人核转录因子肽NF-κBp65操作步骤

1、人核转录因子肽（NF- k B p65）操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在 小试管中进行稀释。2400ng/L 5号标准品150卩I的原倍标准品加入150卩I标准品稀释液 1200ng/L 4号标准品150卩I的5号标准品加入150卩I标准品稀释液 600ng/L 3号标准品150卩I的4号标准品加入150卩I标准品稀释液 300ng/L 2号标准品150卩I的3号标准品加入150卩I标准品稀释液 150ng/L 1号标准品150卩I的2号标准品加入150卩I标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔

2、、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50卩I，待测样品孔中先加样品稀释液40卩I，然后再加待测样品10卩I （样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37 C温育30分钟。4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒 后弃去，如此重复 5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50卩I，空白孔除外。7. 温育：操作同 3。8. 洗涤：操作同 5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50卩I ,再加入显色剂B50卩I，轻轻震荡混匀，

3、37 C避光显色15分钟.10. 终止：每孔加终止液50卩I，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度 （OD 值）。 测 定应在加终止液后 15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根 据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓 度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式， 将样品的OD值代入方程式，计算 出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包 被板开封后

4、如未用完，板条应装入密封袋中保存。2浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影 响结果。3各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一 次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4 请每次测定的同时做标准曲线， 最好做复孔。 如标本中待测物质含量过 高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数 （n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（X nx 5）。5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6底物请避光保存。7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8所有样品，洗涤液和各种废弃物

5、都应按传染物处理9本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存：；2-8 C。2有效期： 6 个月 _马麻疹病毒试剂盒使用说明书试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。96T使用目的：本试剂盒用于测定马血清、血浆及相关液体样本中麻疹病毒（MV表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马麻疹病毒（MV表达。用纯化的马麻疹病毒（MV抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中麻疹病毒（MV相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP标记的麻疹病毒（MV抗 体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作

6、用下转化成最终的黄色。 用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFfi相比较，从而判定标本中马麻 疹病毒（MV的存在与否。试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml X 1瓶7终止液6ml X 1瓶2酶标试剂6ml X 1瓶8阳性对照0.5ml X 1瓶3酶标包被板12孔X 8条9阴性对照0.5ml X 1瓶4 样品稀释液 6mlX1 瓶 10 说明书 1 份5显色剂A液6ml X 1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml X 1/瓶12密封袋1个标本要求1 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实 验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20 C保存，但应避免

7、反复冻融2不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP 活性。马麻疹病毒试剂盒操作步骤1. 编号：将样品对应微孔按序编号， 每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、 空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50卩l。然后在 待测样品孔先加样品稀释液40卩l ,然后再加待测样品10卩l。加样将样品加于酶 标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3. 温育：用封板膜封板后置37 C温育30分钟。4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜

8、，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒 后弃去，如此重复 5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50卩I，空白孔除外。7. 温育：操作同 3。8. 洗涤：操作同 5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50卩l ,再加入显色剂B50卩l，轻轻震荡混匀， 37 C避光显色15分钟.10. 终止：每孔加终止液50卩l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度 （OD 值）。 测 定应在加终止液后 15 分钟以内进行。操作程序总结：计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值1.00；阴性对照平均值W 0.10临界值（CUT OFF计算

9、：临界值二阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品0D值 临界值（CUT OFF者为麻疹病毒（MV阴性 阳性判定：样品0D值临界值（CUT OF F者为麻疹病毒（MV阳性。 注意事项1 操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。 2试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包 被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影 响结果。4 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5底物请避光保存。 6试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7所有样品， 洗涤液和各种废弃物

10、都应按传染物处理。 终止液为 2M 的硫酸， 使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保存：；2-8 C。2有效期： 6 个月人核转录因子-K B亚基p65亲试剂盒使用说明书试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T100ng/L - 2400ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清 , 血浆及相关液体样本中核转录因子 - KB 亚基 p65 亲的活性。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人核转录因子 -k B亚基p65亲水 平。用纯化的人核转录因子-k B亚基p65亲和肽(NF- k B p65)抗体包被微孔板， 制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入核转录因子

11、-k B亚基p65亲，再 与HRP标记的核转录因子-k B亚基p65亲抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体 复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色， 并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的核转录因子-KB 亚基p65亲呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准 曲线计算样品中人核转录因子-k B亚基p65亲浓度。试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml X 1瓶7终止液6ml X 1瓶2酶标试剂6ml X 1瓶8标准品(4800 ng/L ) 0.5ml X 1瓶3酶标包被板12孔X 8条9标准品稀释液1.5ml X 1瓶份

12、张4 样品稀释液 6mlX 1 瓶 10 说明书 15显色剂A液6ml X 1瓶11封板膜26显色剂B液6ml X 1/瓶12密封袋1标本要求1 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实 验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20 C保存，但应避免反复冻融2不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP活性。鲑鱼补体蛋白 3（C3） 试剂盒操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在 小试管中进行稀释。240卩g/ml 5号标准品150卩I的原倍标准品加入150卩I标准品稀释液 120卩g/ml 4 号标准品150卩I的5

13、号标准品加入150卩I标准品稀释液 60 g/ml 3号标准品150卩I的4号标准品加入150卩I标准品稀释液 30 g/mI 2号标准品150卩I的3号标准品加入150卩I标准品稀释液 15卩g/mI 1号标准品150卩I的2号标准品加入150卩I标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50卩I，待测样品孔中先加样品稀释液40卩I，然后再加待测样品10卩I （样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37 C温育30分钟。4.

14、配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒 后弃去，如此重复 5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50卩I，空白孔除外。7. 温育：操作同 3。8. 洗涤：操作同 5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50卩I ,再加入显色剂B50卩I，轻轻震荡混匀， 37 C避光显色10分钟.10. 终止：每孔加终止液50卩I，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度 （OD 值）。 测 定应在加终止液后 15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐

15、标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根 据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓 度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式， 将样品的OD值代入方程式，计算 出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包 被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影 响结果。3各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一 次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4 请每次测定的

16、同时做标准曲线， 最好做复孔。 如标本中待测物质含量过 高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数 （n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（X nx 5）。5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6底物请避光保存。7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9本试剂不同批号组分不得混用 保存条件及有效期1.试剂盒保存：；2-8 C。2有效期： 6 个月鲑鱼补体蛋白 3(C3) 试剂盒使用说明书试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T7 卩 g/ml -250 卩 g/ml使

17、用目的：本试剂盒用于测定鲑鱼血清、血浆及相关液体样本中补体蛋白3(C3) 含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鲑鱼补体蛋白3(C3) 水平。用纯化的鲑鱼补体蛋白 3(C3) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次 加入补体蛋白3(C3),再与HRP标记的补体蛋白3(C3)抗体结合，形成抗体-抗原- 酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化 成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的补体蛋白 3(C3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线 计算样品中鲑鱼补体蛋白3(C3)浓度。试剂盒组成1 30倍浓缩