动物细胞工程讲座课件

1、动物细胞工程讲座动物细胞工程讲座动物细胞工程动物细胞工程单克隆抗体养单克隆抗体养细胞融合细胞融合细胞培养细胞培养胚胎移植胚胎移植核核 移移 植植动物细胞工程讲座动物细胞培养动物细胞培养（1）动物细胞培养液成分）动物细胞培养液成分 ？（2）动物细胞培养过程？）动物细胞培养过程？ （3）区别）区别: 原代培养与传代培养原代培养与传代培养 细胞株与细胞系细胞株与细胞系（4）动物细胞培养的应用？）动物细胞培养的应用？动物细胞工程讲座有何同？不同？有何同？不同？动物细胞融合动物细胞融合动物细胞工程讲座仙台病毒仙台病毒紫外线紫外线丧失感染活性丧失感染活性 不感染细胞不感染细胞保留融合活性保留融合活性 诱导

2、细胞融合诱导细胞融合物理法物理法化学法化学法生物法生物法动物细胞工程讲座1、单克隆抗体？、单克隆抗体？单：单：克隆：克隆：抗体：抗体：单个细胞？单个细胞？无性繁殖无性繁殖抗原抗原B细胞细胞抗体抗体特异性结合特异性结合单克隆抗体动物细胞工程讲座2 2、米尔斯坦和柯勒的实验方案、米尔斯坦和柯勒的实验方案B B淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。生抗体又能无限增殖。 实验目的实验目的: : 实验原理：实验原理： 实验材料：小白鼠实验材料：小白鼠 实验器材：培养皿、针筒等等。实验器材：培养皿、针筒等等。

3、 实验过程：？实验过程：？制备单克隆抗体制备单克隆抗体动物细胞工程讲座单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程动物细胞工程讲座（1 1）小鼠骨髓瘤细胞与）小鼠骨髓瘤细胞与B B淋巴细胞融合？淋巴细胞融合？（2 2）制备过程中应用哪些细胞）制备过程中应用哪些细胞 工程技术手段？工程技术手段？ （3 3）在整个制备的过程中要经过几次筛选在整个制备的过程中要经过几次筛选？思考思考：细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活细胞融合技术、细胞培养技术细胞融合技术、细胞培养技术筛选得到杂交瘤细胞，筛选得到杂交瘤细胞，筛选先在多孔培养板筛选先在多孔培养板上，在每孔

4、只有上，在每孔只有一个杂交瘤细胞一个杂交瘤细胞下培养筛选出特下培养筛选出特异抗体的细胞群异抗体的细胞群动物细胞工程讲座单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用 应用应用: : 疾病的诊断、治疗和预防。疾病的诊断、治疗和预防。 优点优点: :特异性强、灵敏度高。特异性强、灵敏度高。 实例实例: :1 1、各种癌症、肝炎病毒、各种癌症、肝炎病毒、SARSSARS病毒、细菌病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断；及血吸虫等数百种疾病的诊断；2 2、在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士、在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士, ,能识别能识别“自己自己”与与“异己异己”，一旦发现，一旦发现 致病致病因素便与

5、之结合将其杀死。因素便与之结合将其杀死。3 3、若在单抗上带上抗癌药物制成、若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。细胞又不会伤害健康细胞。动物细胞工程讲座一、动物细胞培养一、动物细胞培养1、过程、过程2、应用：、应用：细胞系细胞系动物胚胎动物胚胎幼龄动物器官幼龄动物器官细胞悬细胞悬浮液浮液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞细胞株细胞株原代培养原代培养传代培养传代培养病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体的生产，制皮肤病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体的生产，制皮肤细胞，检测有毒物质的毒性细胞

6、，检测有毒物质的毒性动物细胞工程讲座3、植物组织培养和动物组织培养的比较、植物组织培养和动物组织培养的比较比较项目原理培养基结果培养目的植植物物动动物物细细胞胞全全能能性性细细胞胞增增殖殖固体固体营养物质营养物质植物激素植物激素液体液体营养物质营养物质动物血清动物血清培养成培养成植株植株培养成培养成细胞株细胞株细胞系细胞系快速繁殖快速繁殖培养无病毒培养无病毒植株植株获得细胞获得细胞产品、细产品、细胞胞动物细胞工程讲座二、动物细胞的融合二、动物细胞的融合不同种类的动物细胞之间融合不同种类的动物细胞之间融合人与动物细胞之间融合人与动物细胞之间融合植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较植物细胞杂交与动物细

7、胞杂交的比较比较项目原理方法诱导手段用途植物动物细胞膜细胞膜流动性流动性去壁去壁原生质融合原生质融合细胞分散细胞分散细胞融合细胞融合物理物理化学化学物理物理化学化学生物生物克服远缘杂克服远缘杂交不亲合交不亲合制备单克制备单克隆抗体隆抗体动物细胞工程讲座三、单克隆抗体三、单克隆抗体1、制备过程、制备过程2、应用、应用杂交瘤细胞杂交瘤细胞效应效应B细胞细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合细胞融合特定培养基筛选特定培养基筛选灭活病毒灭活病毒体外培养体外培养体内培育体内培育疾病的治疗、预防、单克隆抗体诊断盒诊断疾病的治疗、预防、单克隆抗体诊断盒诊断疾病疾病动物细胞工程讲座 世界上第一只克隆羊世界上第一只克

8、隆羊“多莉多莉”的培育过程如的培育过程如图所示，请据图回答：图所示，请据图回答：乙乙甲甲abcdef(1)图中的甲为苏格兰绵羊，图中的甲为苏格兰绵羊，乙为多莉羊。那么，乙为多莉羊。那么，a和和b是通过是通过_分裂形成的，分裂形成的，其其DNA含量是体细胞的含量是体细胞的 _ ；c肯定是肯定是_ 细细胞，乙的遗传性状与提供胞，乙的遗传性状与提供 _的绵羊的绵羊 一致一致.减数减数一半一半体体细胞核细胞核动物细胞工程讲座乙乙甲甲abcdef(2)产生产生 甲和乙的过程分别甲和乙的过程分别是是和和（3）在形成乙是的过程中，）在形成乙是的过程中，需要将需要将d的细胞核取出，将的细胞核取出，将c细胞核移

9、入细胞核移入d细胞内，此技术细胞内，此技术叫叫。所需的受体细胞。所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因大多采用动物卵细胞的原因是是（4）绵羊的白色对黑色为）绵羊的白色对黑色为显色。若甲是白色绵羊，要显色。若甲是白色绵羊，要判断它是否纯合体，选用与判断它是否纯合体，选用与它交配的绵羊最好是它交配的绵羊最好是-有性生殖有性生殖克隆克隆核移植核移植卵细胞大，易于操作；卵卵细胞大，易于操作；卵细胞具有继续分化的潜能细胞具有继续分化的潜能。黑毛黑毛动物细胞工程讲座乙乙甲甲abcdef（5）在产生多莉羊时，需）在产生多莉羊时，需将将e细胞形成的早期胚胎移细胞形成的早期胚胎移入另一头母羊（入另一头母羊（f）

10、子宫里，）子宫里，这种技术在细胞工程中这种技术在细胞工程中叫叫（6）继植物组织培养后，）继植物组织培养后，克隆绵羊的培育成功，证克隆绵羊的培育成功，证明动物细胞也有明动物细胞也有（7）在繁殖多莉羊的过程）在繁殖多莉羊的过程中，是否遵循孟德尔遗传中，是否遵循孟德尔遗传规律？多莉羊的性状与规律？多莉羊的性状与d羊、羊、c羊及羊及f羊的关系是什么？羊的关系是什么？胚胎移植胚胎移植全能性全能性 不遵循，多莉羊的多数性状不遵循，多莉羊的多数性状象象c羊，个别性状象羊，个别性状象d羊，发育也会受到羊，发育也会受到f羊影响羊影响。动物细胞工程讲座四、动物胚胎移植四、动物胚胎移植可以使妊娠时间长、产仔数少的哺

11、乳动物产可以使妊娠时间长、产仔数少的哺乳动物产仔率大大提高仔率大大提高五、核移植五、核移植在鱼类、两栖类中用核移植的方法克隆动物在鱼类、两栖类中用核移植的方法克隆动物首次获得成功，目前又陆续培育出克隆牛、首次获得成功，目前又陆续培育出克隆牛、羊、兔等哺乳动物羊、兔等哺乳动物动物细胞工程讲座培养液培养液 种类种类: :液体培养基液体培养基 成分：成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、葡萄糖、氨基酸、无机盐、 维生素和动物血清等维生素和动物血清等动物细胞工程讲座动物细胞培养 胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源）胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源）单个细胞单个细胞原代细胞原代细胞细胞株细胞株细胞系细胞系剪碎胰蛋白酶剪碎胰蛋白酶分离细胞分离细胞洗涤、稀释、分离洗涤、稀释、分离原代培养原代培养传代培养传代培养遗传物质没有发生改变遗传物质没有发生改变遗传物质发生改变遗传物质发生改变动物细胞工程讲座 原代培养：原代培养： 传代培养：传代培养： 细胞株：细胞株： 细胞系：细胞系：单个细胞单个细胞十代左右十代左右原代培养细胞原代培养细胞4050代左右代左右10到到40、50代的细胞，代的细胞，遗传物质没发生改变遗传