毕业设计(论文) 栖霞区犬细小病毒病的流行病学调查

1、 毕 业 设 计（论 文） 题 目： 栖霞区犬细小病毒病的流行病学调查 目 录摘 要3Abstract.41.犬细小病毒病的综述51.1犬细小病毒的病原学51.2犬细小病毒病的流行病学 51.3犬细小病毒病的诊断61.4 犬细小病毒病的防治62.南京市栖霞区犬细小病毒病流行情况调查82.1材料与方法82.2结果与分析82.3讨论与小结11参考文献13 摘 要 犬细小病毒病的流行病学调查摘 要为了解犬细小病毒发病率、死亡率与犬的年龄、品种与性别、免疫接种、季节之间的关系，在2010年3月至2011年2月收治98例临床犬细小病毒病例，根据南京栖霞区的犬细小病毒的流行病学可以看出，6月龄以内的犬发病

2、率、死亡率高，未免疫或者免疫失败的发病率、死亡率高，在其秋冬季应当加重预防。综合本次调查，提出了本地区预防本病的一些建议。关键词： 犬细小病毒； 流行病学； 预防金陵科技学院学士学位论文 Abstract Epidemiological investigation of Canine ParvovirusAbstract In order to understand canine parvovirus morbidity, mortality and dog breed, age and gender, immunization vaccination, the relationship be

3、tween seasons ,in March 2010 to February 2011 treated 98 cases clinical canine parvovirus cases, according to the nanjing qixia epidemiology of canine parvovirus within 6 months can be seen, the dog morbidity, mortality is high, not immune or immune failed morbidity, mortality is high, in autumn and

4、 winter season should aggravate prevention. Comprehensive this investigation, puts forward the region, some Suggestions to prevent disease.Key words: CPV infection ;epidemiology; prevent 金陵科技学院学士学位论文 第一章 犬细小病毒病的综述 1 犬细小病毒病的综述1.1 犬细小病毒的病原学CPV为线状负链单股DNA病毒，在分类地位上属于细小病毒科细小病毒属，与猫泛白细胞减少症病与猫泛白细胞减少症病（Feline

5、 panleukopenia Virus, FPV），貂肠炎病毒（Mink enteritis Virus,MEV）,洗熊细小病毒（Raccoon parvorirus,RPV）,和蓝狐细小病毒（Blue fox parvovirus,BFPV）同属猫细小病毒亚群1。犬细小病毒是一种无包膜的线性DNA 病毒, 病毒进入细胞的方式和大多数无包膜病毒一样可能是通过网格蛋白介导的细胞内吞来完成的 2, 3 。CPV 颗粒进入细胞后被运送到细胞质和核周质的运输小体,而且在病毒进入后几小时内衣壳蛋白大部分保持完整 4。CPV感染能够用氯化铵或氯奎阻断说明体内的酸化可能是病毒感染所必须的。然而病毒衣壳蛋白

6、则不直接被酸性环境影响。病毒和其受体进入细胞是通过动力蛋白调节的内吞作用已经得到证明 5。衣壳进入细胞是通过网格蛋白介导的内吞途径, 然后与转铁蛋白共同定位于核周质的内体, 随后缓慢离开内体进入细胞质, 接着进入细胞核。病毒粒子到达位于细胞核周质的小体中后通过核孔进入细胞核释放基因组进行复制和组装。CPV在细胞核复制, 脱衣壳过程和DNA释放均发生在细胞核, 而且进入细胞核的衣壳蛋白也参与了病毒基因表达的起始 6 。犬细小病毒病是犬的一种具有高度接触性的烈性传染病。临床症状以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为特征7。犬细小病毒2 型( Canine parvovirus2,CPV2) 是引起该病

7、的病原微生物, 属细小病毒科细小病毒亚科细小病毒属自主复制的单链DNA病毒 8。细小病毒(包括CPV 和FPV) 由于基因组为单链DNA, 缺乏双链转录模板, 病毒必须等待宿主细胞进入S期才能转录和合成病毒蛋白, 因此只在生长细胞的细胞复制S期复制, 体内的靶器官是那些有一定生活力的单细胞 6。1.2 犬细小病毒病的流行病学犬细小病毒病主要是指由2 型犬细小病毒（Canine parvovirus 2，CPV2）引起的一种高度接触性、烈性传染病，严重威胁宠物健康，且时常给我国犬养殖业造成重大经济损失。该病毒最早是在1977年由美国学者Eugster 和Nairn 从患出血性肠炎的病犬粪便中首先

8、观察到， 随后在1978 年由澳大利亚的Kelly 和加拿大的Thomson 等首次从患肠炎的病犬中分离到。此后，在许多国家和地区的犬科动物中相继被发现。1982 年，梁士哲等9最早报道了类似CPV2 所致的犬出血性肠炎。1983 年，徐汉坤等10正式报道了本病的流行。1986 年后CPV-2a 在我国各个地区流行，然而CPV-2b 主要在我国南部地区流行。目前，我国还未见关于CPV-2c（a）和CPV-2c（b）的报道11。该病临床上以急性出血性肠炎、泛白细胞减少与心肌炎为主要特征，潜伏期为714 d，多数病犬呈肠炎综合征，少数呈心肌炎综合征，且心肌炎病犬多以46 周龄幼犬为主12。根据既往

9、的统计数据表明，该病发病率和死亡率的变动范围都很大，前者为50100，后者为05013，14。6 月龄以下的病犬占发病犬总数的8571，说明该病主要发生于幼龄犬，且以36 月龄发病率最高。612 月龄的病犬占发病犬总数的1224。而12 月龄以上的病犬发病很少，仅占发病犬总数的204，说明成年犬对本病有一定的抵抗力。8 周龄以内幼犬的死亡率高达70，1 岁犬也达30。912 周龄的幼犬，若发病后能耐过5 d，常可逐渐康复15。本病一年四季均可发生, 以每年的冬、春季节发病率最高。是一种急性、致死性传染病，暂无特效疗法，病死率高达10%50%16。犬是本病的自然宿主, 各种年龄的犬和不同性别的犬

10、均易感染。纯种犬及24 月龄幼犬易感性最强，病死率也最高17。3 4周龄犬感染后呈急性致死性心肌炎的最多, 8 10周龄则以肠炎为主。本病主要由直接和间接接触而传染。感染犬和康复犬, 带毒犬是传染源, 病犬从粪便尿液和呕吐物中排毒, 而康复犬可能从粪尿中长期排毒, 污染饲料, 饮水, 垫草, 食具和周围环境, 一般认为传染途径主要是消化道。同时当天气寒冷、温骤变、拥挤、卫生水平差、和并发感染, 可加重病情和增加病死率18。此外，皮下、肌肉或静脉接种19等方式也可引起此病发生，对养犬业造成极大的危害。1.3 犬细小病毒病的诊断 犬细小病毒病的特征症状是呕吐、拉稀、拉番茄汁样的血便，白细胞数目减少

11、。体温在4041，本病不分年龄，均可感染，主要是幼犬。潜伏期714天，无明显的季节性 20。 用韩国ANIGEN 进口犬细小病毒抗原快速检测试纸（Anigen Rapid CPV Ag Test Kit）具体方法：用棉签探入犬肛门，采集粪便少许。将棉签浸入到装有1mL 反应缓冲液的样品管。将棉签上的样品和反应缓冲液充分混匀。取出试纸，将其平放于宽敞干燥的表面。使用滴管，吸取样品混合液，向样品孔中滴入4 滴混合液。读取结果，此结果在510min内有效。若在结果窗中只出现1 条带说明呈阴性，在结果窗中出现2 条带（“T”和“C”），无论哪条先出现都表示呈阳性，反应开始后红色条带看不见视为无效21。

12、CR 诊断试剂盒 刘忠华等22通过在CPV的基因组中设计的特异性寡核苷酸引物，利用PCR 技术首次研制犬细小病毒的PCR 诊断试剂盒。在特定的反应条件下，使用该试剂盒能特异地扩增含有犬细小病毒的样品，且能检出痕量(10ng)的犬细小病毒DNA。被测粪样只需进行简单煮沸就能进行PCR 反应。该试剂盒能在常温下保存1 周以上、4保存1 年以上。用该试剂盒对109份样品进行检测，显示出较高的特异性和灵敏度，适合于对早期感染细小病毒的宠物犬进行诊断，有助于及时确定医疗方案23。1.4 犬细小病毒病的防治1.41 免疫效果叶俊华24等通过对国产CPV 弱毒疫苗和从美国引进的CPV 弱毒苗“Parvoid

13、”(系号:25053A) 的对比实验(包括疫苗安全性试验,排毒与同居感染试验及较大范围的田间临床实际应用观察) ,说明国产CPV 弱毒苗安全可靠,其效果优于美国引进的CPV弱毒苗。在疫苗接种对照试验中,所有试验犬(30头) 注射德国产CPV 弱毒苗后,其血凝抑制抗体滴度均由阴性(1 8 以下) 上升达l 128 以上,试验犬均能抵抗自然强毒感染,但在犬已潜伏感染CPV 强毒时接种本疫苗则无治疗作用。用国产CPV 弱毒苗共免疫1 076 头犬,结果有效1 067 头,保护率达99. 12 %(发病9 头犬中有6 头是注苗前已有CPV感染症状而紧急注苗的) 。1990 年,徐汉坤25等以分离自南京

14、病犬的犬细小病毒CPV2GN1毒株,研制成细小病毒细胞培养灭活疫苗用于免疫试验,发现CPV2GN1灭活苗免疫后无不良反应和排毒现象,安全可靠。Pollock 等研究指出,血清HI 效价超过1 80 的犬即可抵抗CPV 感染。在攻毒试验中发现,CPV2GN1 灭活苗一次免疫后,HI 效价在1 40 以上,二次免疫后多在1 80 以上,口服攻击强毒后均无临床症状和排毒现象。20周后,免疫犬抗体水平仍在l 80 以上。CPV2GN1 灭活苗在临床应用时应间隔两周进行重复注苗。Edsall S26 认为,灭活CPV 对强毒感染能产生保护力,但不能阻止感染犬从粪便中排毒。因此,这种感染和传播是无法预防的

15、,而CPV 则无论经何途径都可引起肠道感染,并产生全身及局部的保护性免疫应答。 免疫程序免疫预防要取得满意效果,平时就必须严格执行兽医卫生防疫措施,坚持进行免疫注射,但免疫的程序与时机等因素都会影响幼犬的免疫效果27 。CPV 感染的最低抗体保护值为1 80 。对无母源抗体或不知母源抗体水平的或抗体水平很低的仔犬建议用以下免疫程序:首免5 周龄,二免8 周龄9 周龄,三免12 周龄13 周龄,四免15 周龄16 周龄;对母源抗体较高的仔犬免疫程序:首免断奶时,二免12 周龄13 周龄,三免15 周龄16 周龄,以后每年免疫1 次。对成年犬首次免疫共注射2 次,每次间隔3 周4 周,以后每年加强

16、免疫1 次。母犬可在产前3 周4 周免疫接种。以产仔前1 个月用灭活苗对母犬免疫,所生仔犬60 日龄首免,75 日龄加强免疫,以后间隔6 个月免疫1 次效果最佳,该程序对犬的保护率为100 % 28 。对有可能处于潜伏期的动物,须先注射高免血清观察1 周2 周无异常时,再按免疫程序免疫。金陵科技学院学士学位论文 第二章 南京市栖霞区犬细小病毒病流行情况调查 2.南京市栖霞区犬细小病毒病流行情况调查犬是本病主要的自然宿主，其他犬科动物，如丛林犬、郊狼和食蟹狐等也可感染，各种年龄和不同性别的犬都有易感性，但幼犬的易感性更高。成年犬一般只出现感染后的免疫反应，常不可见临床症状。本病主要由直接或间接接

17、触而传染。感染犬和康复带毒犬是传染源。病犬从粪便、尿液、唾液和呕吐物中排毒；而康复犬可能从粪尿中长期排毒，污染饲料、饮水、垫草、食具和周围环境，一般认为传染途径主要是消化道15。通过对98例感染犬细小病毒的犬进行详细的统计，发现犬细小病毒感染与年龄、季节、品种性别以及免疫情况有着密切关系。2.1 材料与方法 材料1.调查对象 2010年3月至2011年2月，对南京市祥和宠物医院进行关于犬细小病毒病的流行病学调查。在这期间共调查了368病犬，患有犬细小病毒的有98例。2.诊断试剂 CPV 检测试剂盒, 韩国BIOINDIST 产品。3.血常规检测仪 方法 采用查阅病例档案、访问兽医和犬饲养人员、

18、现场调查实地操作、统计数据进行分析等方法。1.临床诊断 采用问诊、视诊、触诊、听诊等方法对病犬进行整体及一般检查，系统检查的重点是消化系统。2.CPV 检测试剂盒 用棉签取犬粪便少许, 加入缓冲液中混匀, 静置5 min 后取上清液向试剂盒加样孔中滴入2 3 滴,水平放置15 min 后观察结果。当C 区和T 区均出现紫红色线者判为阳性。3.血常规检测仪 静脉抽血，放入血液测试仪进行检测血液与正常范围相对比，白细胞数目降低结合临床症状、CPV检测试剂结果则可确诊为犬细小病毒。.调查内容 发病犬的品种性别、年龄、季节和免疫情况2.2 结果与分析犬细小病毒的发病与日龄的关系 从表1中可以看出，30

19、日龄至180日龄即6月龄的犬发病率相对较高。因为有母源抗体的保护，所以30日龄以下犬发病率低甚至没有。但是随着年龄的增长，在60日龄后，母源抗体水平低下甚至消失，加之幼犬机体稚嫩，免疫器官发育不健全特异性和非特异性免疫功能不完全，又遇断奶、饲养环境改变等诸多应激因素，所以发病率比较高。从6月龄之后，发病率逐渐下降，说明随着年龄的增长，犬的免疫系统开始完善，感染率呈下降的趋势。表1 犬细小病毒的发病与日龄的关系年龄（D）发病只数发病率（%）死亡只数死亡率（%）治愈只数治愈率（%）占全部收治病犬比率（%）3090（3个月）4647%817%3830%7%91180（3个月6个月）2627%312%

20、2315%4%181270（6个月9个月）88%00%88%1%271360（9个月1岁）99%10%89%1%361720（1岁2岁）66%00%66%1%721以上（2岁以上）33%00%33%0%2.2.2犬细小病毒的发病与季节的关系从统计表2中可以看出，秋冬季发病率高，占全年发细小病犬的69%。但是在冬夏季死亡率比较高，由于气温的骤变使抗病能力减弱。表2 犬细小病毒的发病与季节的关系季节发病只数发病率（%）死亡只数死亡率（%）占全部收治病犬比率（%）春（3、4、5）1717%00%3%夏（6、7、8）1414%17%2%秋（9、10、11）3334%13%5%冬（12、1、2）3435

21、%1029%5%2.2.3犬细小病毒的发病与品种和性别的关系在98例犬细小病毒感染犬的品种上看，有金毛、狼犬、杂种犬等品种发病率高,总的来说涵盖了南京宠物犬的大多数犬种，因此从表3（1）中说明犬细小病毒感染几乎任何品种的犬都有发病的几率，不分品种的。但是从表中还可以得出贵宾、藏獒、苏牧的死亡率比较高。根据主诉，我们可推测杂种犬是由于未接种疫苗或者免疫情况不知，饲养管理随意导致发病率高；仅有一只贵宾发病并且死亡的原因是免疫接种尚未完成；藏獒，苏牧都是病犬已患病到后期，治疗期间出现抽搐，发现不及时，是心肌炎综合症所致治疗无效。从性别上看，公犬和母犬均可感染，但是母犬的感染力稍高些，死亡率也偏高。见

22、表3（2）.表3（1） 犬细小病毒发病与品种的关系品种发病只数发病率（%）死亡只数死亡率（%）占总收治犬比率（%）杂种犬1313%18%2%金毛1010%110%2%狼犬1010%00%2%萨摩耶99%111%1%博美88%00%1%泰迪77%00%1%藏獒44%375%1%苏牧33%267%0%哈士奇33%133%0%吉娃娃33%133%0%鹿犬22%00%0%八哥22%00%0%边牧22%150%0%可卡22%00%0%黑贝22%00%0%阿拉22%00%0%比熊22%00%0%京巴22%00%0%贵宾11%1100%0%松狮犬11%00%0%马尔济斯11%00%0%圣伯纳11%00%0%

23、古牧11%00%0%斗牛犬11%00%0%喜乐蒂11%00%0%沙皮11%00%0%罗威纳11%00%0%德牧11%00%0%斑点犬11%00%0%史密格11%00%0% 表3（2） 犬细小病毒发病与性别的关系性别发病只数发病率（%）死亡只数死亡率（%）占总收治犬比率（%）母犬5253%815%8%公犬4647%49%7%2.2.4犬细小病毒的发病与免疫情况的关系； 患犬中未免疫犬的感染率高于已免疫的，表明合理防疫有效降低其发病率，因为在未合理防疫的情况下，抵抗力低下且极易感染犬细小病毒的犬很快脱水衰竭死亡，但有一例4月龄左右的犬经过三次防疫仍发病的情况，可能为免疫失败，其原因是CPV-2 出

24、现了抗原性漂移。这说明，及时预防接种犬细小病毒疫苗是控制本病流行的唯一途径。此外，科学的日常护理、尽是减少幼犬相互接触也是减少本病发生的关键之一。 2.3 讨论与小结对2010年3月至2011年2月期间南京祥和宠物医院的病例统计分析结果表明，本地区犬细小病毒病的流行现状如下:从表1可见，发病年龄分布仍然以6月龄以下幼犬为主，占74%，但是随着今年来南京地区的宠物犬的高龄化，中高龄犬的发病率也有所增加。从表2可看出，在南京栖霞区犬细小的发病没有明显的季节性，文献报道主要在冬季，但是本次调查多在秋冬季发病相对较高，冬季死亡率高。笔者认为，这种与文献报道的差异在于南京的气候，春秋季时间较短，夏冬季时

25、间长，这样从夏季过渡到冬季相对比较快，温差较大，易对动物产生应激，机体抵抗力下降，成为本病的诱因。本调查还涉及到发病性别品种分布的差异，患病公犬为47 %， 母犬为53%，此结果表明雌犬对犬细小病毒的易感性稍高于雄犬。在品种上没有明显的差异。从免疫情况来看，未免疫的或者免疫不全的犬发病高于免疫的，特别是6月龄以下的幼犬正值宠物犬的交易年龄，犬的销售商为盈利，常不给犬做预防接种，而犬主缺乏饲养和防病经验，辨别犬的健康能力差，由于饲喂不当等诱导本病的发生。综上所述，笔者认为预防本病的关键在于正确的免疫程序，合格的疫苗和科学的饲养。应加强养犬防病的知识宣传，从而使犬主自身素质不断提高。 血常规检查结

26、果对98只发病2-5天的犬进行血常规检查结果如下，白细胞总数可降至400-5500个/ mm3，嗜中性白细胞减少，淋巴细胞相对增多，红细胞减至480 万个/mm3 以下，严重的不足100 万个/ mm3，血红蛋白降至7.5g/100ml以下，严重的仅有2-3g/100ml。血细胞总数呈下降趋势，符合犬细小病毒病的发病特点。本调查采用的是韩国产犬细小病毒胶体金抗原检测试剂盒, 临床使用的优点是比较方便、快速, 但该方法是用已知的抗体检测未知的抗原, 不能区别自然感染动物和疫苗免疫动物。因此, 笔者认为本检测结果对于注射过相关疫苗的犬只能作为参考依据, 最后确诊还需结合临床症状、血像等变化综合判定

27、。根据犬细小病毒病的流行病学调查情况，对犬的细小病毒病的防治提出以下体会以供参考。（一）免疫接种犬细小病毒的主要传染源是犬的粪便、呕吐物、唾液等，应尽快进行治疗。成年犬和青年犬注射过犬六联疫苗症状较幼犬轻微, 发病的幼犬和未注射疫苗的, 自身免疫不足,受到感染后突然发病, 死亡快, 难救治。因此本病应注意平时的预防接种工作。 （二）加强护理 治疗期间应禁食禁水，对其排泄物要严格消毒，注意对病犬保暖。康复期应停喂牛奶、鸡蛋、肉类等高蛋白、高脂肪性饲料，给予易消化的饲料，以减轻胃肠负担，提高治愈率。对病犬的用具，犬舍，场地等进行严格的消毒以防感染其他健康犬。（三）养犬过程中应注意的细节从病犬主人口

28、诉，总结出造成犬患细小病毒的几个细节方面如下：（1）提早出去遛狗,未打完所有免疫之前不要外出（2）喂大量的肉食(3) 免疫失败 病痊愈后15-20天后重新免疫。 给犬免疫时应到正规的医院，有免疫发票，发有健康证。（4）将食物仍在地上喂狗（5）遛狗时没有好的习惯 小狗乱闻、挖坑吃土之类综上所述，关于犬细小病毒的诊治预防还需要各方面的积极努力配合，以降低本地区该病的发病率及死亡率。 金陵科技学院学士学位论文 参 考 文 献 参 考 文 献 参 考 文 献1易立, 程世鹏. 犬细小病毒分子生物学研究进展J .特产研究, 2008 (1) :71273.2Parker J S, Parrish C R

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