[医学微生物学]衣原体 螺旋体

1、第第21章章 衣原体衣原体Chlamydia概念：是概念：是严格真核细胞内寄生严格真核细胞内寄生 有有独特发育周期独特发育周期 能能通过细菌滤器通过细菌滤器 的一类原核细胞型微生物。的一类原核细胞型微生物。n革兰阴性，圆形或椭圆形体，体积大于病毒革兰阴性，圆形或椭圆形体，体积大于病毒n含有含有DNADNA和和RNARNA两类核酸两类核酸n有核糖体和较复杂的酶类，能进行多种代谢有核糖体和较复杂的酶类，能进行多种代谢n有独特的发育周期，二分裂方式繁殖有独特的发育周期，二分裂方式繁殖n对多种抗生素敏感对多种抗生素敏感主要致病性衣原体主要致病性衣原体对人致病对人致病: :沙眼衣原体沙眼衣原体 （C.

2、trachomatis）肺炎衣原体肺炎衣原体 ( (C.pneumoniae) )对动物致病对动物致病: :鹦鹉热衣原体鹦鹉热衣原体 （C. psittaci）兽类衣原体兽类衣原体 ( (C.pecorum) )世界首次分离培养成功沙眼衣原体；世界首次分离培养成功沙眼衣原体；“沙眼金奖沙眼金奖”获得者获得者汤飞凡教授汤飞凡教授第一节第一节 概概 述述一、生物学性状一、生物学性状 独特生长发育周期：独特生长发育周期： Elementary body 原体原体(EB)始体或网状体始体或网状体(Reticulate body,RB)(Reticulate body,RB)0h8h24h30h3540

3、h 一 生物学性状 （一）发育周期与形态染色 衣原体有独特的发育周期，在普通光学显微镜下可观察到两种形态，小而致密的为原体；大而疏松的为始体 原体 呈球形、椭圆形或梨形，直径0.20.4 m，是发育成熟的衣原体。具有强感染性，在宿主细胞外较稳定，无繁殖能力。当进入宿主易感细胞后，宿主细胞膜围于原体外形成空泡，原体在空泡中逐渐发育，增殖成为网状体。Giemsa染色呈紫色，Macchiavello染色呈红色。 始体 体积较大，直径0.51.0 m，圆形或椭圆形，电子致密度较低，无胞壁，代谢活跃，以二分裂方式繁殖，在空泡内增殖成许多子代原体。成熟的子代原体从被破坏的感染细胞中释放，再感染新的易感细胞

4、，开始新的发育周期，每个发育周期约4872 h。网状体是衣原体发育周期中的繁殖型，不具感染性，Macchivello染色呈蓝色。 *发育周期 从原体进入宿主细胞 ，到有新原体从得宿主细胞释放出来的过程称为一个发育周期 一个发育周期大约48-72h *染色性 用Macchiavello或Giemsa法染色，原体为红色或紫色，始体染成深蓝色 原体（培养原体（培养6060小时）小时）包涵体：指在包涵体：指在易感细胞内繁易感细胞内繁殖的始体和子殖的始体和子代原体的空泡，代原体的空泡，具有鉴别意义，具有鉴别意义，成熟的包涵体成熟的包涵体含大量原体。含大量原体。 抵抗力抵抗力 ： 对热、常用消毒剂、对热、

5、常用消毒剂、红霉素红霉素敏感敏感 75%乙醇乙醇 0.5min可杀灭；可杀灭； 耐低温和干燥（冷冻干燥保存耐低温和干燥（冷冻干燥保存30年）年）. 感染性感染性 胞外稳定性胞外稳定性 繁殖力繁殖力 代谢活性代谢活性 原体原体 0.2-0.4um + + - - 始体始体 0.5-1.0um + +培养特性：培养特性： 鸡胚鸡胚卵黄囊卵黄囊接种接种 Hela细胞细胞抗原结构：抗原结构： 属特异性抗原（位于胞壁，脂多糖）属特异性抗原（位于胞壁，脂多糖） 种特异性抗原（主要外膜抗原，种特异性抗原（主要外膜抗原，MOMPMOMP） 型特异性抗原（种间分血清型依据）型特异性抗原（种间分血清型依据） 主要

6、外膜蛋白易变异主要外膜蛋白易变异 衣原体分类：衣原体分类：衣原体属衣原体属： 沙眼生物变种沙眼生物变种沙眼衣原体沙眼衣原体 性病淋巴肉芽肿变种性病淋巴肉芽肿变种 鼠生物变种鼠生物变种 肺炎衣原体肺炎衣原体 鹦鹉热衣原体鹦鹉热衣原体 兽类衣原体兽类衣原体二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性n致病物质与机制：致病物质与机制： 脂多糖（脂多糖（LPS）：抑制宿主细胞代谢，破坏宿主细胞）：抑制宿主细胞代谢，破坏宿主细胞 外膜蛋白：外膜蛋白： 阻止吞噬体与溶酶体结合阻止吞噬体与溶酶体结合 表位变异而逃避抗体的中和表位变异而逃避抗体的中和 热休克蛋白：沙眼瘢痕的形成热休克蛋白：沙眼瘢痕的形成 n免疫性：免

7、疫性： 不强且短暂不强且短暂 易持续感染，反复感染易持续感染，反复感染 如沙眼如沙眼主要病原性衣原体主要病原性衣原体沙眼生物型沙眼生物型 1414个血清型个血清型 沙眼沙眼 (A(A、B B、BaBa、C C血清型血清型) ) 包涵体结膜炎包涵体结膜炎 (B(B、BaBa、D-KD-K血清型血清型) ) 非淋菌性泌尿生殖道感染非淋菌性泌尿生殖道感染(D- K(D- K血清型血清型) ) 婴幼儿肺炎婴幼儿肺炎 (D-K(D-K血清型血清型) )性病淋巴肉芽肿型性病淋巴肉芽肿型 4 4个血清型个血清型 性病淋巴肉芽肿性病淋巴肉芽肿 (L1(L1、L2L2、L2aL2a、L3L3血清型血清型) )肺

8、炎嗜衣原体肺炎嗜衣原体 呼吸道感染呼吸道感染 （TWARTWAR血清型）血清型）（一）沙（一）沙 眼眼目前世界上致盲的第一位病因目前世界上致盲的第一位病因通过通过 眼眼眼眼 或或 眼眼手手眼眼 途径传播途径传播眼结膜上皮细胞易感，其胞质内形成包涵体眼结膜上皮细胞易感，其胞质内形成包涵体早期，流泪，结膜充血及滤泡增生，伴脓性分泌物早期，流泪，结膜充血及滤泡增生，伴脓性分泌物晚期，结膜瘢痕，眼睑内翻，倒睫，角膜血管翳，失明晚期，结膜瘢痕，眼睑内翻，倒睫，角膜血管翳，失明沙眼衣原体沙眼衣原体沙眼角膜血管翳沙眼角膜血管翳新发现：新发现：沙眼衣原体沙眼衣原体G型与宫颈鳞癌的发生密切相关型与宫颈鳞癌的发生

9、密切相关（二）包涵体结膜炎（二）包涵体结膜炎新生儿包涵体结膜炎：产道感染新生儿包涵体结膜炎：产道感染 性接触性接触手手眼眼成人包涵体结膜炎成人包涵体结膜炎 污染的游泳池水污染的游泳池水眼眼引起滤泡性结膜炎，症状似沙眼，但无沙眼的后期症状引起滤泡性结膜炎，症状似沙眼，但无沙眼的后期症状沙眼衣原体沙眼衣原体（三）泌尿生殖道感染（三）泌尿生殖道感染非淋菌性尿道炎非淋菌性尿道炎男性：并发附睾炎、前列腺炎等男性：并发附睾炎、前列腺炎等女性：并发宫颈炎女性：并发宫颈炎.卵巢炎卵巢炎.盆腔炎等盆腔炎等性性 传传 播播 疾疾 病病 淋菌混合感染淋菌混合感染沙眼衣原体沙眼衣原体（四）（四）性病淋巴肉芽肿性病淋巴

10、肉芽肿 人是唯一宿主人是唯一宿主性传播疾病性传播疾病侵犯淋巴组织侵犯淋巴组织男性：腹股沟淋巴结炎和慢性肉芽肿男性：腹股沟淋巴结炎和慢性肉芽肿女性：会阴女性：会阴肛门肛门直肠狭窄和梗阻直肠狭窄和梗阻腹股沟淋巴结炎腹股沟淋巴结炎肺炎嗜衣原体肺炎嗜衣原体人是唯一宿主人是唯一宿主飞沫或呼吸道分泌物传播飞沫或呼吸道分泌物传播是呼吸道疾病重要的病原体，肺炎、支气管炎等是呼吸道疾病重要的病原体，肺炎、支气管炎等表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等新发现：肺炎嗜衣原体与冠状动脉粥样硬化的形成有关新发现：肺炎嗜衣原体与冠状动脉粥样硬化的形成有关（五）（五）呼吸道感染呼吸道感染 微生物学检

11、查法微生物学检查法 （一）（一）直接涂片镜检直接涂片镜检 Giemsa染色，染色，沙眼沙眼还还 要做碘液染色，要做碘液染色，查包涵体查包涵体（二）酶抗体法检查抗原（二）酶抗体法检查抗原 用抗衣原体抗体用抗衣原体抗体 、酶标抗体、酶标抗体IgG（三）分离衣原体（三）分离衣原体 小鼠腹腔、鸡胚卵黄囊或小鼠腹腔、鸡胚卵黄囊或 培养细胞培养细胞 （四）血清学诊断（四）血清学诊断 （五）检查核酸（五）检查核酸 PCR，杂交等，特异性及敏杂交等，特异性及敏 感性高感性高 Giemsa染色Lugal碘液染色微生物学检查与防治微生物学检查与防治特异性荧光抗体血清检测衣原体原体n注意个人卫生注意个人卫生（流水洗

12、脸、防治性病等）n红霉素、喹诺酮类药物治疗红霉素、喹诺酮类药物治疗n疫苗（尚无）疫苗（尚无）防治原则：防治原则：复习思考题n名词解释：衣原体n简述衣原体生活周期，比较原体始体。n简述衣原体所致疾病类型及其型别。第第22章章 螺旋体螺旋体Spirochetes 概述 钩端螺旋体属 密螺旋体属 I 概述 螺旋体 (Spirochete) - 一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。生物学性状与细菌相似。 基本结构与细菌相似，例如有细胞壁、原始核质，以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等。 2 分类 与人致病有关的螺旋体根据螺旋数目、螺旋规则程度、螺旋间距分： *钩端螺旋体属 *密螺旋体

13、属 *疏螺旋体属苍白密螺旋体苍白亚种重要的螺旋体重要的螺旋体螺旋体的科和属 螺旋体 引起人类疾病 病原体螺旋体科密螺旋体属(Treponema) 梅毒 苍白密螺旋体苍白亚种疏螺旋体属(Borrelia) 莱姆病 伯氏疏螺旋体 流行性回归热 回归热疏螺旋体 钩端螺旋体科钩端螺旋体属(Leptospira) 钩端螺旋体病 问号状钩端螺旋体 第一节第一节 钩端螺旋体钩端螺旋体 LeptospiraLeptospirosisLeptospirosisScanning electron micrograph of Leptospira interrogans strain RGA. Two spiroc

14、hetes bound to a 0.2 m filter.Strain RGAwas isolated in 1915 by Uhlenhuth and Fromme from the blood of a soldier in Belgium. CDC/NCID/Rob Weyant 1 生物学性状 形态与染色 螺旋细密（、规则 一端/两端钩状，菌体成8、S或C形 在暗视野显微镜下运动活泼 G-, Fontana镀银染色,染成棕褐色n培养特性 营养要求高 10%兔血清的Korthof培养基 温度 28oC-30oC , PH 7.2-7.4 生长缓慢（1-2周），菌

15、落小n抵抗力 抵抗力弱，但在潮湿环境中可生存数月 对青霉素敏感三、致病性与免疫性1、致病物质、致病物质u内毒素样物质：内毒素样物质：u溶血素：注射入小羊，可出现贫血、出血、肝肿大、黄疸溶血素：注射入小羊，可出现贫血、出血、肝肿大、黄疸 和血尿。和血尿。u细胞毒性因子：患者急性期血浆中存在细胞毒性因子：患者急性期血浆中存在，将之注射小鼠，将之注射小鼠， (CTF) 可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。可出现肌肉痉挛、呼吸困难而死亡。 u致细胞病变物质：注射入家兔，可形成红斑和水肿。主要致细胞病变物质：注射入家兔，可形成红斑和水肿。主要 引起细胞的退行性病变。引起细胞的退行性病变。二、致病性与免疫性所

16、致疾病所致疾病-一种人畜共患传染病一种人畜共患传染病传染源传染源,储存宿主储存宿主传播途径传播途径鼠和猪鼠和猪人与污染水或土壤接触人与污染水或土壤接触,经粘膜或经粘膜或破损皮肤进入破损皮肤进入;经胎盘垂直传播经胎盘垂直传播动物：多不发病，动物：多不发病， 在肾脏繁殖在肾脏繁殖-尿尿-排出排出流行季节流行季节：秋收水稻、雨季或洪水时秋收水稻、雨季或洪水时 临床表现临床表现进而损伤全身毛细血管内皮细胞进而损伤全身毛细血管内皮细胞 及肝、肾、肺心及中枢神经，及肝、肾、肺心及中枢神经， 可出现休克、可出现休克、DIC、黄疸、出血、黄疸、出血、 心肾功能不全、脑膜炎等。心肾功能不全、脑膜炎等。 先形成钩

17、体血症先形成钩体血症疾病特点疾病特点起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、膜充血、腓肠肌压痛腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大、表浅淋巴结肿大临床特征：临床特征：寒热寒热“三痛三痛”爬不起，爬不起，拒绝检查腓肠肌，拒绝检查腓肠肌，眼红出血淋巴肿，眼红出血淋巴肿，流行多在夏秋季。流行多在夏秋季。眼结膜充血眼结膜充血 3 免疫性 特异性的体液免疫特异性抗体 4 微生物检查法 1）病原学诊断 取标本镜检分离培养动物实验 2）血清学诊断 5 防治方法 抗菌疗法 药物： 青霉素非特异性：防鼠，灭鼠，圈猪， 保护水源特异性 构体外膜亚单位疫苗治疗药物首选青霉素检查与防治检查与

18、防治病原体检查：病原体检查：直接镜检、分离培养、动物试验及其他血清学诊断血清学诊断：显微镜凝集试验、补体结合试验、间接凝集试验防治原则：防治原则： 第二节第二节 梅毒螺旋体梅毒螺旋体Treponema pallidumTreponema pallidum（苍白密螺旋体苍白亚种）（苍白密螺旋体苍白亚种）Syphilis is a Public Health Problem Worldwide 12 Million New Cases Each Year90% of cases occur in developing nationsSub-saharan Africa33%South and So

19、utheast Asia33%Latin America and Caribbean25%North Africa and Middle East3%East Asia and Pacific2%North America1%Western Europe1%Eastern 1% EuropeSource: World Health Organization. Global prevalence and incidence of selected curable sexually transmitted diseases: overview and estimates. Figure 9: Es

20、timated new cases of syphilis among adults, 1999. 一、生物学性状一、生物学性状 大小大小 0.10.2 0.10.2 78um78um 形态染色形态染色 两端尖直、两端尖直、8-148-14个密螺纹个密螺纹 FontanaFontana镀银染色呈棕褐色镀银染色呈棕褐色 暗视野下，观察运动活泼暗视野下，观察运动活泼暗视野显微镜下观察HistopathologyHistopathology showingshowing Treponema pallidumTreponema pallidum spirochetes in spirochetes i

21、n testis of experimentally infected rabbit.testis of experimentally infected rabbit.Modified Steiner silver stain. Modified Steiner silver stain. CDC/Dr. Edwin P. Ewing, Jr. epe1CDC/Dr. Edwin P. Ewing, Jr. epe1cdccdc. .govgov 梅毒螺旋体梅毒螺旋体，梅毒螺旋体，FontanaFontana镀银染色镀银染色抵抗力抵抗力 极弱，极弱， 对红霉素、青霉素、砷剂敏感对红霉素、青霉素

22、、砷剂敏感 注注：44血库存放血库存放3 3天以上的血液无传染梅毒的危险天以上的血液无传染梅毒的危险培养培养 组织细胞培养，但生长困难组织细胞培养，但生长困难 二、致病性二、致病性-梅毒梅毒致病物质：荚膜样物质（唾液酸、粘多糖）致病物质：荚膜样物质（唾液酸、粘多糖） 主要外膜蛋白，透明质酸主要外膜蛋白，透明质酸 传传 染染 源：源： 梅毒病人（人是唯一宿主）梅毒病人（人是唯一宿主）传播途径：三种（性传播、血液传播、垂直传播）传播途径：三种（性传播、血液传播、垂直传播） 先天梅毒：三联征先天梅毒：三联征 锯齿形牙、间质性角膜炎锯齿形牙、间质性角膜炎（垂直传播）（垂直传播） 神经性耳聋神经性耳聋后

23、天梅毒：传染过程分三期，反复隐伏和再发后天梅毒：传染过程分三期，反复隐伏和再发（性传播、血液传播）（性传播、血液传播） 先先 天天 梅梅 毒毒先天梅毒儿先天梅毒儿锯齿形牙锯齿形牙锯齿形牙锯齿形牙间质性角膜炎间质性角膜炎第一期：硬性下疳期第一期：硬性下疳期第二期：梅毒疹期第二期：梅毒疹期第三期：树胶肿期第三期：树胶肿期 后天梅毒后天梅毒早期梅毒早期梅毒晚期梅毒晚期梅毒3 weeks皮肤粘膜梅毒螺旋体硬性下疳传染！传染！梅毒螺旋体潜伏在体内23个月个月无症状潜伏期梅毒疹期梅毒疹期3周3月症状消退而痊愈少数病例潜伏感染约约4年年早期梅毒传染性强破坏性小晚期梅毒晚期梅毒树胶肿期树胶肿期I期梅毒期梅毒

24、生殖器硬下疳生殖器硬下疳梅毒皮疹（梅毒皮疹（II期）期）梅毒全身皮疹（梅毒全身皮疹（II期）期）树胶肿（树胶肿（III期）期）鞍状鼻鞍状鼻梅毒性主动脉瘤梅毒性主动脉瘤三、免疫性三、免疫性n特异性制动抗体特异性制动抗体-抗抗TPTP抗体抗体n反应素（反应素（IgA+IgMIgA+IgM）-抗脂质抗体抗脂质抗体 辅助诊断，非特异性辅助诊断，非特异性传染性免疫传染性免疫以细胞免疫为主以细胞免疫为主两种抗体两种抗体四、微生物学检查四、微生物学检查 非密螺旋体抗原试验非密螺旋体抗原试验 (RPR test(RPR test或或USR test)USR test) 密螺旋体抗原试验密螺旋体抗原试验 荧光密螺旋体抗体吸收试验荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTAABS)(FTAABS) 梅毒螺旋体制动试验梅毒螺旋体制动试验(TPI)(TPI) 梅毒螺旋体血凝试验梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)(TPHA)直接镜检直接镜检荧光抗体镜检荧光抗体镜检检查梅毒螺旋体检查梅毒螺旋体血清学试验血清学试验梅毒诊断：梅毒诊断：病史病史+ +临床症状临床症状+ +病原体检测病原体检测+ +血清学检测血清学检测五、防治原则五、防治原则加强卫生宣传和社会管理加强卫生宣传和社会管理避免经性接触而感染避免经性接触而感染病人应病人应早诊断早诊断及及彻底治疗彻底治疗治疗首选青