抗 HIV假阳性1例并文献复习

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减抗-HIV假阳性1例并文献复习（作者：单位：邮编：）【关键词】艾滋病；阳性抗-HIV假阳性常见于风湿性疾病等，但发生于胸椎结核者少见。患 者无任何HIV感染的症状及体征，仅在术前检查或输血前检查筛选时 检出。笔者在工作中遇见1例，现报告如下。1病历摘要患者，男，14岁，因反复背部疼痛、体重下降1+年，脊柱后突畸形 1+个月就诊。患者既往体健，无冶游史、手术史及输血史。胸椎CR片提示：胸椎于第八胸椎处成角，T8椎体明显变扁，该处软组织可 见肿胀，余胸T8椎体改变考虑为T8结核？椎体嗜酸性肉芽肿？血沉 35mm/1 h。TB-Ab阳性。彩超提示：左颈部皮下低回声

2、团。抗结核治 疗4周后拟行“前路T8椎体病灶清除+椎间植骨融合+钢板固定术”， 术前我院筛检发现HIV阳性，送县医院复检阳性。嘱患者回家休养， 等待结果。1个月后省疾控中心复检结果发现 HIV阴性。再次通知患 者行病灶清除+ 椎间植骨融合+钢板固定术。术后患者恢复良好，症状 明显改善。T7手术所见:T8胸椎旁见“豆腐渣样”坏死物，椎体压缩呈楔形, 下缘、T8椎体、T9上缘骨质疏松，椎间盘变性。2讨论1982年9月，美国疾病控制中心(CDC正式提出了获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)的概念，随后的调查研究证明这是一种新的传染病。

3、1983年，法国巴斯德研究所的Mon tag nier等首先从1例淋巴瘤患者的淋巴结中分离出一种 病毒，被称为淋巴结病相关病毒(lymphade nopathy associatedvirus,LAV),1984年初，美国国立卫生研究院国立癌症研究所的Gallo等从艾滋病患者的外周血单核细胞(PBMC中分离到称为人嗜T淋巴细胞病毒皿型(human T-cell lymphotropic virus type皿，HTLV-皿)的病毒。同年，美国加州大学的Levy等也从艾滋病患者的 外周血淋巴细胞中分离出一种病毒，称艾滋病相关病毒(AIDSrelated virus,ARV )。1986年，国际病

4、毒分类委员会(InternationalCommittee on Taxonomy of Viruses,ICTV)将 LAV/HTLV-皿 /ARV统一命名为人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV )， 又称艾滋病毒。由HIV感染而引起的疾病称为艾滋病，全称为获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)，该病患者的免疫功能部分或完全丧失，CD4鈿胞数目减少，继而发生机会性感染、 肿瘤等，临床表现多种多样。该病传播速度快、病死率高，且目前无 法治愈。HIV在病毒分类学上属逆转录病毒科( retr

5、oviridae )慢病毒属（lentivirus ）,目前已发现两种HIV，分别为HIV-1和HIV-2。两者 具有相似的病毒结构和传播途径。HIV-2主要分布于非洲西部，在欧 洲和美洲的一些感染者中也被检测到。其毒力和传播力都低于HIV-1， 引起的艾滋病病程较慢且较缓和。HIV-1广泛分布于世界各地，是引 起全世界AIDS流行的病原，目前HIV的研究也是以HIV-1为主进行 的。HIV的流行呈世界性分布，非洲为 HIV的发源地和重灾区，欧洲和 美洲也为主要流行区，近年HIV在亚洲的流行呈高速增长的趋势。 我 国自1985年首次发现HIV感染者，至今已有6080万人发生了感染， 专家估计，

6、如果不迅速采取有效的预防措施，按目前的年平均30%勺增长速度，到2010年，我国的HIV感染者将超过1 000万。在非洲 的有些国家，HIV的感染率达总人口 30%以上。因此，预防和治疗艾 滋病，已不仅仅是挽救个人生命的问题，而是关系到民族存亡的大事:16。2.1 HIV 检测的特殊性HIV检测不同于其他病原微生物检测，要求 十分严格，任何错误的诊断，包括假阳性或假阴性，都会对被检者产 生十分重要的影响。因此，HIV检测必须严格按照国家制定的艾滋 病检测工作管理办法和艾滋病检测技术规范（以下简称规范） 进行，检测的实验室须经当地卫生行政部门审批合格，从事艾滋病检测工作的技术人员须接受专门的技术

7、培训，并获合格证书，诊断试剂应选择高敏感和高特异的，筛查呈阳性反应的需用特异性更强的方法（如：免疫印迹试验）进行确认，整个实验过程应有严格的质量保证体系。2.2 HIV抗体检测 目前国外用于HIV抗体筛查的方法很多，根据检 测原理不同分为酶联免疫吸附法、凝集法和层析法，可对血液、唾液 和尿液标本进行常规或快速检测。在实际工作中常用的有酶联免疫吸 附试验（ELISA）、明胶凝集试验和各种快速诊断试剂。自1985年第一代ELISA试剂问世以来，随着医学技术的飞速发展，包被抗原已从 一代的全病毒裂解物发展为目前以基因重组和多肽抗原包被和标记、 有着良好敏感性和特异性的三代双抗原夹心试剂，检测亚型包括

8、 HIV-1、HIV-2和HIV-1型的0亚型，窗口期由10周缩短至34周。 为避免窗口期传染，荷兰、法国等国已研制出第四代以重组的多肽抗 原和抗P24抗体包被的双抗原夹心法试剂盒，可同时检测抗原抗体， 使窗口期缩短了 23周，但其临床价值有待评估。按规范要求， 我国采供血机构进行血液筛查和各医疗卫生机构常规筛查检测宜采 用ELISA法，自采自供血的单位必须进行 HIV抗体检测，在尚未建立 艾滋病筛查实验室的偏远地区或大医院急诊手术前，可由经过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进行血液筛选。对用ELISA试剂或快速诊断试剂进行的筛查实验如呈阴性反应，即报告HIV抗体阴性；对呈阳性反应的标本，

9、筛查实验室应用原有试剂和另外一种不同原理 或不同厂家的试剂进行重复检测，如两种试剂复测均呈阴性反应，则 报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认 实验室进行确认。筛查试剂必须是HIV-1/2混合型、经国家药品监督 管理局（SDA注册批准、批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。HIV抗体筛查呈阳性反应的标本由于存在假阳性的可能，必须做确 认试验。国际上有3种确认试验方法，包括免疫印迹试验、条带免疫 试验及免疫荧光试验，目前以免疫印迹试验最为常用。确认试剂必须 经SDA注册批准。免疫印迹试剂有 HIV-1/2混合型和单一型，按规 范要求，一般先用HIV-1/2混合型试

10、剂进行检测，根据规范中 判定免疫印迹试验结果的基本原则并参照所用试剂说明书综合判定， 无HIV抗体特异带出现的报告HIV抗体阴性；出现HIV抗体特异带， 符合HIV-1抗体阳性判定标准，则报告HIV-1抗体阳性。如出现HIV-2 型的特异性条带，需用HIV-2型免疫印迹试剂再做单一的HIV-2型抗 体确认试验，呈阴性反应，报告HIV-2抗体阴性；呈阳性反应的则报 告HIV-2抗体血清学阳性，如需鉴别应进行核酸序列分析。如果出现 HIV抗体特异带，但带型不足以判定为阳性，则判为HIV抗体不确定。 对HIV抗体不确定者应按规范要求进行随访，必要时可做HIV-1P24 抗原或核酸测定，但检测结果只能

11、作为辅助诊断依据， 确认报告要依 据血清学随访结果。由于目前唾液检测试剂的敏感性和尿液检测试剂的特异性明显低于 血液检测试剂，故我国SDA已注册批准的HIV抗体筛查和确认试剂只 能用于血液标本检测7，8。2.3 HIV抗体检测的质量控制 在所有实验中必须包含有内部对照质 控血清和外部对照质控血清。内部对照质控血清指示剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质量控制的基础，每次检测必须使用内部对照，而且只能在同批 号的试剂盒中使用。夕卜部对照质控血清是由实验室设置的弱阳性对照，一般以该试剂盒 临界值（Cutoff ）的23倍为宜。该血清可到专门单位购买，也可由 实验室自己制备。制备方法是：收集

12、HIV抗体阳性和阴性血清，56 C 30 min灭活，3000转/min离心15 min，弱阳性对照可以用 HIV抗体 阴性的健康人血清梯度稀释 HIV抗体强阳性血清，或用试剂盒内提供 的阳性和阴性对照血清混合并标定后得到，一般按1年使用量配制，用0.2卩m滤膜过滤除菌，按一周实验用量分装、分类、标记并封口， -20 C冻存。该血清不可反复冻融，融化后应存放2 C8 C， 1周内使用。原则上每次实验必须使用外部对照质控血清，以便监控本次实验的重复性和稳定性，同时了解各批试剂盒的批间差异，绘制质量 控制图9-12 。2.4 HIV-1P24抗原检测HIV感染人体后有一段窗口期，在这段时期病毒抗体

13、不能被检出，但可以检测到病毒相关抗原或分离病 毒。故在窗口期检测抗原是早期辅助诊断和缩短窗口期的一种方法， 在感染早期和发病期抗原检出率相对较高。HIV-1P24抗原检测还适用于：HIV-1阳性母亲所生婴儿的早期辅助鉴别诊断；第四代 HIV-1 抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应、但 HIV-1抗体确认阴性者的 辅助诊断；监测病程进展和抗病毒治疗效果。P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂，必须经过 SDA批准注册HIV-1P24抗原的阳性结果必须经过中和试验确认 ，该结果仅作为 HIV感染的辅助诊断依据，不能据此确诊；HIV-1P24抗原检测阴性只 表示在本试验中无反应，不能排除

14、 HIV感染13-15 。2.5 HIV 核酸检测HIV核酸检测，通常是检测 HIV RNA以前只能 定性检测血液中是否存在病毒核酸，而目前的技术可定量检测血液中 病毒复制水平。HIV核酸定性检测可用于HIV感染的辅助诊断，如窗 口期辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程 等。通常使用PCF或 RT-PCF技术，使用分子生物学实验室通用的扩 增试剂，引物可来自文献或自行设计，应尽量覆盖所有或常见的毒株， 也可使用复合引物。HIV核酸定量检测多用于监测 HIV感染者的病程 进展和抗病毒治疗效果，目前常用的测定方法有逆转录PCR实验(RT-PC) 核酸序列扩增实验(NASBA、分

15、支DNA杂交实验(bDNA 等。在不同HIV定量检测方法的选择中，由于目前用于统一不同定量 方法检测值的标准品尚未问世，因此不同定量方法结果之间还无法直 接进行比较，建议同一病人治疗前后用同一方法进行HIV定量检测。值得注意的是，HIV核酸定性检测阴性，只可报告本次实验结果阴 性，但不能排除HIV感染；HIV核酸检测阳性，可作为诊断 HIV感染 的辅助指标，不能单独用于HIV感染的诊断，报告定性检测结果时还 应注明反应条件和所使用的引物序列。报告HIV核酸定量检测结果时 应按照仪器读数报告结果，注明使用的试验方法、样品种类和样品量， 当测定结果小于最低检测限时，应注明最低检测限水平，低于最低检

16、 测限的结果不能排除HIV感染6，16。文献报道：31份类风湿系列阳性和/或ANA阳性标本中，抗HIV检 测不合格为9份，占29.0%。我站34份抗HIV不合格标本中，类风 湿系列阳性或ANA阳性为10份，占29.4%。其原因可能为间接法测 抗HIV试剂盒中所用的酶标记抗人IgG可与非特异性吸附的I gG或RF、ANA等自身抗体结合，导致假阳性的产生。可见,类风 湿系列和抗核抗体对抗HIV间接法检测影响较大17。总之，产生假阳性的原因是多方面的，主要包括：（1）个人身体原因，如一些特殊体质、过敏体质、孕产妇，容易产生非特异反应。我 们在日常检测中就遇到过。（2）感染其他疾病，如 HBV HCV

17、梅毒 等，可能会造成一些非特异的交叉反应。（3）试剂原因，因为任何一 种试剂都难以达到100%准确。（4）操作原因，如操作中的交叉污染。对于（1） （3）项，可以通过流行病学调查和其他辅助诊断方法（如核酸检测）加以排除。对于（4）项，其实是一种操作错误，在检测 中应该尽可能杜绝，这就要求检验人员在检测过程要非常仔细小心。【参考文献】1 胡飞跃.中国艾滋病预防控制的政策研究 .国际技术经济研 究，2003，6 （3）: 40-45.2 李素敏，王润田，赵云珠.输血相关HIV感染的免疫学检测进展.中国输血杂志，2004，17 （6）: 204-206.3 Myl on akisE,Paliou M

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