实验三_果蝇的性状、生活史观察及饲养

1、实验三实验三 果蝇的性状、生活史观察及饲养果蝇的性状、生活史观察及饲养 一、实验目的 1. 了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点； 2. 区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性 状特征； 3. 掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和 技术。 二、实验原理二、实验原理 果蝇的优点：果蝇的优点： 1. 生活史短，生活史短，20-25条件下完成一个世代需条件下完成一个世代需12-15天。天。 2. 繁殖率高，一对果蝇可产卵繁殖率高，一对果蝇可产卵400-500只。只。 3. 个体小，饲养方便，培养费用低廉。个体小，饲养方便，培养费用低廉。 4. 突变率高。突变率高。 5. 形态容易辨认。形态容

2、易辨认。 6. 染色体数目少，只有染色体数目少，只有4对，且具有较大的唾腺染色体。对，且具有较大的唾腺染色体。 因此，果蝇是遗传学、细胞学、发育生物学等研究中最因此，果蝇是遗传学、细胞学、发育生物学等研究中最 好的模式动物。好的模式动物。 三、实验材料、用具及试剂三、实验材料、用具及试剂 果蝇种类：野生型(18#)、残翅(2#)、白眼(22#)、 黑檀体(e#)、三隐性(6#)。 双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板 或 白纸、毛笔、乙醚、酒精。 四、实验内容四、实验内容 1.果蝇的生活史 果蝇（果蝇（Drosophila melanogaster 2n=8） 中文名：黑腹果蝇中文名：黑

3、腹果蝇 果蝇属于节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、 果蝇属，与家蝇是不同的种。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30以 上的温度能使果蝇不育和死亡，15 以下则使它的 生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适 温度为20-25。 10152025 卵幼虫8天5天 幼虫成虫 57天18天6.3天4.2天 从表中可以看出，25时，从卵到成虫约10天；在 25时成虫约活2030天。 生活史：生活史： 属于完全变态。属于完全变态。 最适温度：最适温度：20-25 生活史周期：生活史周期： 12-15 day (20-25) 10 day (26) 57 day (10) 羽化后：羽化后：

4、8-12h 后交配后交配 两天后产卵两天后产卵 成虫存活：成虫存活：20-30 day (25) 卵：卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天 后才能产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平， 被绒毛膜，被绒毛膜，在背面的前端伸出一对触丝 （filament） ，它能使卵附着在食物(或瓶壁)上， 不致深陷到食物中去。 三龄幼虫三龄幼虫4.5mm，在，在 培养基上作沟穿孔。培养基上作沟穿孔。 幼虫幼虫：从卵孵化出来后，经过两次蜕皮，发育成三龄幼 虫，此时体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头部， 上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透明的唾液腺， 透过体壁可见到一对生殖腺位于躯

5、体后半部上方的两侧，精 巢较大，外观上是一明显的黑点，而卵巢则较小，可以此作 为鉴别。幼虫活动力强而贪食，它们在培养基上爬行时，留 下很多条沟，沟多而且宽时，表明幼虫生长良好。 蛹蛹：幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出， 附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹。在蛹前部有两个呼吸 孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，以后逐渐硬化， 变为深褐色，表明即将羽化了。 成虫成虫：幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从 蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长，翅 膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，故呈半透明的乳白色。 透过腹部体壁，可以看到黑色的消化系统。不久，变为短粗 圆形，

6、双翅展开，体色加深。如野生型初为浅灰色，然后呈 灰褐色。 2. 形态构造 头部：有一对复眼，三个单眼和一对触角。 胸部：有三对足，一对翅和一对平衡棒。 腹部：背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器在 腹部末端，全身有许多体毛和刚毛。 3.成虫雌雄的鉴别成虫雌雄的鉴别 雌果蝇雄果蝇 体形较大体形较小 腹部椭圆形，末端稍 尖 腹部末端钝圆 腹部背面有明显的五 条黑色条纹 腹部背面有三条黑色花纹，前两条细，后 一条宽且延续至腹面 腹部腹面有明显的6 个腹片(刚毛围成一 圈) 四个腹片 无性梳第一对跗节基部的一节有性梳 外生殖器外观比较简 单 外生殖器外观较复杂，刚羽化的幼蝇用低 倍镜可明显观察到生殖弧

7、、肛口板及阴茎 果蝇识别果蝇识别 果蝇识别果蝇识别 果蝇识别果蝇识别 雄果蝇雌果蝇 果蝇识别果蝇识别 果蝇识别果蝇识别 雄果蝇雌果蝇 4.果蝇常见的几种突变类型果蝇常见的几种突变类型 突变形状名 称 基 因 符 号形 状 特 征所在染色 体 残翅vg翅退化，部分残留不能飞IIR 黑檀体e体呈乌木色，黑亮IIIR 白眼w复眼白色X 小翅m翅较短X 焦刚毛sn卷曲，似烧焦状X 身身 体体 颜颜 色色 野生型：灰色，符号为野生型：灰色，符号为 + +突变型：黑檀体色，符号为突变型：黑檀体色，符号为 e e 眼眼 睛睛 颜颜 色色 野生型：砖红色，符号为野生型：砖红色，符号为 + +突变型：白色，符号

8、为突变型：白色，符号为 w w 翅翅 膀膀 形形 状状 野生型：圆卵型，长度约为腹部野生型：圆卵型，长度约为腹部 的的2 2倍，符号倍，符号 + + 残翅型：翅膀退化残缺不全，残翅型：翅膀退化残缺不全， 符号符号 vgvg 白眼白眼w， 小翅小翅 m, X染色体染色体 刚刚 毛毛 形形 状状 野生型：刚毛长粗、黑硬、平直，野生型：刚毛长粗、黑硬、平直， 先端略弯，符号先端略弯，符号 + + 焦刚毛：刚毛先端分叉弯曲，焦刚毛：刚毛先端分叉弯曲， 符号符号sn3 白眼白眼 w、小翅、小翅 m、焦刚毛、焦刚毛 sn (刚毛卷曲如烧焦状刚毛卷曲如烧焦状) （全在（全在X染色体）染色体） 性状、染色体和

9、基因型 红眼（+） 白眼（w） 第一连锁群 长翅（+） 残翅（vg） 第二连锁群 灰身（+） 黑檀体（e） 第二连锁群 第三连锁群 长翅（+） 小翅（m） 第一连锁群 直刚毛（+） 卷刚毛（sn） 第一连锁群 灰身（+） 黑体（b） 第二连锁群 5.果蝇的饲养果蝇的饲养 1）培养基的配制 果蝇以酵母菌为食，常采用发酵的培养基繁殖 酵母菌来饲养果蝇。培养基常用玉米粉、米粉或香 蕉配制，本实验采用玉米粉红糖培养基，其配方如 下： 果蝇培养基成分果蝇培养基成分 水1000ml 玉米粉105g 红糖75g 琼脂7.5-10g 苯甲酸0.75g 酵母粉5-10g 配制方法 配制时先将水分成两份：一份用于

10、加热溶解琼脂配制时先将水分成两份：一份用于加热溶解琼脂 和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水搅拌，再和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水搅拌，再 加到煮沸琼脂红糖溶液中，边倒边搅拌。继续煮加到煮沸琼脂红糖溶液中，边倒边搅拌。继续煮15- 20分钟，关掉火后再加入苯甲酸分钟，关掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶用少量酒精促溶) ， 要要充分搅拌后再分装培养瓶。每瓶培养基厚度在充分搅拌后再分装培养瓶。每瓶培养基厚度在2- 3cm，置，置121高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌15分钟。分钟。 待培养基冷却后，在培养基的表面滴加新鲜酵母待培养基冷却后，在培养基的表面滴加新鲜酵母 液，插上一块经灭菌后的滤纸

11、片做为幼虫化蛹的干燥液，插上一块经灭菌后的滤纸片做为幼虫化蛹的干燥 场所。场所。 2）果蝇继代培养 将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。将果蝇转移到新配制的培养基中繁殖。转移时要转移时要 注意转移的手法，不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞注意转移的手法，不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞 出。出。一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶，使其飞一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶，使其飞 入带有新培养基的培养瓶入带有新培养基的培养瓶 准备转移果蝇的准备转移果蝇的 亲本及培养基亲本及培养基 果蝇的转移果蝇的转移 幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。 6 6 果蝇性状的观察果蝇性状的观察 1）果蝇的麻醉处理）果蝇的麻醉处理

12、 在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等 操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方 法如下： （1）准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶， 并配以脱脂棉塞。 （2）去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶 在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇 落入麻醉瓶中。 （3）滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，迅速将两瓶塞住， 约30s，麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态。 注意：不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈45角翘起， 表明麻醉过度，不能复苏而死亡。 2）观察 选取一张10 x10cm白纸，在白纸中央画一 个半径为0.5cm小圆圈及圆心，在体视镜下找到圆圈后 将白纸固定好，将麻醉后的果蝇放在白纸小圆圈内，用 毛笔移动果蝇进行观察，观察完毕的果蝇务必倒入死蝇 盛留器中及时处死，防止品系间混杂。 转移到麻醉瓶中观察结果 麻醉时转移果蝇手法麻醉时转移果蝇手法 果蝇的麻醉 滴加乙醚的方法滴加乙醚的方法 果蝇的麻醉剂果蝇的麻醉剂 死亡果蝇的标志 死亡果蝇的标志死亡果蝇的标志 果蝇识别果蝇识别 个体个体大大小小 腹纹腹纹53 腹部末