溶于100沸水中移人1000ml容量瓶，冷却后定容至到度.01靛红溶液：称取靛红1g，溶于50ml浓硫酸中，如难溶，可在水浴中加热到60，保持4h，然后稀释至1000ml。三操作步骤 称取捣碎均匀样品l0-20g，用约150ml水移ty 250ml容量瓶中，充分振摇后加水至刻度混匀，用干燥滤纸过滤。吸取过滤后的样品液10ml于2

24、00ml三角瓶中，准确加入靛红10ml，蒸馏水30ml，用005moll (1/5kmn04)溶液快速滴定至黄绿色时，再缓慢滴定至明亮的金黄色即为终点。另取样品溶液10ml，加入活性炭23g，置水浴上加热搅拌约10mim，趁热过滤，并用热水洗涤数次，于滤液中准确加入靛红10ml，蒸馏水30ml，同上法滴定。四结果计算式中 c-高锰酸钾溶液的浓度，mol/l vl-滴定样品所消耗的高锰酸钾溶液的体积，ml v2-样品中单宁被吸收后所消耗高锰酸钾溶液的体积，ml v3-滴定时所用样品溶液体积，ml v4-制成样品液的总体积，ml m-样品的质量，g 0.2080-单宁的毫摩尔质量，g/mmol实验

25、八 果蔬呼吸强度测定一、目的及原理 呼吸作用是果蔬采收后进行的重要生理活动，是影响贮运效果的重要因素。测定呼吸强度可衡量呼吸作用的强弱，了解果蔬采后生理状态，为低温和气调贮运以及呼吸热计算提供必要的数据。因此，在研究或处理果蔬贮藏问题时，测定呼吸强度是经常采用的手段。 呼吸强度的测定通常是采用定量碱液吸收果蔬在一定时间内呼吸所释放出来的co2，再用酸滴定剩余的碱，即可计算出呼吸所释放出的co2量，求出其呼吸强度。其单位为每公斤每小时释放出co2毫克数。 反应如下： 2naoh + co2na2co3 + h2o na2co3 + bacl2baco3 + 2nacl 2naoh + h2c2o

26、4 na2c2o4 + 2h2o 测定可分为气流法和静置法两种。气流法设备较复杂，结果准确。静置法简便，但准确性较差。二、药品与器材 苹果、梨、柑橘、番茄、黄瓜、青菜等。 钠石灰、20%氢氧化钠、0.4n氢氧化钠、0.2n草酸、饱和氯化钡溶液、酚酞指示剂、正丁醇、凡士林。 真空干燥器、大气采样器、吸收管、滴定管架、铁夹、25ml滴定管、15ml三角瓶、500ml烧杯、8cm培养皿、小漏斗、10ml移液量管、洗耳球、100ml容量瓶、天平。三、操作与步骤 气流法：气流法的特点是果蔬处在气流畅通的环境中进行呼吸，比较接近自然状态，因此，可以在恒定的条件下进行较长时间的多次连续测定。测定时使不含co

27、2的气流通过果蔬呼吸室，将果蔬呼吸时释放的co2带入吸收管，被管中定量的碱液所吸收，经一定时间的吸收后，取出碱液，用酸滴定，由碱量差值计算出co2量。 1.按图（暂不连接吸收管）连接好大气采样器，同时检查不使有漏气，开动大气采样器中的空气泵，如果在装有20%naoh溶液的净化瓶中有连续不断的气泡产生，说明整个系统气密性良好，否则应检查各接口是否漏气。 2.用台平称取果蔬材料1公斤，放入呼吸室，先将呼吸室与安全瓶连接，拨动开关，将空气流量调节在0.4升/分；将定时钟旋钮反时钟方向转到30分钟处，先使呼吸室抽空平衡半小时，然后连接吸收管开始正式测定。 3.空白滴定用移液管吸取0.4n的naoh10

28、ml，放入一支吸收管中；加一滴正丁醇， 稍加摇动后再将其中碱液毫无损失的移到三角瓶中，用煮沸过的蒸馏水冲洗5次，直至显中性为止。加少量饱和的bacl2溶液和酚酞指示剂2滴， 然后用0.2n h2c2o4（草酸）滴定至粉红色消失即为终点。记下滴定量，重复一次，取平均值，即为空白滴定量（v1）。 如果两次滴定相差0.1ml，必须重滴一次，同时取一支吸收管装好同量碱液和一滴正丁醇。放在大气采样器的管架上备用。 4.当呼吸室抽空半小时后，立即接上吸收管、把定时针重新转到30分钟处，调整流量保持0.4升/分。待样品测定半小时后，取下吸收管，将碱液移入三角瓶中， 加饱和bacl2 5ml和酚酞指示剂2滴，

29、用草酸滴定，操作同空白滴定，记下滴定量（v2）。 计算公式如下： 式中：n = 1h2c2o4当量浓度（n） w = 样品重量（g） h = 测定时间（小时）。 22 = co2的毫克当量 也可直接查换算表、将所得到co2的毫克数除以样品重和测定时间，即为呼吸强度。 静置法 静置法比较简便，不需特殊设备。测定时将样品置于干燥器中，干燥器底部放入定量碱液，果蔬呼吸释放出的co2自然下沉而被碱液吸收，静置一定时间后取出碱液，用酸滴定，求出样品的呼吸强度。 用移液管吸取0.4n的naoh20ml放入培养皿中，将培养皿放进呼吸室，放置隔板，放入1公斤果蔬，封盖，测定1小时后取出培养皿把碱液移入烧杯中（

30、冲洗45次），加饱和bacl2 5ml和酚酞指示剂2滴，用0.2n草酸滴定，用同样方法作空白滴定。计算同气流法。四、结果与计算1.将测定的数据填入下列表中样品重kg测定时间（h）气流量（l/分）0.4n naoh（ml）0.2n h2c2o4用量（ml）滴定差（ml）（v1-v2）co2（mg/kg.h）测定温度空白（v1）定测（v2） 2.列出计算式并计算结果实验九 果蔬贮藏环境中乙烯浓度的测定- 气相色谱法测定法乙烯（ethylene）是植物内源激素之一。以气体形式存在。准确测定乙烯释放量，对认识乙烯在植物抗逆生理、发育生理、开花生理中的作用有着重要的意义。 乙烯产生于成熟的果实，有“成熟

31、激素”之称其浓度往往作为判断果实成熟程度及其耐藏性的指标。测定果实中乙烯浓度的方法一般是先收集果实中的气体样品，然后将此气体通过气相色谱仪进行测定：气相色谱仪中的层析柱能将气体样品中的乙烯与其他有机挥发物质分开并判定乙烯气体的浓度。一、 原理：气相色谱具有灵敏度高，稳定性好等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同，因此各种物持的分配系数（或吸附能力）不一样。当含混合物的待测样（含乙烯的混合气）进入固定相以后，不断通以流动相（通常为n2或h2），待测物不断地再分配，最后，依照分配系数大小顺序依次被分离，并进入检测系统得到检测。检测信号的大小反

32、映出物质含量的多少，在记录仪上就呈现色谱图。要使待测物得到充分的分离，就需要一种合适的固定相。乙烯往往与乙炔、乙烷难以分离，而采用gd502作为固定相则可有比较满意的效果。 二、材料、仪器设备及试剂 果蔬（苹果、香蕉等）若干。 注射器、打孔器、真空干燥器、短颈漏斗、血浆塞、真空泵、u形水银压力计活塞、气相色谱仪等。密封装置为带空心橡皮塞的三角瓶。（三）试剂：标准乙烯。三、实验步骤1. 将试验材料进行不同的处理（如离体、伤害、发芽、黑暗、辐射、冷藏、催熟等），然后置于密封装置中若干时间。2. 将色谱仪启动。启动步骤如下：（1）检测仪器各部件是否复位。若没有，需复位。（2）打开流动相（n2），将压

33、力调至（5kg/cm2）。然后打开仪器上的n2阀，将流速调至25m/min（管道1，2一样）。（3）插上电源，打开仪器上电源开关。（4）调节柱温至60，将进样口温度调至100（乙烯为气体，进样口温度不需太高）。（5）打开点火装置电源及空气压缩机开关、调节适当的量程和衰减（range and attenuation）（关机时，量程应打至1，衰减为）。（6）打开钢瓶氢气阀，调压力为1.0kg/cm2）（两管道一样），同时将空气压力调至0.5kg/cm2。打开记录仪电源，并选择10mv的输出电压和适当的走纸速度（10nm/min）。（7）点火：空气和氢气调好后，将选择键打到on位置。按点火键10s左

34、右，氢气既可在燃烧室燃烧，在点火并点着时，可以看到记录笔向上移动。（8）条件选择：将选择键打到2，并将空气压力调至1.0kg/cm2，氢气调至0.50.7kg/cm2之间（两管道一样）。待基线稳定后即可正式测定。3. 测定(1)样品中乙烯气体的收集 果蔬内部乙烯的收集：如图所示，在盛有饱和食盐水的干燥器中，将果实放入紧塞血浆塞的短颈玻璃漏斗中，放入时仔细排除附着在果实和漏斗壁上的气泡。真空干燥器的盖用凡士林密封后用真空泵抽气，使干燥器内减压。调节三通活塞使u形水银压力计水银柱高度差指示达360380mm，并维持1min，果实内部的气体即被抽出来和收集在漏斗颈部。待果实中气体不再外溢时(观察果实

35、无气泡产生)打开真空干燥器的盖子；用1ml注射器插入短颈漏斗顶端血浆塞中取气，稍停1min待注射器中的样品气体与短颈漏斗中的气体平衡以后再拔出注射器针头，迅速至气相色谱仪上进行测定反复取气样10次，求其平均值。 果实释放乙烯的收集。取果实用打孔器在果实上打一小孔。然后在孔内塞紧血浆塞，并在血浆塞与果实接触的外缘用少许凡士林涂抹使其密封，如图。将果实放在一定温度下，经过一定时间(一般需l4h)，用1ml注射器插入血浆塞中取样，并注入气相色谱中，测定果实在一定条件下和一定时间内所释放的乙烯量。收集果实内部气体的装置1、真空干燥器 2、短颈玻璃漏斗 3、真空泵 4、活塞收集果实释放乙烯的示意团 (2

36、)气体样品中乙烯浓度的测定：将以上取气的注射针头插入气相色谱仪的注射口隔膜，迅速而均匀地将lml气体样品注入，取出针头，记录乙烯出峰的时间。 在测定气体以前，必须先测定标准乙烯气体作为计算的依据。测定时可根据需要取含乙烯1ml/l、10ml/l、100ml/l、1000ml/l等不同已知浓度的标准乙烯各lml，注入气相色谱仪中，求其峰高值，并记录乙烯出现的时间。 （3）定性：a.外标法定性：样品中与标准乙烯保留时间相同的峰，即为样品乙烯峰。b.内标法定性：在得到某一样品的色谱图后，向该样品中加入一定量的标准乙烯进样，若某峰增高，该峰即为样品中乙烯峰。4.待得到所有样品色谱图后，可关机，关机步骤

37、：（1）关掉氢气总阀或氮气总阀。（2）关掉空气压缩机。（3）将量程或衰减复位，选择键打到off。（4）关掉记录仪。（5）待h2、n2全部排完后，将所有阀复位。（6）关主机电源，并拔下插头。 四、结果计算 样品中乙烯浓度（l/l）样品峰高标样浓度/标准峰高样品乙烯生成速率（l/g/h）乙烯浓度（l/l）容器体积（l）/密封时间（h）样品重量（g）实习十 贮藏环境中的温、湿度的测定1原理及目的采后的果蔬仍是有生命的活体，在贮藏过程中不断进行着呼吸作用，释放出热量，呼吸作用越旺盛，果蔬成熟衰老越快。低温能抑制呼吸，控制成熟和衰老；贮藏的果蔬不断地进行水分蒸发，若得不到水分的补充，造成失水过多而萎蔫、

38、衰老、死亡，提高冷库的相对湿度，可有效地降低果蔬水分蒸发。果蔬在贮藏期间，需要一定的温度和相对湿度，为此要经常测定冷库的温度和相对湿度。2仪器酒精温度表、水银温度表、最高温度表、最低温度表、自记温度计；干湿球温度表、通风干湿表、自记湿度计3测定方法31温度的测定（1）酒精温度表测量精度： 经校正后误差不得超过0.1构造： 感应部分（又称球部），用来感应介质温度的变化，球部装有酒精。显示部分： 内径均匀细长的毛细玻璃管，用来显示酒精柱长度。原理： 球部与外界空气进行热量交换，当空气温度大于球部温度时，球部受热，酒精膨胀挤入毛细管内，于是毛细管内的酒精柱伸长，表示温度升高，反之表示温度降低。利用温

39、度计内酒精柱随气温的升高而伸长，随气温的降低而缩短的特性，来测定空气的瞬间温度。用法： 在冷库内要多点放置，球部离地面高度1.5米，仪器稳定5分钟后读数，读数不要用手触摸球部，脸不要紧靠球部，要距离球部一尺左右。读数时以液柱顶部凹面最低处为准。（2）水银温度表测量精度：经校正后误差不得超过0.1。构造、原理、用法同上，读数时以液柱顶部凸面最高处为准，视线与凸液面垂直。水银温度表的灵敏度和精确度较酒精温度表高，是常用的测温仪器。（3）最高温度表测量精度：经校正后误差不得超过0.1。构造 球部、显示部分同上，不同处：在球部与毛细管连接处有一窄道，用以阻挡毛细管内水银柱的下降。原理：当空气温度大于球

40、部温度时，球部内的水银受热膨胀，由于水银的胀力大于窄道的阻力，将膨胀部分的水银挤入毛细管内，使水银柱升高，当空气温度低于球部温度时，由于部分水银收缩力小于窄道阻力，当空气温度低于球部温度时，由于部分水银收缩力小于窄道阻力，使毛细管内的水银无法返回球部。最高温度表的水柱只能随气温的升高小于窄道阻力，使毛细管内的水银无法返回球部。最高温度表的水柱只能随气温的升高而伸长，不能随气温的降低而缩短，因此，最高温度表的水银柱顶部能够指示出某一段时间内的最高温度值。用法：最高温度表只能横放，球部朝向左方，并稍向下倾斜，放好后稳定10分钟，将示值调整到当时的温度值，以便测定从即时起的某段时间内曾经出现的最高温

41、度值。每次读完数后须调整示值，其方法为：握住表身上部，球部向下，手臂向外伸出约30厘米将表前后甩动，直到示值等于或接近上部，以免水银柱滑动。注意调整过程中必须使温度表球部始终向下，勿与周围物体碰撞。读数时，若发现水银柱下端与球部窄道处脱离，可将表身轻轻上抬，使水银柱滑到窄道处再读数。（4）最低温度表测量精度：经校正后误差不得超过0.1。构造：与普通温度表基本相同，不同处在毛细管的酒精柱内有一蓝色哑铃形游标，是用来显示温度变化的。原理：当气温下降时，酒精柱收缩，其顶端的液面向球部移动，在液面到达游标的右端时，液面的表面张力便克服了游标的本身重量和游标与毛细管壁的摩擦力而将其向球部方向拉动；当气温

42、上升时，酒精膨胀而通过游标与毛细管壁间的空隙向管顶流动，而游标凭其本身的重量停留在酒精柱曾达过的最低位置。由于游标只能随酒精下降而下降，不能随酒精柱伸长而上升，因此它能指出某一段时间内的最低气温值。使用方法：最低温度表只能横放，球部朝向左方，并稍向下倾斜，放好后稳定10分钟，将示值调整到当时的气温值，以便测定从即时起的某段时间内曾经出现的最低温度值。稍稍抬高最低温度表球部的一端，使游标滑到酒精柱顶端，然后轻轻放下，勿使游标油动。读数时读取游标离球部较远一端的示度，即是一定时间间隔内曾经出现过的最低温度。（5）双金属温度计（自记温度计）是用来连续记录空气温度变化的仪器。测量精度：经校正后误差不得

43、超过0.5。构造 感应部分：一弯曲的双金属片，用来感应温度的变化；机械传递放大部分：传动杆、连动杆、水平活动轴；自记部分：自记钟、自记纸、自记笔。原理：当气温升高时，双金属片伸张，使传动杆向下移动，同时带动连动杆也向下，促使水平活动轴顺时方向旋转，笔杆向上，笔尖也就升高，画出温度升高的线条；气温降低时，双金属片变曲，使传动杆向上移动，带动连动杆向上，使水平活动轴反时针方向旋转，笔尖也降低，画出温度降低的线条。由于钟筒的旋转，笔尖又能在自记纸上作横向相对运动，这两种运动结合在一起，使笔尖在自记纸上画出上下起伏的连续曲线来，温度计能自动的连续将不同时间的温度数值以曲线的形式记录下来。使用方法：安装

44、自记纸，填写日期，做时间记号。换纸：揭开盒盖，抬动笔尖作终止记号，取下钟筒，在终止记号右上角记下换纸时间，取下旧自记纸。将新自记纸裹在钟筒上，卷紧，水平线对齐，底边巾筒底缘，并以压纸条固定。将自记钟上好发条。把装有自记纸的钟筒装在主轴上，转动钟筒，使笔尖正对当时时间。加墨水，但不要过满，移动笔档使笔尖接触钟筒，轻抬笔尖做一开始记录的记号。轻关匣盖，将仪器复位，换下的旧记录纸，妥善保存。32湿度的测定（1）干湿球湿度表精量精度：经校正后误差不得超过0.1。构造：两支相同型的水银（或酒精）温度表，球部包有湿润纱布的叫湿球温度表，另一支温度表用来测量空气的温度，叫干球温度表；水杯。原理：当空气中的水

45、气在当时温度下未达到饱和时，湿球温度表球部湿润纱布上的水分就不断蒸发，水分蒸发所消耗的热量，是从湿球温度表球部及周围的薄层空气吸收得来的，当湿球因蒸发所消耗的热量和从周围空气中获得热量相平衡时，湿球温度便不再下降，这时干湿球显示的温度就有一个差值，这个差值的在小取决于空气的湿度。湿度越小，蒸发越快，湿球温度降得越多，干湿球温度差就越大；相反，湿度越大，蒸发越慢，湿球温度降得越少，如果空气已经饱和则蒸发停止，湿球温度不会下降，于是干湿球温度相等。因此，测定干湿球温度值后，通过查算即可求出空气的相对湿度。使用方法：读数时，适时查看纱布湿润情况，若水分不足应及时加水，并注意更换蒸馏水。湿球纱布的包扎

46、要使湿球示度准确，主要是使湿球纱表面蒸发和热量交换良好，湿球纱布要经常保持清洁，湿润，每周至少更换一次。更换湿球纱布的方法 更换纱布前把手洗净，取出湿球温度表，去掉旧纱布鞋，用蒸馏水洗净温度表球部，把温度表夹在一本厚书中间，球部露于书外，取一条长约10厘米的纱布条漂涤于蒸馏水中，把湿纱布紧贴温度表球部包上，上端高于球部12毫米包卷纱布重叠部分不要超过球部周围的1/4，先用棉线扎好。再将纱布略加整理，使纱布紧贴，用棉线在温度表球部尾端扎紧，下余长约78厘米的纱布鞋，纱布尾部泡入蒸馏水杯中，使球部尾端纱布到水杯口的距离保持在2厘米。水杯里要用纯净的水，若使用含有大量矿物质的自来水、井水、泉水等影响

47、观察结果。观察干湿球温度表的温度，然后进行器差订正，通过计算公式或查表求出空气的相对湿度。（2）通风干湿表测量精度：经校后正后误差不得超过1.0。构造：两支型号相同的水银温度表，内外金属保护管、金属保护板、挂钩、防风罩、注水皮囊。通风装置：通风器、中心通风管、三通管。原理：用干湿球温度表。使用方法：测湿度时，在读数前45分钟润湿湿球温度表球部的纱布和进行通风。通风时一定手握住通风器和金属架的连接处，一手上发条，使风扇转动，上发条时用力不宜过猛，也不宜上得过紧，应留下一两圈，以防止发条折断，发条上好后，把仪器挂在挂钩上，温度表球部离地面高度1.5米。其读数与器差订正同干湿球温度表。（3）自记湿度

48、计 用来连续记录空气相对温度的变化。构造：感应部分 由一束脱脂毛发（约4042根）组成，以增大拉力，两端固定在架子上。传递放大部分 第一次放大杠杆是第一水平轴上的小钩和带有平衡锤的上曲臂组成，第二次放大杠杆是第二水平轴上的下曲臂和笔杆组成。自记部分 自记钟、自记笔、自记低。原理：相对湿度增大时，毛发束伸长，平衡锤下降，迫使笔杆抬起，笔尖上移，这时上下曲臂的接触点就向左移，使第一放大杠杆中重臂伸长，第二放大杠杆中力臂变短，从而使两个杠杆的放大率都增大，第二放大力杠杆中力臂变短，从而使两个杠杆的放大率都增大，结果总的放大率亦增大。相对湿度减小时，毛发束缩短，平衡锤抬起，笔杆由于本身重力作用而往下落

49、，笔尖因此下降，上、下曲臂接触点左移使二个放大杠杆的放大倍率均减小，总的放大率亦变小。毛发随湿度变化不均匀的特性，通过杠杆改变放大率的作用，记录在自记纸上。由于钟筒的旋转，笔尖在自记纸上画出上下起伏的连续曲线。使用方法：湿度计的使用方法同自记温度计，读数时只取整数，不记小数。4.思考题在气调贮藏库中，温湿度管理应注意哪些问题？实验十一 不良环境对植物细胞膜的伤害一、原理植物组织在受到各种不利的环境条件（如干旱、低温、高温、盐渍和大气污染）危害时，细胞膜的结构和功能首先受到伤害，细胞膜透性增大。若将受伤害的组织浸入无离子水中，其外渗液中电解质的含量比正常组织外渗液中含量增加，组织受伤害越严重，电

50、解质含量增加越多。用电导仪测定外渗液电导率的变化，可反映出质膜受伤害的程度。在电解质外渗透的同时，细胞内可溶性有机物也随之渗出，引起外渗液可溶性糖、氨基酸、核苷酸等含量增加，氨基酸和核苷酸对紫外光有吸收，对紫外分光光度计测定受伤害组织外渗液消光值，同样可反映出质膜受伤害的程度。用电导仪法和紫外法测定结果有很好的一致性。二、材料与仪器设备1、dds11a型电导仪法； 2、751型紫外分光光度计；3、真空泵； 4、真空干燥器；5、三用水浴； 6、打孔器7、剪刀； 8、洗瓶；9、试管； 10、移液管；11、玻棒； 12、滤纸13、去离子水14、低温处理过的黄瓜、番茄三、方法步骤1、清洗器具：由于电导

51、仪变化非常灵敏，稍有杂质即产生很大误差。因此所用玻璃器具均需先用热肥皂水洗，再用洗液洗涤，然后用自来水、无离子水各冲四到五遍（最好是容器口朝下用水冲）。向洗净的试管中加入去离子水，用电导仪测定电导值，检查试管是否确实冼净。2、取样及处理 选取果蔬产品，一份放入适温下贮藏，另一份放入过低温度下使其受冷害，作为处理。用打孔器及切片器将样品制成厚薄均匀，大小一致的组织圆片，精确称取2克（或10个圆片），放入试管内，用去离子水冲洗三次，然后加入30ml去离子水。对照和处理均设3-4个重复。 将试管放入真空干燥器内，开动真空泵抽气10min，以抽出细胞间隙空气。缓慢放入空气，水即渗入细胞间隙，组织圆片变

52、成透明状，细胞内溶质易于渗出，取出试管，间隔几分钟振荡一次，在室温下保持30min。3、测定：将dds11a型电导仪电极插入试管，测定外渗液的电导值。测定之后，将试管放入水浴锅沸水中5min 以杀死组织。待冷至室温后，再次测定外渗液的电导值。4、计算：（1）以细胞膜相对透性大小表示细胞受害的程度。通常按下式计算： 细胞膜相对透性（%）= l1/l2100 式中：l1：组织杀死前外渗液的电导值；l2组织杀死后外渗液的电导值。（2）直接计算细胞膜伤害率，通常采用下式计算： 式中：c1：对照组织杀死前外渗液的电导值；c2：对照组织杀死后外渗液的电导值；t1：处理组织杀死前外渗液的电导值；t2处理组织杀死后外渗液的电导值。附：电导仪使用方法：（1）将电极引线接到仪器相应接线柱上。（2）接上稳压器，接通电源，打开电源开关。（3）将开关拨向“校正”位置，调整调节器，使指针达到满偏。（4）将开关拨向“测定”位置。指针应回到0点。（5）拨动选择测定范围旋钮，使其处于测定范围之内，如不知测量范围，应先放在最大量程位置上，由大到小逐级调整。（6）将电极用量蒸馏水冲洗干净，并用滤纸吸去附着的水分。放在需测组织提取液中，待指针稳定后，读出指针所指数值，此数值即该提取液的电导度。（7）按上述方法测定组织圆片杀死后提取液电导度。（8）将电极用蒸馏水冲洗干净，放在水中，如长期不用