药物分析09第九篇维生素类药物分析

1、 维生素是维持人体机体正常代谢功能所必需的一类维生素是维持人体机体正常代谢功能所必需的一类活性物质。活性物质。 R=H Vit A 醇R=CCH3OVA 醋酸酯R=CC15H31OVA 棕榈酸酯CH3CH3CH3CH3CH2ORCH3912345678共轭多烯醇侧链环己烯CH2ORCH3CH3CH3CH3CH3环己烯环己烯共轭多共轭多烯侧链烯侧链多异构体多异构体UV易被氧化易被氧化结构分析结构分析性质性质溶解性溶解性 易溶于三氯甲烷、乙醚等，微溶于乙醇，不溶水；不稳定性不稳定性 不饱和键，易氧化；紫外吸收特性紫外吸收特性 325328nm最大吸收；与三氯化锑呈色与三氯化锑呈色 三氯化锑反应三氯

2、化锑反应 ChP（2000） 溶剂溶剂 无水无醇氯仿无水无醇氯仿 3SbClVitACHCl3蓝色蓝色紫红色紫红色 含量测定含量测定Vit A含量表示 I.U.(international Unit) 国际单位 效价效价(I.U./g) 按WHO规定 VA acetate VA alcohol 效价效价(I.U./g) 2.907106 3.33106 1g pure VA acetate 2.907106 I.U. Emax%1cm1/g).U.(I效价换算因数 1900)(/g.U. I%1cm1)(VA测酯E1830)(/g.U. I%1cm1)(VA测醇E紫外分光度法（三点校正法）p在

3、三个波长处分别测定吸收度，根据校正公在三个波长处分别测定吸收度，根据校正公式计算吸收度式计算吸收度A校正值后，再计算含量。校正值后，再计算含量。p测定原理测定原理 杂质的吸收在杂质的吸收在310340nm波长范围内呈一条直线波长范围内呈一条直线 物质对光的吸收具有加和性物质对光的吸收具有加和性A213nmVit A samplepure VA acetateimpurities第一法 测定VA acetate 环己烷为溶剂 如果max为326329nm;测)(nm328AA-规定值0.02则不需要校正 如果max为326329nm;测)(nm328AA-规定值0.02则需校正第二法 测定维生素

4、测定维生素A醇醇第一法未通过第一法未通过，包括：max不在326329nm，必须经皂化： 蒸去醚水解OH-酯 乙醚提取VA醇，洗涤，过滤 溶于异丙醇Vit A UV法校正公式 第一法第一法 A328(校正)=3.25(2A328- A316 -A340)A213nmA213nmVit A samplepure VA acetateimpurities第二法第二法 A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334 Vit B1)NNNH2CH3CH2NSCH2CH2OHCH3Cl-HCl氨基嘧啶环氨基嘧啶环CH2噻唑环噻唑环(季铵碱季铵碱)NNH3CNH2NSCH3C

5、H2CH2OH+ Cl HCl- UV氨基嘧啶环氨基嘧啶环噻唑环噻唑环结构分析结构分析NNH3CNH2NSCH3CH2CH2OH+ Cl HCl- 还原性还原性碱性碱性与酸成盐与酸成盐与生物碱与生物碱非水碱量法非水碱量法结构分析结构分析荧光消失荧光消失硫硫色色素素铁铁氰氰化化钾钾维维生生素素 OH1B正丁醇正丁醇蓝色荧光蓝色荧光H+OH- 硫色素反应硫色素反应 ChP（2000）p 鉴别试验鉴别试验 OHNHAgNO233AgCl白白3HNO3HNO蓝蓝淀粉试纸淀粉试纸 KI2MnOCl2 H生成沉淀反应生成沉淀反应分子结构中含有杂环，易与生物碱沉淀剂分子结构中含有杂环，易与生物碱沉淀剂( (

6、碘化铋钾、碘化汞钾、苦酮酸等碘化铋钾、碘化汞钾、苦酮酸等) )，硅钨酸等，硅钨酸等 作用形成组成恒定的沉淀作用形成组成恒定的沉淀维生素维生素B1在碱性加热条件下反应放出在碱性加热条件下反应放出H2S,与与Pb(Ac)2试液形成黑色试液形成黑色PbS 含量测定含量测定 Assayp 紫外分光度法紫外分光度法p 非水溶液滴定法非水溶液滴定法p 硫色素荧光法硫色素荧光法 Vit C)OHOOHOCCH2OHHOH612345OOHHOO C OHHCH2OH123456维生素维生素C结构性质结构性质二烯醇二烯醇强还原性强还原性弱酸性弱酸性OOHHOO C OHHCH2OH123456手性手性CUV己

7、糖结构己糖结构去去氢氢抗抗坏坏血血酸酸OVitC强还原性强还原性2,6-二氯靛酚二氯靛酚褪色褪色玫瑰红玫瑰红OCu2碱碱性性酒酒石石酸酸铜铜红红3AgNOAg黑黑含量测定含量测定碘量法碘量法2,6-二氯靛酚法二氯靛酚法NaHSO3RCH(CH3)ORCH(CH3)OHSO3Na 白色溶于水ONOHClCl玫瑰红有氧化性OHClClNHOH无色还原型酚亚胺Vit CH+去氢Vit C Vit E)R1R2OCH3( )CH3OCH3( )CH3(CH2)3COCH3C(CH2)3HHC(CH2)3HHCHCH3CH3Vit E (dl-Tocopheryl Acetate)OCH3CH3R2OR

8、1CH3CH3CH3CH3COCH3OCH3CH3R2OHR1CH3CH3CH3CH3生育酚生育酚乙酰化乙酰化酚羟基酚羟基维生素维生素E强还原性强还原性OCH3CH3R2OR1CH3CH3CH3CH3COCH3天然品天然品 右旋体右旋体生物效价生物效价右旋体右旋体:消旋体消旋体 = 1.4 : 10合成品合成品 消旋体消旋体手性手性C*OCH3CH3R2OR1CH3CH3CH3CH3COCH3名名 称称R1R2生物活性生物活性-生育酚生育酚-生育酚生育酚-生育酚生育酚-生育酚生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1一、鉴别试验一、鉴别试验 1. 硝酸反应硝酸反应生生育育红

9、红生生育育酚酚 OHNO3VitE橙红色橙红色2. 三氯化铁联吡啶反应三氯化铁联吡啶反应生育酚生育酚KOHVitE生育醌生育醌 + Fe2+联吡啶联吡啶Fe3+二、生育酚的检查二、生育酚的检查 硫酸铈滴定液（硫酸铈滴定液（0.01mol/L）生育酚生育酚 + 2Ce4+ 2Ce3+ + 对生育醌对生育醌原理原理二苯胺（亮黄二苯胺（亮黄灰紫）灰紫）（反应摩尔比（反应摩尔比1 : 2）OCH3CH3CH3CH3COOCH3C16H33OCH3CH3CH3HOCH3C16H33无水乙醇H2SO4回流CH3CH3CH3OOC16H33CH3OH+2Ce3+2Ce4+p 含量测定含量测定 气相色谱法气相色谱法