王巍令斑尾复虾虎鱼耳石成分研究

1、斑 尾 复 鰕 虎 鱼耳 石 成 分 的 研 究学生：王巍令学生：王巍令 | 导师：叶振江导师：叶振江资源生物学实验室资源生物学实验室 2021-7-182021-7-18主要内容主要内容研 究 背 景材 料 方 法结 果 讨 论小 结致 谢2021-7-18研究背景研究背景斑尾复鰕虎鱼斑尾复鰕虎鱼l斑尾复鰕虎鱼斑尾复鰕虎鱼(Synechogobius ommaturus)，青岛地区俗称，青岛地区俗称Gung鱼，鱼，隶属鲈形目隶属鲈形目(Perciformes)鰕虎鱼科鰕虎鱼科(Gobiidae)，是鰕虎鱼科，是鰕虎鱼科(Gobiidae)中的大型种类，分布很广，从黄、渤海，东海，台湾省以及朝

2、鲜，中的大型种类，分布很广，从黄、渤海，东海，台湾省以及朝鲜，日本直到印度尼西亚等地的近岸海区或咸淡水域均有分布。其肉质日本直到印度尼西亚等地的近岸海区或咸淡水域均有分布。其肉质鲜美，在沿海和河口的渔业中，有一定的经济意义。鲜美，在沿海和河口的渔业中，有一定的经济意义。斑尾复鰕虎鱼斑尾复鰕虎鱼2021-7-18研究背景研究背景斑尾复鰕虎鱼斑尾复鰕虎鱼l斑尾复鰕虎鱼形态学分类特征为：背鳍斑尾复鰕虎鱼形态学分类特征为：背鳍 , 1920；臀鳍；臀鳍, 1618；腹鳍；腹鳍, 5。纵裂鳞。纵裂鳞52-65。脊椎骨。脊椎骨4143。体长为体高的。体长为体高的5.27.8倍；为倍；为头长的头长的3.65

3、.8倍。头长为吻长的倍。头长为吻长的2.52.9倍；为眼径的倍；为眼径的5.18.1倍；为尾鳍倍；为尾鳍长的长的0.91.5倍。尾柄长为尾柄高的倍。尾柄长为尾柄高的1.84.5倍。倍。l斑尾复鰕虎鱼属多次产卵类型，在繁殖期间产两次卵。产卵的早期为斑尾复鰕虎鱼属多次产卵类型，在繁殖期间产两次卵。产卵的早期为3月，月，盛期为盛期为4-5月份。月份。斑尾复鰕虎鱼斑尾复鰕虎鱼2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石l耳石，位于硬骨鱼类内耳膜迷路中，耳石，位于硬骨鱼类内耳膜迷路中，在膜迷路的椭圆囊、球状囊和平状在膜迷路的椭圆囊、球状囊和平状囊囊(听壶听壶)中各有微耳石、矢耳石和中各有微耳石、矢耳石和星

4、耳石一对，星耳石较小，微耳石星耳石一对，星耳石较小，微耳石侧扁，矢耳石形状有亚圆形、长圆侧扁，矢耳石形状有亚圆形、长圆形、盾形几种，体积最大，因此更形、盾形几种，体积最大，因此更多地被用来研究多地被用来研究(本研究同本研究同)。l耳石作用为声音接收，平衡定位以耳石作用为声音接收，平衡定位以及对外源性污染物进行生物规避。及对外源性污染物进行生物规避。硬骨鱼类矢耳石位置示意图硬骨鱼类矢耳石位置示意图2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石l耳石的主要成分为耳石的主要成分为CaCO3，物相结构为文石，物相结构为文石(霰石霰石)或球文石或球文石(球霰石球霰石)；占；占3%-4%的有机的有机质，对于质

5、，对于CaCO3多型的选择、取向、形态等多型的选择、取向、形态等结晶习性具有控制作用。结晶习性具有控制作用。l耳石是鱼类分类的重要形态学指标，和鳍条、耳石是鱼类分类的重要形态学指标，和鳍条、鳞片、脊椎骨等相比，具有代谢惰性。因此，鳞片、脊椎骨等相比，具有代谢惰性。因此，不管是在形态上还是在成分组成上，耳石较不管是在形态上还是在成分组成上，耳石较其他组织更加稳定。其他组织更加稳定。l由于耳石在形成过程中，其形态结构、轮纹由于耳石在形成过程中，其形态结构、轮纹及化学组成都相当稳定，因此可以作为一种及化学组成都相当稳定，因此可以作为一种天然的生物标签而记录鱼类的生活史和生活天然的生物标签而记录鱼类的

6、生活史和生活环境的变化。环境的变化。 斑尾复鰕虎鱼矢耳石斑尾复鰕虎鱼矢耳石2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石2004年，第三届国际耳年，第三届国际耳石学术会议。国内亦开石学术会议。国内亦开始对耳石微化学感兴趣始对耳石微化学感兴趣，但多为综述性描述。，但多为综述性描述。18991971198320041971年年Pannella发发现耳石日轮。现耳石日轮。1983年，质谱仪首年，质谱仪首次商业运用。次商业运用。1899年，年，Reibisch发发现耳石年轮。现耳石年轮。2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石美国、法国、德国、加拿大、美国、法国、德国、加拿大、澳大利亚、韩国、日本等对于

7、澳大利亚、韩国、日本等对于耳石都有研究，其中以加拿大耳石都有研究，其中以加拿大贝德福德海洋研究所贝德福德海洋研究所Campana成果最为显著，其研究领域涉成果最为显著，其研究领域涉及耳石成分、耳石形态、耳石及耳石成分、耳石形态、耳石微结构甚至微结构甚至3D结构；研究方法结构；研究方法包括了野生调查和室内实验等；包括了野生调查和室内实验等；研究手段涵盖了所有的常见仪研究手段涵盖了所有的常见仪器，并对各仪器性能、效果等器，并对各仪器性能、效果等进行了详细比较。进行了详细比较。 国际国际与国外相比，国内在基础数据与国外相比，国内在基础数据和实验方法上都有很大差距。和实验方法上都有很大差距。目前国内对

8、耳石的研究主要集目前国内对耳石的研究主要集中在耳石的形态、微结构（年中在耳石的形态、微结构（年轮、日轮、标记轮以及它们与轮、日轮、标记轮以及它们与生长发育的关系）等。对于微生长发育的关系）等。对于微化学的研究，除综述性文献外，化学的研究，除综述性文献外，仅有地质大学李胜荣、水生所仅有地质大学李胜荣、水生所张国华等有所涉及。且均为对张国华等有所涉及。且均为对淡水鱼的研究。淡水鱼的研究。国内国内研究背景研究背景耳石耳石耳石微结构研究耳石微结构研究1.年轮年轮2.日轮日轮3.标记轮标记轮4.结晶方式结晶方式耳石微化学研究耳石微化学研究1.Sr/Ca研究研究2.Ba/Ca研究研究3.其他元素研究其他元

9、素研究4.同位素研究同位素研究耳石形态学研究耳石形态学研究1.1.传统形态学方法传统形态学方法2.2.傅里叶分析方法傅里叶分析方法2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石与温度有关与温度有关水温水温，较准确较准确“海洋温度计海洋温度计”与食物有关与食物有关一般用于确定一般用于确定营养级营养级与食物有关与食物有关一般用于确定一般用于确定营养级营养级耳石的同位素研究耳石的同位素研究2021-7-18研究背景研究背景耳石耳石其他种群生活史环境种群和群体的识别种群和群体的识别养殖鱼与野生鱼的区分养殖鱼与野生鱼的区分考古学考古学蛋白质对蛋白质对CaCO3的调控的调控环境监测环境监测推断海洋环境变化推断

10、海洋环境变化生活史的重建生活史的重建产卵场和产卵期的确定产卵场和产卵期的确定高龄鱼年龄的确定高龄鱼年龄的确定耳石微化学研究应用耳石微化学研究应用各方向之间联系密切，往往很难界定。各方向之间联系密切，往往很难界定。2021-7-18研究背景研究背景化学分析仪器化学分析仪器 电感耦合等离子质谱仪电感耦合等离子质谱仪01 电子微探针电子微探针02激光熔融电感耦合等离子质谱仪激光熔融电感耦合等离子质谱仪03 耳石微取样仪器耳石微取样仪器042021-7-18材料方法材料方法样本采集样本采集116.00118.00120.00122.00124.00126.0022.0024.0026.0028.003

11、0.0032.0034.0036.0038.0040.00DDTJDYWHQDGYXMDL样本采集方法样本采集方法l样本鱼采自丹东、大连、天津、样本鱼采自丹东、大连、天津、东营、威海、青岛、赣榆和厦门东营、威海、青岛、赣榆和厦门八个站点。八个站点。l采集过程中确保知道样本鱼的准采集过程中确保知道样本鱼的准确采集地点和采集时间。确采集地点和采集时间。l采集完成后，冰储运回实验室，采集完成后，冰储运回实验室，确保无腐无臭，样本新鲜。确保无腐无臭，样本新鲜。l大连标本采自于虾池，其他均为大连标本采自于虾池，其他均为野生。野生。 2021-7-18l在实验室中，对每条鱼的体长在实验室中，对每条鱼的体长

12、和体重进行测量，体长精确到和体重进行测量，体长精确到毫米，体重精确到毫克。毫米，体重精确到毫克。l在摘取耳石之前，对部分实验在摘取耳石之前，对部分实验用鱼用鱼(天津、青岛、赣榆的天津、青岛、赣榆的26尾尾鱼鱼)的雌雄进行了确定，以检验的雌雄进行了确定，以检验雌雄鱼在耳石成分上是否有显雌雄鱼在耳石成分上是否有显著差异。著差异。 l耳石标本取出后用去离子水清耳石标本取出后用去离子水清洗，然后置入洁净的离心管中。洗，然后置入洁净的离心管中。材料方法材料方法鱼体处理鱼体处理Agilent 7500A ICPMS地点地点采集时间采集时间数量数量体长范围体长范围(mm)性比性比(雌：雄雌：雄)丹东丹东20

13、07099158-175大连大连2007119190-225天津天津2007099190-2174:5东营东营2007059190-222威海威海2007039230-251青岛青岛2007118190-2233:5赣榆赣榆200704 9191-2244:5厦门厦门2007129191-224材料方法材料方法耳石处理耳石处理用超纯水清洗三遍然后放用超纯水清洗三遍然后放在酸洗过的玻璃片上，置在酸洗过的玻璃片上，置于层流罩（层流阁室）中于层流罩（层流阁室）中36h晾干。晾干。 将耳石样品用超纯水浸将耳石样品用超纯水浸泡过夜泡过夜（24h）将浸泡过的耳石样品置于纯将浸泡过的耳石样品置于纯双氧水中浸

14、泡约双氧水中浸泡约5min，并，并用玻璃针剔除所有的粘连组用玻璃针剔除所有的粘连组织。织。称重（精度称重（精度 0.01mg），），称重过程中应该保证耳石称重过程中应该保证耳石只接触酸洗过的塑料或者只接触酸洗过的塑料或者玻璃制品。玻璃制品。 称重完毕后放入酸洗过的称重完毕后放入酸洗过的聚乙烯管中以待测量。聚乙烯管中以待测量。2021-7-18材料方法材料方法测试分析测试分析测试分析测试分析l在酸洗过的盛有耳石的聚乙烯管中在酸洗过的盛有耳石的聚乙烯管中倒入纯浓硝酸（罗米尔纯）倒入纯浓硝酸（罗米尔纯）0.1ml，过夜、溶解（对于空白样品进行同过夜、溶解（对于空白样品进行同样处理，但是不加入耳石，以

15、方便样处理，但是不加入耳石，以方便做校检和确定检出最低限，下同）。做校检和确定检出最低限，下同）。 l将溶解液倒入大瓶并定重至将溶解液倒入大瓶并定重至10g（也（也就是体积上的就是体积上的10ml）。）。l将定重后的溶液用将定重后的溶液用Agilent 7500A ICP-MS进行分析，测定进行分析，测定K, Ca, Na, Mg, Sr, Pb, Ba, Mn, Co, Zn等等10种元种元素。）素。）Agilent 7500A ICPMS2021-7-18材料方法材料方法测试分析测试分析Agilent 7500A ICPMS测试分析测试分析l在使用前在使用前15分钟即对分钟即对ICP进行预

16、热，进行预热，以保持仪器的稳定性。以保持仪器的稳定性。l对设备采用对设备采用7Li、89Y、140Ce、205Tl(10gL-1)进行校准以达到最进行校准以达到最佳测试效果。佳测试效果。l测试中对所有样品进行随机乱序，测试中对所有样品进行随机乱序，以减小由于仪器产生的误差。以减小由于仪器产生的误差。l每测试每测试9个样品便重新用标准液进行个样品便重新用标准液进行校检，以减小误差。校检，以减小误差。 采用采用 SPSS 16.0对测试结果进行系列分析对测试结果进行系列分析材料方法材料方法统计分析统计分析 耳石重量和耳石元素浓度耳石重量和耳石元素浓度 雌雄个体之间雌雄个体之间 不同站点之间不同站点

17、之间 不同站点之间不同站点之间 不同站点之间不同站点之间 回归分析回归分析 方差分析方差分析 方差分析方差分析 聚类分析聚类分析 判别分析判别分析结果讨论结果讨论 分布广分布广 样本获得容易，成本低样本获得容易，成本低 定居性强，适合做初步研究定居性强，适合做初步研究 应用价值较大应用价值较大 国内研究空缺国内研究空缺 检测范围广检测范围广 误差较小误差较小 相比相比LA-ICP-MS成本低成本低 可满足定居鱼类研究需求可满足定居鱼类研究需求 操作简单，可控性强操作简单，可控性强2021-7-18研究背景研究背景化学分析仪器化学分析仪器l电感耦合等离子质谱仪电感耦合等离子质谱仪lInducti

18、vely Coupled Plasma Mass Spectrometry l简称：简称：ICP-MS，Solution-based ICP-MSl工作原理：在真空条件下将待测液体原子工作原理：在真空条件下将待测液体原子化，将原子化之后的大部分原子离子化，化，将原子化之后的大部分原子离子化，离子按质荷比分离，计算各种离子数目。离子按质荷比分离，计算各种离子数目。l优点：快速，精确，元素质谱简单，不受优点：快速，精确，元素质谱简单，不受化学和物理因素的干扰化学和物理因素的干扰 ；样本量易满足。；样本量易满足。l缺点：只能对样本整体分析，无法体现样缺点：只能对样本整体分析，无法体现样本内部差异。本

19、内部差异。ICP-MS离子源系统离子源系统2021-7-18研究背景研究背景化学分析仪器化学分析仪器l同位素稀释和比值测定的技术同位素稀释和比值测定的技术方法，目前已经成为方法，目前已经成为ICPMS研研究的重点之一。究的重点之一。l同位素电感耦合等离子质谱仪同位素电感耦合等离子质谱仪(ID-ICP-MS, Isotope Dilution ICP-MS)目前在耳石微化学分目前在耳石微化学分析中也已得到了广泛应用。析中也已得到了广泛应用。 ICP-MS离子源系统离子源系统2021-7-18研究背景研究背景化学分析仪器化学分析仪器l电子微探针（电子探针微区分析）电子微探针（电子探针微区分析）lE

20、lectron Probe Micro Analysisl简称：简称： EPMAl工作原理：是工作原理：是X射线光谱分析和电子显微射线光谱分析和电子显微镜两者的组合，利用电子枪发射的高能镜两者的组合，利用电子枪发射的高能量电子流通过磁透镜，聚焦成直径约量电子流通过磁透镜，聚焦成直径约0.1-1m的电子探针，在测试切面的微小区域的电子探针，在测试切面的微小区域进行轰击，通过波谱仪或者能谱仪测量进行轰击，通过波谱仪或者能谱仪测量发射出来的各种信号得到有关表面的信发射出来的各种信号得到有关表面的信息。息。EPMA中中X射线的形成射线的形成2021-7-18研究背景研究背景化学分析仪器化学分析仪器l优

21、点：探针优点：探针(电子束半径电子束半径)小不受化学小不受化学和物理因素及分析方法的系统误差干扰和物理因素及分析方法的系统误差干扰可用于元素的形态分析可以测得日轮可用于元素的形态分析可以测得日轮上的元素，形成日轮元素指纹不污染上的元素，形成日轮元素指纹不污染样品对于样本损坏较小，同一切片在样品对于样本损坏较小，同一切片在EPMA分析后经过除碳、酸蚀、涂金后可分析后经过除碳、酸蚀、涂金后可直接用于直接用于SEM显微结构分析。显微结构分析。l缺点：元素的检出限高，大约为缺点：元素的检出限高，大约为100g/ g，不适于痕量元素的检测。不适于痕量元素的检测。l样本制作步骤：清洗样本制作步骤：清洗干燥

22、干燥树脂包埋树脂包埋切割切割研磨研磨干燥干燥真空涂碳真空涂碳(一般涂一般涂500A)。 EPMA分析操作流程图分析操作流程图2021-7-18研究背景研究背景化学分析仪器化学分析仪器l激光剥蚀（熔融）电感耦合等离子质谱仪激光剥蚀（熔融）电感耦合等离子质谱仪lLaser Ablation Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry l简称：简称：LA-ICP-MSl工作原理：利用高能量的激光照射在固态工作原理：利用高能量的激光照射在固态样品表面，产生加热，气化，融化，离子样品表面，产生加热，气化，融化，离子原子、分子及样品碎片的溅散，电浆，气原子、分

23、子及样品碎片的溅散，电浆，气体的震波等各种现象，气化产生的气体由体的震波等各种现象，气化产生的气体由惰性气体氩气携带进入惰性气体氩气携带进入ICP-MS系统。系统。l优点：检测范围较优点：检测范围较EPMA广，固态检验。广，固态检验。l缺点：检测范围较缺点：检测范围较ICP-MS窄，和窄，和EPMA相比对样品损害大，通常不能检测日轮。相比对样品损害大，通常不能检测日轮。激光熔融系统示意图激光熔融系统示意图2021-7-18研究背景研究背景化学分析仪器化学分析仪器DM-2800中分辨率，即用于评价相对较中分辨率，即用于评价相对较长期的年与年或季与季之间的长期的年与年或季与季之间的同位素成分变化。

24、同位素成分变化。耳石微取样仪耳石微取样仪Microsampler高分辨率，即分辨率为高分辨率，即分辨率为20-40m间间隔，可评价耳石月轮或更细微的变隔，可评价耳石月轮或更细微的变化。方法是用计算机控制的操作系化。方法是用计算机控制的操作系统平台将耳石的生长轮数字化，然统平台将耳石的生长轮数字化，然后计算出各序列区如年轮、季轮等后计算出各序列区如年轮、季轮等磨具的路径并用一个金刚石齿形磨磨具的路径并用一个金刚石齿形磨具研磨出能反映时间系列的碳酸盐具研磨出能反映时间系列的碳酸盐小样小样。结果讨论结果讨论耳石元素浓度值耳石元素浓度值结果讨论结果讨论耳石元素浓度值耳石元素浓度值l赣榆个体的赣榆个体的

25、Mg、K、Sr、Mn、Co的值均较低，但是的值均较低，但是Ba和和Pb的值较高，大连个的值较高，大连个体体Zn和和Mn的值较高，厦门的值较高，厦门个体的个体的Mg值显著高于其他，值显著高于其他，东营个体的东营个体的K和和Co值较高，值较高，威海个体的威海个体的Sr值较高。值较高。 结果讨论结果讨论耳石重与耳石元素浓度的回归分析耳石重与耳石元素浓度的回归分析结果讨论结果讨论耳石重与耳石元素浓度的回归分析耳石重与耳石元素浓度的回归分析结果讨论结果讨论雌雄个体间方差分析雌雄个体间方差分析元素元素均方均方FP值值Na0.0990.3400.565Mg0.0000.0020.964K0.0000.411

26、0.527Ca141.2423.2140.086Sr0.0340.7550.394Mn0.4030.2920.594Co0.0010.9590.337Zn7.8281.1490.294Ba0.0440.0020.963Pb0.0012.7790.109Sr/Ca0.0000.0230.882l雌雄间生理状况差异不会雌雄间生理状况差异不会造成的元素吸收的差异，造成的元素吸收的差异，或者造成的这种差异和水或者造成的这种差异和水体环境元素本身的差异相体环境元素本身的差异相比较小。比较小。 结果讨论结果讨论站点间方差分析站点间方差分析元素元素均方和均方和均方均方FP23Na1.2260.1751.22

27、30.30424Mg0.0120.0020.7960.59439K0.0740.0118.8700.000Regress of K0.0550.0086.3710.00043Ca80.28011.4690.4040.89788Sr2.1290.30413.4050.00055Mn376.45253.77918.7500.000Regress of Mn3.1480.45019.8550.00059Co0.1310.01932.2420.00066Zn30.8774.4111.5010.183137Ba520.02774.29021.3840.000208Pb0.0110.0024.0600.0

28、01Sr/Ca0.0000.00013.7050.000Ca、Na、Mg、Zn在各站点间无显著在各站点间无显著性差异，性差异，K、Sr、Mn、Co、Pb有显著有显著性差异。大连样本的性差异。大连样本的Mn元素的值显著元素的值显著高于其他站点，这可能是因为大连样高于其他站点，这可能是因为大连样本取自于养殖虾池，养殖水体消毒过本取自于养殖虾池，养殖水体消毒过程中高锰酸钾的使用可能导致程中高锰酸钾的使用可能导致Mn元素元素的升高。而的升高。而K没有这种显著差异，这可没有这种显著差异，这可能是因为：能是因为：K与与Mn在在CaCO3中的占位中的占位方式不同，与方式不同，与K相比，相比，Mn更容易受到更

29、容易受到水体环境的影响。水体环境的影响。大连和青岛样本中的大连和青岛样本中的Zn元素浓度元素浓度值高于其他站点。东营样本中值高于其他站点。东营样本中K和和Co的浓度值高于其他站点。在所的浓度值高于其他站点。在所有站点中，威海样本的有站点中，威海样本的Sr元素浓度元素浓度最高，但是最高，但是Pb元素浓度最低。青岛元素浓度最低。青岛个体的个体的Ba元素浓度最低。元素浓度最低。Sr/Ca同同样有显著性差异，样有显著性差异，赣榆最低，厦门、赣榆最低，厦门、东营次之，这种差异不足以解释温东营次之，这种差异不足以解释温度或者盐度的单独差异，有可能是度或者盐度的单独差异，有可能是多种因素综合的结果，还可能受

30、到多种因素综合的结果，还可能受到食物的影响。食物的影响。 2021-7-18结果讨论结果讨论lSr和和Ca为同族元素，和为同族元素，和Ca具有相似具有相似生物功能，生物功能，Sr在在CaCO3沉淀中可代替沉淀中可代替Ca。lSr/Ca可以较准确反映水体盐度的大可以较准确反映水体盐度的大幅变化，因此幅变化，因此Sr/Ca往往用于确定洄往往用于确定洄游性鱼类生活史；也有研究表明在盐游性鱼类生活史；也有研究表明在盐度相差不大的海水中，度相差不大的海水中，Sr/Ca亦能反亦能反映盐度的微小变化。映盐度的微小变化。lSr/Ca对温度的指示作用争议较大，对温度的指示作用争议较大，目前几种观点共存：正相关负

31、相目前几种观点共存：正相关负相关不相关关不相关20，；Mn Sr Se Fe As Ba K Co Au Na Cr。 2021-7-18结果讨论结果讨论站点间聚类分析站点间聚类分析l聚类分析结果显示，青岛和丹东的相似度最强，其次是天津和威海。聚类分析结果显示，青岛和丹东的相似度最强，其次是天津和威海。大连和各群体的相似度均比较差，这可能是因为大连取自于养殖池，大连和各群体的相似度均比较差，这可能是因为大连取自于养殖池，养殖池的水环境与野生环境不同，直接造成耳石浓度的差异，也可养殖池的水环境与野生环境不同，直接造成耳石浓度的差异，也可能这种不同首先造成鱼体生理状况不同，从而导致蛋白质对微量元能

32、这种不同首先造成鱼体生理状况不同，从而导致蛋白质对微量元素沉积的调控不同，间接造成耳石成分的差异。素沉积的调控不同，间接造成耳石成分的差异。 聚类分析结果聚类分析结果结果讨论结果讨论站点间判别分析站点间判别分析l在判别分析中均使用耳石的标准在判别分析中均使用耳石的标准化变量，结果显示，对所有样本化变量，结果显示，对所有样本的总体识别率为的总体识别率为80.3%，对各个，对各个站点间识别的成功率从站点间识别的成功率从44.4%到到100%不等，其中青岛和丹东较不等，其中青岛和丹东较容易混群，即青岛个体中有容易混群，即青岛个体中有37.5%误判为丹东个体，而丹东误判为丹东个体，而丹东个体中有个体中

33、有44.4%误判为青岛个体。误判为青岛个体。厦门和威海个体的识别率最高，厦门和威海个体的识别率最高，为为100%。 结果讨论结果讨论站点间判别分析站点间判别分析分组分组Count合计合计青岛青岛大连大连天津天津赣榆赣榆厦门厦门丹东丹东威海威海东营东营青岛青岛5(62.5%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)3(37.5%)0(0%)0(0%)8大连大连0(0%)8(88.9%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)1(11.1%)0(0%)9天津天津0(0%)0(0%)8(88.9%)0(0%)0(0%)1(11.1%)0(0%)0(0%)9赣榆赣榆0(0%)0(0%)1(11.1%)6(66.7%)2(22.2%)0(0%)0(0%)0(0%)9厦门厦门0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)9(100%)0(0%)0(0%)0(0%)9丹东丹东4(44.4%)0(0%)0(0%)0(0%)1(11.1%)4(44.4%)0(0%)0(0%)9威海威海0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)9(100%)0(0%)9东营东营0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)0(0%)