三叶青对CCl4致肝损伤大鼠血清五项生化指标水平的影响

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减三叶青对CCI4致肝损伤大鼠血清五项生化指标水平的影响（作者：单位：邮编：）作者：伍昭龙，吕江明，李春艳，彭英福摘要：目的：研究三叶青水煎液对CCI4致大鼠急性肝损伤的保护 作用。方法：将40只SD大鼠随机分为5组，即正常对照组，模型对 照组，高、低剂量治疗组及阳性对照组，分别灌胃等容积 （10 mL/kg） 的生理盐水、三叶青水煎液（1.6 g/mL、0.16 g/mL）和联苯双酯（0.000208 g/mL ），连续6 d，每天1次。末次给药后，除正常组外 其他各组腹腔注射CCl4原液1次，造成大鼠急性肝损伤模型，检测 血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨

2、酶（AST ）、碱性磷酸酶（ALP）丙 二醛（MDA及超氧化物歧化酶（SOD水平。结果：与模型组比较， 三叶青高、低剂量治疗组ALTASTALP及MDA含量均明显降低（P0.05 或P0.01），但SOD舌性明显升高（P0.05或P0.01）；高剂量组与阳性 对照组比较，AST ALP及MDA水平差异显著（P0.05）。结论：三叶 青对CCl4造成的大鼠急性肝损伤具有保护作用，且三叶青高剂量保 护损伤肝的效果优于联苯双酯。关键词：三叶青；水煎液；肝损伤；CCl4三叶青为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤（TetrastigmaHemsleyanum Diels et Gilg ），主要分布于长江以南

3、各地，药源十分丰富。全草含有槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-0-新橙皮糖苷等多种黄 酮类化合物1-3，具有清热解毒、活血祛风的功效4，民间用于治 疗黄疸及急、慢性肝炎有较好的疗效。药理实验表明，三叶青能促进 家兔肝细胞吸收和吞噬放射性四碘四氯荧光素5，有加强肝脏功能的作用。在此基础上，我们研究了对 CCI4造成的大鼠急性肝损伤5 项血清生化指标水平的影响，以探讨其作用机制，为临床应用三叶青 治疗肝病提供实验依据。1材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物SD大鼠40只，质量（180 士 20）g，由中南大学实验动物学部提供。1.1. 2药品与试剂三叶青（块根）米自湖南吉首市郊区，由李春艳副教授进

4、行生药学 鉴定；联苯双酯（浙江医药股份有限公司新昌制药厂），批号：050604。ALT试剂盒，批号：010021; AST试剂盒，批号：020071; ALP试剂 盒，批号：030261，以上均为北京中生北控生物科技股份有限公司产 品。MDA试剂盒，批号：20051202; SOD试剂盒，批号：20051212, 均为南京建成生物工程研究所产品。1 . 1. 3三叶青水煎液的制备取三叶青干燥块根320 g，捣碎，加水1000 mL浸泡0.5 h后再煎 煮2 h，滤过。滤渣再加水1000 mL,煎煮1.5 h，滤过，合并滤液 并浓缩到200 mL。制得三叶青水煎液，每1 mL含生药1.6 g。1

5、.1. 4仪器YS-2000 III半自动生化分析仪（深圳越华科技发展有限公司）；723 可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；80-2B离心机（湖南星 科科学仪器有限公司）；HHW212C电热恒温水箱（天津泰斯特仪器有 限公司）。1 . 2方法1 . 2. 1实验大鼠分组、给药及血清的制备SD大鼠随机分为5组，每组8只，雌雄各半。分别为正常对照组、 模型对照组，灌胃10 mL/kg生理盐水；三叶青高、低剂量治疗组，灌 胃等容积的三叶青水煎液，浓度分别为1.6 g/mL、0.16 g/mL，给药剂量为16 g/kg和1.6 g/kg，后者根据成人用量以K折算系数法 换算确定；阳性对照组，灌胃

6、等容积的联苯双酯，质量浓度为0.000208 g/mL，给药剂量为0.00208 g/kg。以上各组均每天给药1次，连续6 d。末次给药后，除正常对照组外，其余大鼠按2 mL/kg腹腔注射CCI4 原液1次，建立急性肝损伤模型。该剂量由预实验确定，为文献 7 的2倍。禁食24 h后，称体重，以3 %戊巴比妥钠按1 mL/kg腹腔 注射麻醉大鼠，腹主动脉取血，3500 r/min离心10 min取血清，待 测。1 . 2. 2血清生化指标的检测血清ALT、AST ALP活性的检测按试剂盒要求采用 YS-2000 III半 自动生化分析仪进行测定，检测方法为连续监测法，温度 37 C ;血 清MD

7、A浓度及总SOD舌性的检测按试剂盒要求，采用 723-可见分光 光度计进行测定，检测方法分别为 TBA（ thibabituric acid ，硫代 巴比妥酸）法和羟胺法。1 . 2. 3数据统计实验数据均采用均数士标准差（士 s）表示。各组间均数比较采用单 因素方差分析，组间比较采用t检验。所有统计均用SPSS11.5统计 软件分析。2 结果见表1。表1三叶青水煎液对肝损伤大鼠血清 ALT AST、ALP MDA及 SOD的影响由表1可以看出，正常对照组ALT AST ALP及MDA水平最低， SOD舌性最高；模型对照组则相反，两组各指标比较具有非常显著性 差异（P治疗组ALT AST AL

8、P及 MDA水平均显著降低（P 3讨论CCI4肝损伤模型现已广泛用于护肝药物的筛选和机理研究，其机制 为：CCl4在肝内经微粒体细胞色素 P450分解活化，形成三氯甲基自 由基（CCI3）和氯自由基（Cl）,导致肝微粒体的脂质过氧化。由于脂质 过氧化反应增强而抗氧化能力下降，导致自由基生成增加，通过氧化 细胞膜脂质，使肝细胞结构和功能受到损害8。据此，本项实验选择 检测ALT AST ALP MDA及 SOD6来探讨三叶青护肝作用的药理 机制。研究表明，黄酮类化合物对CCI4和半乳糖胺诱导的肝脏毒性具有保 护作用9，同时还具有显著的抗氧化作用10。三叶青由于含有多 种黄酮类化合物，并且其所含的

9、黄酮类化合物槲皮素等含有抗脂质过 氧化作用的酚羟基基团11，推测其护肝的主要有效成分可能即为该 类黄酮类物质。三叶青能明显降低肝损伤大鼠血清脂质过氧化产物 MDA勺含量，为其护肝的分子机制的研究提供了启示：一方面可能由 于所含的酚羟基黄酮类化合物能直接捕捉、清除自由基，生成自由基中间体，阻断或终止自由基连锁反应链，从而阻止或抑制氧自由基反 应和脂质过氧化反应，最终抑制MDA勺生成；另一方面通过提高抗氧 化剂SOD勺活性来降低MDA的生成。两方面的作用共同减轻肝细胞的 膜性结构的破坏，抑制炎症渗出，从而降低血清ALT AST及 ALP的活性，促进肝功能的恢复。高剂量的三叶青保护损伤肝的作用优于低

10、 剂量三叶青，提示三叶青的护肝作用在一定范围内呈剂量依赖关系。 并且可能反映：三叶青的有效黄酮类化合物的抗过氧化能力存在量效 关系。通过CCI4所致的大鼠肝损伤模型，我们初步研究了三叶青水煎液对 大鼠肝损伤的保护作用。结果表明，该水煎液能明显降低CCI4所致血清ALT AST及 ALP的升高，同时能对抗CCI4所致的肝脂质过氧化 作用，提高肝损伤大鼠抗氧化能力。研究结果提示，三叶青水煎液能 提高肝脏的解毒能力，对肝损伤有一定的保护作用；但三叶青作为民 间常用的护肝中药，对该药的研究远不如其他护肝中药，其护肝作用 的药理机制还有待于进一步深入研究。参考文献：1 李瑛琦，陆文超，于治国.三叶青的化

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