食品中合成着色剂测定色素提取

1、食品中合成着色剂的测定食品中合成着色剂的测定 色素提取色素提取2012.4.18课程目的：课程目的：1. 掌握食品中合成着色剂的测定原理；2. 了解高效液相色谱的工作原理及操作方法。着色剂：着色剂：通过使食品着色后改善其感官性状，增进食欲的一类物质。天然着色剂：天然着色剂：辣椒红、甜菜红、红曲米、胭脂虫红、高粱红、叶绿素铜钠、姜黄、栀子黄、胡萝卜素、藻蓝素、可可色素、焦糖色素等等。 合成色素：合成色素：用人工合成的方法从煤焦油中制取，或以苯、甲苯、萘等芳香烃化合物为原料合成的有机色素。包括苋菜红、柠檬黄、亮蓝、日落黄、诱惑红、赤鲜红等等。合成着色剂的潜在危害致泻性、致癌性致泻性、致癌性国际：j

2、ecfa制定各种合成着色剂的adi我国：食品安全国家标准、食品添加剂使用标准（gb2760-2011）现状：超量使用，使用工业色素、染料色素 方便、快速、准确地检测食品中合成着色剂，是对其进行有效管理的必要手段。测定手段（gb/t 5009.35-2003）：1. 高效液相色谱法2. 薄层色谱法3. 示波极谱法4. 其他：纸上层析、分光光度法苋菜红、亮蓝、柠檬黄、日落黄苋菜红、亮蓝、柠檬黄、日落黄着色剂最大使用量（g/kg）柠檬黄0.1日落黄0.1苋菜红 0.05亮蓝 0.025合成着色剂在合成着色剂在饮料饮料中的最大使用量中的最大使用量（gb2760-2011）一、实验原理一、实验原理1.聚

3、酰胺吸附法提取合成着色剂聚酰胺吸附法提取合成着色剂 聚酰胺（尼龙）通过氢键吸附着色剂，天然着色剂（影响测定）在酸性条件下被洗脱去除，合成着色剂在碱性条件下被洗脱收集，浓缩后上机测定。吸附吸附洗涤洗涤解吸附解吸附浓缩浓缩上机上机理化测定一般步骤：除杂质、收集目标物、理化测定一般步骤：除杂质、收集目标物、调整浓度、上机调整浓度、上机2. 高效液相色谱法高效液相色谱法 高效液相色谱法（高效液相色谱法（hplc）：）：是是色谱法色谱法的的一个重要分支，以液体为一个重要分支，以液体为流动相流动相，采用高压，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶

4、剂、缓冲液等流动相泵入装同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有有固定相固定相的色谱柱，在柱内各成分被的色谱柱，在柱内各成分被分离分离后，后，进入进入检测器检测器进行检测，从而实现对试样的分进行检测，从而实现对试样的分析。析。 检测器：二极管阵列检测器检测器：二极管阵列检测器 3.结果分析结果分析保留时间保留时间（定性）：根据样品中各物质被洗脱至检测器的时间差异来进行定性分析；峰面积峰面积（定量）：根据样品峰面积与标准品峰面积的比较来进行定量分析。试剂试剂配方配方作用作用聚酰胺粉吸附柠檬酸溶液20g柠檬酸，100ml水溶解调phph 4的水（70） 水+柠檬酸溶液，调至ph=4，加热洗涤甲醇-

5、甲酸溶液60ml甲醇+40ml甲酸洗涤无水乙醇-氨水-水70ml乙醇+20ml氨水+10ml水 解吸附乙酸铵溶液1.54g乙酸铵，纯水定容至1000ml，乙酸调ph至4流动相合成着色剂标准溶液浓度0.05mg/ml定量分析50%乙醇定容样品其他乙酸、甲醇、氨水、蒸馏水水二、试剂与器材二、试剂与器材二、试剂与器材二、试剂与器材器材：器材：烧杯、玻棒、吸管、移液管、g3漏斗、抽滤瓶*2、针筒、温度计、5ml玻璃离心管电子天平、水浴锅三、实验步骤三、实验步骤1. 取样、脱气取样、脱气 称取饮料20g，倒入50ml烧杯，碳酸饮料用电炉加热除去二氧化碳。（已脱气）。2. 色素吸附色素吸附 称取聚酰胺3g

6、，用少许ph4的水（70）调成糊状，加入待测样品，搅拌5min。3. 除杂质除杂质 组装好g3漏斗，将样品倒入漏斗，抽滤； ph4的水（70）洗涤3次，每次20ml（洗涤沉淀物）； 甲醇-甲酸洗涤3次，每次20ml（洗涤天然色素）； 400ml ph4的水洗涤。4. 解吸附解吸附 更换抽滤瓶更换抽滤瓶。用乙醇-氨水-水溶液洗涤三次（5ml、10ml、5ml），收集解吸液。5. 样品浓缩样品浓缩 解吸液倒入蒸发皿中，80水浴蒸发至约2ml，以乙酸（一小滴）调节ph至6。收集样品至玻璃离心管，加水定容至5ml。3g聚酰胺聚酰胺20g饮料饮料70 ph4水，糊状加热脱气混合搅拌混合搅拌5ming3漏斗抽滤漏斗抽滤70 ph4水，水，20ml，洗，洗3次次甲醇甲醇-甲酸，甲酸，20ml，洗，洗3次次70 ph4水，水，400ml洗涤洗涤乙醇乙醇-氨水氨水-水，洗三次，水，洗三次，5ml、10ml、5ml更换抽滤瓶更换抽滤瓶收集滤液，收集滤液，80水浴至水浴至2ml乙酸调乙酸调ph至至6，离心管定容至，离心管定容至5ml，冰箱保存，冰箱保存抽滤过程注意抽滤过程注意搅拌、倒废液搅拌、倒废液清洗漏斗：自来水清洗漏斗：自来水-盐酸盐酸-蒸馏水蒸馏水目标物目标物6. 上机测定上机测定 3000rpm离心离心5min，取上层，取上层10l进高效液相色谱。进高效液相色