人教版选修三动物细胞培养和核移植技术教案

1、动物细胞培养和核移植技术1动物细胞工程常用的技术手段常用手段：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生 产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的 基础。2. 动物细胞培养的过程动物胚胎或幼前碎血金加培接触* * 十g匕养液细胞 贴唯抑制分相 10代少数50代少数不死 龄动物胰蛋口酶细胞悬液生长亠培养细胞细胞细胞 组织块、.原代培养传代培养3. 动物体细胞的克隆(1) 过程：动物体细胞克隆包括胚胎移植和动物细胞核移植两个 过程。(2) 核移植的原理是动物细胞核具有全能性。(3) 核移植分类：胚胎细胞核移植和体细胞核移植(4) 核移植过程供体_细胞_供体体细胞培养*细胞核

2、注人去核减U卵巢卵中期+乜.卵母 母细胞去核-细胞供体核进 人受体卵 核移植，母细胞,并构建重 组胚胎牛岀与供胚胎移植代孕-体遗传族 亠母牛囚相同的个体(5) 选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作， 卵(母)细胞细胞质多，营养丰富，含有促进核全能性表达的物质。(6) 体细胞核移植技术存在的问题是什么？克降动物存在着健康问题，表现出溃传和生理缺陷等。4. 动物细胞融合及单克隆抗体制备原理：细胞膜的流动性。(2) 方法：物理法(离心、振动、电刺激)、化学法和生物法(灭活病毒）。应用：制备单克隆抗体，过程如下:给小鼠注射f从脾脏中分离 持定的抗原f R淋巴细胞未融合细胞I选择培养

3、朵交瘤 （”细胞灭活转毒同种融合细胞诱艮融合、杂交痺细胞单克隆抗体*体内培养克降、 检验体外培养严定朵交瘤细胞群培养骨軸卿细胞骨罰痢细胞（4）单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高并可大量制备。题|组微|练1关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 （）A .动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C .烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培 养增殖D .动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱 除病毒解析动物细胞培养所用培养基为液体培养基，需加入血清、血 浆等。植物组织培养所用培养基为固体培养基， 不需要加入血

4、清、血 浆等，但需加入植物激素，A项正确。胰蛋白酶能使动物细胞间的蛋 白质水解，使动物组织分散成单个细胞，植物组织培养不需要胰蛋白 酶，B项错误。高度分化的植物细胞有全能性，烟草叶片离体培养能 产生新个体，杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特点， 体外培养能无限增 殖，C项正确。通过培养的动物细胞可以用于检测有毒物质， 判断某 种物质的毒性。植物分生区附近（如茎尖）无病毒，可用茎尖进行组织 培养获得无病毒植株，D项正确。答案 B2.如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述， 正确的是（）抗原十3亠鼠骨髓瘤细胞 小鼠腹腔体外培养单克隆抗体A .是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应 T淋巴细胞B.中

5、使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C .同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D .是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群解析 是从已免疫的小鼠脾脏中获得的浆细胞，用来和骨髓瘤 细胞融合形成杂交瘤细胞，A项错误；诱导动物细胞融合的方法有生 物方法(如某些灭活的病毒)、化学方法(PEG)、物理方法(离心、振动、 电刺激),B项错误；只有中的杂交瘤细胞同时具有浆细胞和骨髓 瘤细胞的特点，C项错误；经过筛选培养获得的是既能大量增殖又 能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞群， D项正确。答案 D3.科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛， 如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(

6、如图重组细胞重组胚胎所示)。请结合图示回答下列问题：4y牛犊细胞培养 含有人生长激素基去核因的奶牛体细胞采集卵母细胞(1) 在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分 散处理。形成单个细胞，这个过程中需要利用处理(2) 用于核移植的供体细胞。一般都选用传代10代以内的细胞,原因是_（3）在进行原代培养时，细胞增殖的方式是 此外，细胞增殖还表现出口接触抑制等特点。（4）将进行培养的供体细胞核注入去核的卵母细胞中，去除卵母细胞细胞核的目的是_（5）将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后，该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的牛犊，但也不是100%的复 制，原 因 最 可 能

7、是（6）上述动物细胞工程中涉及的技术有 转基因奶牛的克隆成功，说明了动物的 有全能性。解析 （1）实践中常用胰蛋白酶处理动物组织细胞使其分离开 来。（2）传代10代以内的细胞代谢旺盛、分裂能力强，遗传物质没有 发生改变，适于作为核移植的供体细胞。（3）在进行原代培养时，细胞以有丝分裂的方式进行增殖，同时表现出贴壁生长和接触抑制的现 象。（4）去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物 质几乎全部来自供体细胞。（5）生物的性状是细胞核基因和细胞质基 因共同作用的结果，同时，生物的性状还受环境因素的影响，因此， 克隆动物不可能是供体奶牛100%的复制品。（6）该克隆动物的培育过 程中涉及

8、核移植、细胞培养和胚胎移植等技术，说明了高度分化的哺 乳动物体细胞的细胞核仍具有全能性。答案（1）胰蛋白(2) 该种细胞代谢旺盛、分裂能力强，且遗传物质没有发生改变(3) 有丝分裂贴壁生长(4) 使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞(5) 生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制；同时还受 环境因素的影响(6) 核移植、细胞培养、胚胎移植技术体细胞的细胞核整合提升1动物细胞培养与体细胞核移植应注意的 4个问题(1) 动物细胞培养和植物组织培养都存在细胞的培养过程，但植 物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。(2) 区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长 到

9、一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束, 开始了传代培养。(3) 经植物组织培养成的植株与提供外植体的植株完全相同，而动物细胞核移植形成的个体与供体大部分性状相 同，也有部分性状与受体相同。(4) 核移植过程中供体理论上是提供细胞核，但操作过程中可以 把整个细胞注入去核的卵母细胞中去，原因是体细胞体积相对较小, 取核难度较大，另外细胞膜对核融合的障碍性较小。2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全 能性细胞膜的流动性、细胞的增殖融合 方法去除细胞壁后诱导原生质体 融合使细胞分散后诱导细胞融合使用 的酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶诱导 手段物理法：离心、电剌激、振动化学法：聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外，也可用 灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞3单克隆抗体制备过程的几个问题分析(1) 动物免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原， 增殖分化为有特异性免疫功能的 B淋巴细胞，才能产生相应的抗体, 所以，与骨髓瘤细胞融合的 B淋巴细胞实际上是浆细胞。(2) 在单克隆抗体制备过程中，一般认为有两次