梅里菲尔德PPT学习教案

1、会计学1 梅里菲尔德梅里菲尔德 （RobertBruceMerrifield，1921年7月15 日2006年5月14日），美国生物化学家 ，1984年诺贝尔化学奖获得者，最主要的 贡献是发明了固相接肽技术。他因为研究 出了制造肽和蛋白质的方法而获得了1984 年的诺贝尔化学奖。通过开发出一种能够 快速大量合成肽链的自动实验室技术，梅 里菲尔德大事改革了对这种复杂物质的研 究，从而极大地推进了生物化学，分子生 物学，以及药理学等领域的发展。 第1页/共8页 梅里菲尔德的生平介绍梅里菲尔德的生平介绍 罗伯特布鲁斯梅里菲尔德（RobertBruceMerrifield，1921年7月15日2006

2、年5月14日），1921年生于美国。先是到帕萨迪纳初级学院（Pasadena Junior College）学习，后来转学到加利福尼亚大学洛杉矶分校（University of California at Los Angeles，简称UCLA），于1943年毕业。然后他到飞利浦R帕克研究基金会（Philip R. Park Research Foundation）工作了一年。在那里，他协助进行成长实验，给实验用的小动物喂食一种合成的氨基酸食物。1949年梅里菲尔德在加利福尼亚大学洛杉矶分校获得了他的哲学博士学位。然后他进入了纽约洛克菲勒医学研究所（即现在的洛克菲勒大学）从事蛋白质方面的研究。由

3、于发明了简易自动的固相肽合成法，合成了胰岛素和核糖核酸酶，1984年被授予诺贝尔化学奖。 大的蛋白质分子叫做多肽（polypeptides），是蛋白质基本组成部分肽（peptide）组成的链。每一个肽中都含有一个由几百个氨基酸分子组成的链。1959年，梅里菲尔德发明了一种制造多肽的方法，叫做固相多肽合成（solid-phase peptide synthesis）。 这种方法需要把诸多氨基酸残基（amino acid residue，即蛋白质的组成部分）的第一个与一个叫做聚合体（polymer）的固相载体结合在一起。通过把肽链固定在聚合体上，传统制造多肽方法中的很多耗时的中间步骤就可以被略去了

4、。1965年，梅里菲尔德发明了一种机器，这种机器能够自动合成这一过程。固相多肽合成推动了新的药品和基因技术的发展。到20世纪60年代中期时，梅里菲尔德合成了激素血管舒缓激肽（bradykinin），这种物质能够使血管扩张；他还合成了胰岛素，这种物质被用于治疗糖尿病。 第2页/共8页 多肽的定义多肽的定义 多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质，它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间，是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质的总称，常常被应用于功能分析、抗体研究、尤其是药物研发等领域。 多肽合成服务包括标准化学多肽合成、多肽

5、修饰、多肽文库以及重组多肽表达。逐步固相多肽合成能合成5-50个氨基酸的多肽，对于大于200的多肽，通过片段浓缩及连接技术来合成。 第3页/共8页 多肽合成多肽合成 多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来，经过不断的改进和完善，到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，表现出了经典液相合成法无法比拟的优点，从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。多肽合成总的来说分成两种：固相合成和液相多肽合成。 第4页/共8页 多肽合成技术多肽

6、合成技术 固相合成固相合成 1963年，Merrifield首次提出了固相多肽合成方法(SPPS)，由于其合成方便，迅速，成为多肽合成的首选方法，而且带来了多肽有机合成上的一次革命，并成为了一支独立的学科固相有机合成，固相合成的发明同时促进了肽合成的自动化。世界上第一台真正意义上的多肽合成仪出现在1980年代初期。 液相合成液相合成 基于将单个N-保护氨基酸反复加到生长的氨基成份上，合成一步步地进行， 通常从合成链的C端氨基酸开始，接着的单个氨基酸的连接通过用DCC，混合炭酐， 或N-carboxy酐方法实现。Carbodiimide方法包括用DCC做连接剂连接N-和C-保护氨基酸。重要的是，

7、 这种连接试剂促接N保护氨基酸自己炭基和C保护氨基酸自由氨基间的缩水，形成肽链， 同时产出N，N?/FONT-dyaylcohercylurea副产物。 然而， 此方法因其导致消旋的副反应，或在强碱存在时形成5(4H)-oxaylones和N-acylurea而受到影响。庆幸地是， 这些副反应能最小化，但是还不能完全消除。方法是加入象HoSu或HoBT这样的连接催化剂， 此外，此方法也可用于合成N保护氨基酸的活性酯衍生物。依次产生的活性酯将自发与任何别的C保护氨基酸或肽反应形成新的肽 第5页/共8页 libertyliberty多肽合成仪多肽合成仪 多肽合成仪是指用来合成多肽的仪器，因为多肽合成的步骤很繁琐，又很耗时，多家公司开发了自动多肽合成仪。一般分为两类，一类是针对数量少但合成量大的生产型应用，典型代表是美国ABI公司的ABI336型多肽合成仪，其反应器转动方式有别于前两代的多肽合成仪，即反应器上方相对固定，而下方作圆周360度快速旋转，带动反应器里的固液两相从底部向上作螺旋运动，一直达到反应器的最上方；另外一类多肽合成仪针对于药物研发