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文档简介

1、Everlab云端实验室吞噬细胞吞噬功能检测实验实验概要木文介绍J吞噬细胞吞噬功能检测(Assay of the Phagocytic Function of Phagocyte)实验的基木 原理、操作步骤及注意事项等。实验原理吞噬细胞具有对界物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能，在机体非特界性免疫中发挥重 要作用。小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠.可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液，一小时后 解剖收集腹腔吞嗜细胞.染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现彖。通过讣算吞嗜百分比或吞噬指数可测 定吞噬细胞的吞嗜功能。主要试剂1. PBS缓冲液2. 3%硫代乙醇酸钠3. 1%

2、羊红细胞悬液4. 瑞氏染液5. 甲醇主要设备1. 解剖器材2. 注射器3. 尖吸管4. 橡皮吸头5. 小试管&载玻片实验材料ICR小鼠实验步骤1 实验准备：用无菌注射器吸取3%硫代乙醇酸钠3mL注射干小鼠腹腔内。2四日后，注射1 %羊红细胞悬液1ml干小鼠腹腔内。3注射1小时后，将小鼠用颈椎脱臼法处死.解剖暴露腹腔，干腹腔靠上部位.用强子轻轻夹起腹膜 将腹膜列一小口，用尖吸管注入5ml预温的PBS同时用于反复揉搓腹腔约1一2分钟.以便尽可能女 地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞c4. 用尖吸管吸取腹腔液，宜一洁净试管内。5用尖吸管将腹腔液吹打均匀（尽址避免产生气泡）吸取一滴滴于戦玻片上.加盖玻片镜检。6观察结果，也可以将腹腔液涂片平放于湿盘内，370 孵育30分钟。取出涂片用倾温的PBS冲 洗3次，然后用甲醉固定1分钟.以瑞氏染液1份加pH64的PBS 2份混匀后，滴干涂片上染色5- 10分钟，以蒸饰水冲洗（切勿先将染液倾去）后待干，镜检。7.实验结果观察小做腹腔巨噬细胞和中性粒细胞对羊红细胞的吞噬现歛计算吞噬百分比即每100个吞噬细胞中 吞噬有羊红细胞的细胞数。也可用吞噬抬数表示，即将100个吞噬细胞中所吞噬羊红细胞的总数除以 100,即为吞噬抬数。吞噬百分比和吞噬扌旨数一般是平行的。2-注意事项1.充分揉搓腹腔.尽可能将吞噬细胞冲洗下來。23用

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