血培养标本采集操作流程及要点说明【精华】4

1、血培养标本采集与运送标准操作规程1标本采集，输送的标准操作程序3静脉血标本采集操作流程22鹤壁京立医院血培养标本采集、运送与报告标准操作规程(sop)23血培养标本采集与运送标准操作规程适用对象：需采集血培养标本的科室文件编号：rj-ic-sop-xbbcj编写者：糜琛蓉审核者：倪语星 版次：01编写日期：2007-5-30审核日期：2007-6-10执行日期： 2007-7-1注：本文件程序仅供本院医务人员使用，未经同意，不得翻印目的：正确采集血培养标本并运送内容：采集方法培养瓶消毒程序：消毒培养瓶橡皮塞，待干燥后使用。皮肤消毒程序：用消毒液从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达5cm以上，

2、待消毒液挥发干燥后采血。静脉穿刺和培养瓶接种程序：用10ml注射器无菌穿刺取血后，排尽针头内空气，勿换针头（如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头），采血后直接注入血培养瓶，先注5ml于厌氧培养瓶，并注意避免注入空气，后注其它培养瓶，轻轻混匀以防血液凝固或严格按厂商推荐的方法采血。注意事项血液标本采集后应立即送检，不能及时送检者应置室温暂存，勿放冰箱。检验单需注明抗菌药物（特别是磺胺、青霉素）使用情况，采集时间和部位（如左臂等），可疑的诊断。采血部位：通常为肘静脉，疑为细菌心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血。对于成人患者，每次发热时应该分别在两个部位采集血标

3、本以帮助区分是病原菌还是污染菌。在不同部位取血，2次分离出同样菌种才能确定是病原菌。不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管易被固有菌群污染。采血时机：在患者发热期间越早越好，最好在抗菌治疗前，以正在发冷发热前半个小时为宜或在停用抗生素24小时后。采血次数及间隔：对需马上做抗菌治疗的急性发热性疾病（如脑膜炎、细菌性肺炎）或需紧急手术的患者，如（急性骨髓炎、化脓性关节炎等），应立即从两臂分别取2份标本。对感染性心内膜炎患者，在24h内取血3次，每次间隔不少于30min；必要时次日再做血培养两次。对发热原因不明者两次抽血间隔60min；必要时于2448小时后再抽血2次。因为1次血培养不足以说明问题，

4、且会遗漏阳性结果。国外有人统计1次血培养可检出菌血症的80%，2次检出90%，3次检出99%。国内统计17家医院1次血培养阳性率10.8%，18家医院2次以上血培养阳性率14.8%采血量：成人菌血症或败血症的血液中含菌量较少，平均13ml血液中仅有1个细菌。所以采血量一定要足够。以培养基与血液之比10：1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。采血量过少会明显降低阳性率。成人每次每培养瓶采血5ml（含50ml培养基），婴幼儿每次每培养瓶采血2ml（含20ml培养基）将血注入培养基前不需要更换针头，用无菌干棉球按压瓶塞，并尽可能避免血培养瓶橡皮塞上的残留消毒液影响结果。每日每例采血至少两次，

5、间隔0.51h。结果判断健康人体的血液是无菌的。通常血培养分离的细菌或真菌可认为是血液感染的病原体。大多数的菌血症是间歇性的，往往需要以多次血培养阳性证实。如为表皮葡萄球菌、类白喉棒状杆菌等皮肤常居菌，则连续两次培养为同种细菌方可确定。血液中常见细菌为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、a群、b群链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等。临床微生物标本送检的注意事项所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在小时内。如果不能及时送检，置于室温环境。送检标本应注明来源、检验目的和采样时间，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。厌氧培养标本需保持厌氧状态运送：使用专用运送培养基或用

6、针筒抽取标本后排尽空气,在针头上置无菌橡皮塞后运送。最佳的临床标本送检，包括厌氧菌培养标本，首先取决于所获取标本的量。量少的标本要在采集后的1530分钟内送检。送检期间要予以安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。严禁将带有裸露针头的注射器送往实验室。参考文献1贾淑梅 临床医院感染管理与控制 第四军医大学出版社：2005（3）：252美 p r 默里、e j 巴伦、m a 法勒、f c 特诺维、r h 约克 临床微生物学手册(上下) 科学出版社 2005-6标本采集，输送的标准操作程序目的 规范标本采集，保证实验室枪测前标本质量。范围 微生物实验宣所有标本。职责 采集、运送

7、微生物标本的临床各科室工作人员。【标准操作程序】1血液、骨髓标本1.1采集指征 对可疑血流感染患者未进行抗菌药物治疗前。应及时进行血液培养。可疑血流感染的患者出现以下一项或几项体征时应及时采集血培养： 1) 发热(38)或低温(36)。 2) 寒战。 3) 白细胞增多（计数大于10,000109l，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞)。 4) 粒细胞减少(成熟的多核白细胞小于1000109l)。 5)血小板减少。 6)皮肤粘膜出血。 7)昏迷。 8)多器官衰竭。 9)血压降低。 10)呼吸加快。 11)降钙素原升高(pct) 12)c反应蛋白升高(crp) 在评估可疑新生儿败血症时。除发热

8、或低烧外,很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆茵菌血症的患儿(特别是2岁或以下的幼儿)一般出现于门诊，常伴有明显发热（38.5)和白细胞增多(总数20,000109 /l)。老年菌血症患者，可能不发热或低体温，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要信号。1.2血培养次数和采血时间采血应该尽量在使用抗菌药之前进行，推荐同时采集2-3套(不同部位)血培养，以助于提高阳性检出率，区别病原菌与污染菌。（一套血培养为一瓶需氧培养加一瓶厌氧培养。一次静脉采血只能注入到1套培养瓶中)。尽可能选用可中和或吸附抗菌药物的培养基。临床对可疑菌血症患者应立即采集血培养标本，

9、对间歇性寒战或发热可在寒战时或体温高峰到来之前0.5-1h进行采血。除特殊情况之外（如怀疑细菌性内心膜炎），采集血培养后的2至5天内，无需重复采集血培养。1.3特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建议： 1.3.1急性心内膜炎:对于可能的心内膜炎患者,必须在经验使用抗菌药物前30min之内抽取血培养，起始采集3套血培养，如果在24h之内仍报告为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套。1.3.2亚急性心内膜炎：需在24h之内连续从不同部位抽取3套血培养，间隔30-60min。如24h内为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套。1.3.3对于亚急性心内膜炎的评估，皮肤消毒尤为重要

10、，因为其主要的病原菌为皮肤定植菌如凝固酶阴性葡萄球菌。因此，血培养必须取自外周静脉而非留置的静脉导管。取自导管的血培养会伴有很高的污染风险从而导致错误的心内膜炎的结论。建议采用正确的皮肤消毒，从不同的外周静脉部位分别采集血培养，不能从留置的导管采血。1.3.4急性脓毒症(急性高热？) ： lomin内从不同的部位采集2-3套血培养。1.3.5可疑菌血症但血培养持续阴性，应改变血培养方法，如延长培养时间或增加特殊培养基，以获得罕见的或苛养的微生物（真菌、结核菌等)。1.3.6不明原因发热，如隐性脓肿、 伤寒热和波浪热，从不同体位先采集2-3套血标本，24-36h后估计体温升高之前（通常下午)再采

11、集2套以上。1.4皮肤捎毒剂： 1.4.1推荐使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘伏。 1.4.2碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏。 1.4.3消毒剂需要有足够的作用时间以保证消毒效果（碘酊作用30s，碘伏作用1.5-2min） 1.4.4洗必泰的作用时间和碘酊一样，但是没有过敏反应，因此不必擦去，但不能小于2个月的婴儿。1.5静脉穿刺点皮肤消毒程序： 1.5.1 70酒精消毒皮肤(以采血点为中心，螺旋式用力由内到外直径5cm以上)，作用60秒； 1.5.2用碘伏消毒皮肤(以采血点为中心，螺旋式用力由内到外直径5cm以上)，作用1.5-2min或用碘酊消毒皮肤，作用30s； 1.5.3再用70

12、%酒精脱碘，（以采血点为中心，螺旋式用力由内到外直径5cm以上）； 1.5.4静脉穿刺采血。 注，血液培养须特别注意消毒困许多微生物，尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处，易污染血培养标本。1.6培养瓶消毒程序： 用70酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消毒剂)，作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面残余液体，然后注入血液。1.7采血量： 成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml， 每瓶不少于5m1。婴幼儿患者推荐的采血量， 每瓶不少于2ml。18培养瓶 推荐使用商品化的培养基。 使用添加抗菌药物吸附剂(如树脂或活性碳)的血培养瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗患者血培养的检出率。但同

13、时也会增加污染菌的检出率。1.9静脉穿刺和培养瓶接种程序： 穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触刺点。 骨髓标本侧的准备同外科切口。 用注射器无菌穿刺取血或骨髓后，直接注入血培养瓶，勿换针头(如果行第二次穿刺，应换针头)或严格按厂商推荐的方法采血。 血标本接种到血培养瓶后轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检。1.10血培养瓶标识 标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类、采集时间。注：病人标识不可覆盖在血液培养瓶的条形码上。1.11标本的运送 血培养标本应按要求尽快送往实验室，不得超过2h。如无法及时送检，血培养标本需室温（20-25）保存，切勿冷藏。1.12生物安全

14、防护参见hs-jy-gl-xj-302生物防护的安全程序。2尿液标本2.1采集指征 1) 有典型的尿道刺激症状 2) 肉眼脓尿或血尿 3) 尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性（几个+号） 4) 不明原因的发热，无其他局部症状 5) 留置导尿管时间超过48小时的患者出现发热 6) 膀胱排空功能受损7) 泌尿系统疾病手术前。22采集方法 标本采集应力争在末使用抗菌药物之前，注意避免消毒剂污染标本。 清洁中段尿：最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后到医院，由专业人员指导下采集中段尿标本。尿标本消毒采集程序： 女性中段尿的采集方法： 1）用皂水完全清洗尿道区域，用湿纱布垫漂洗。

15、 2)分开阴唇，开始排泄。 3)排除前段尿后，不停止尿流，采集中段尿。 男性中段尿的采集方法： 1)用肥皂水清洗阴茎头，用湿纱布垫漂洗。 2)回缩包皮 开始排泄。 3)排除前段尿后，不停止尿流，采集中段尿。 耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液。 直接导尿：按导尿消毒程序消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取尿液。 留置导尿管收集尿液：利用留置管采集标本时，应先夹住导尿管1-2h小时后，以75酒精消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液。注意不能从尿液收集袋中采集尿液。2.3采集量5-10ml。2.4容器无茵、带螺旋盖 透明塑料容器。2.5标本

16、容器标识标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类。2.5标本运送 标本采集后应立即盖紧，防止泄漏或容器外部留有残留物。及时送检，室温保存下不得超过2h，否则应置于4c冰箱保存，保存时间不得超过24h。2.7注 直接导尿可能导致尿道细菌进入膀胱，增加医源性感染的危险。2.8生物安全防护参见hs-jy-gl-xj-302生物防护的安全程序。 3脑脊液标本3.1采集指征 不明原因引起的头痛、脑膜刺激征象、颈部僵直、脑神经病理征象、发热、体温过低、易受刺激等临床症状。此外，其他实验室检查有发现：脑脊液白细胞增加、蛋白质增加且葡萄糖减少等。3.2采集时间 怀疑中枢神经系统感染时，应立即采集标本，最好在抗

17、菌药物使用之前。3.3采集方法 按腰椎穿刺操作规程，采集约3-5ml脑脊液于3支无菌试管中，每支试管至少1-2ml，即将第2管(或第1管)送至实验室（建议床边直接接种血培养瓶，包括需氧血培养瓶和厌氧血培养瓶，增菌培养)。 做脑脊液培养时，建议同时做血培养。3.4采集量 至少1-2ml。如进行抗酸染色，至少2ml。3.5运送容器 无菌加盖螺口试管。3.6标本容器标识应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。3.7标本运送 采集后立即加盖，防止泄漏或容器外部留有残留物。常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。脑脊液标本送检的最佳时间为15min内；如果送检时间超过1h，则会影响结果，

18、须向主任或医疗主管汇报，由医疗主管或主任向临床医生联系，并说明由于标本延时结果可能受到影响。在结果报告时，在备注处注明此情况。3.8注 某些细菌具有自溶酶，放置时间过长易自溶死亡， 因此，标本应立即送检，并且保温(禁止放冰箱，因脑膜炎奈瑟菌遇冷易死亡)。3.9生物安全防护参见hs-jy-gl-xj-302生物防护的安全程序。4.穿刺液标本4.1培养采集指征：4.1.1胆汁：急性胆囊炎、急性重症胆管炎、伴有腹痛，黄疸、墨菲征阳性、伴有恶心、呕吐和发热，尿少色黄、伴有中毒或休克等症状。4.1.2胸水：结核性胸膜炎、细菌性肺炎引起的胸膜炎伴有胸痛、发热，胸腔积液外观混浊、乳糜性、血性或脓性。4.1.

19、3腹水：原发性或继发性腹膜炎伴有腹痛、呕吐、腹肌紧张，肠呜音减弱或消失。4.1.4心包积液：结核性、风湿性、化脓性、细菌性心包炎。4.1.5关节腔积液：化脓性关节炎、关节肿胀、关节周围肌肉发生保护性痉挛。4.2采集时间： 怀疑感染存在，应尽早采集标本。一般在患者使用抗菌药物之前或停用药物后1-2日采集。4.3采集方法： 4.3.1胆汁： 胆汁的采集方法有十二指肠引流法（以“b”管来自胆囊，做细菌培养意义较大)，胆囊穿刺法及手术采取三种方法。由临床医生采取，约2ml左右放入无菌密封容器立即送检。 4.3.2其它穿刺液： 按穿刺消毒规范，消毒皮肤后，由临床医生穿刺采集标本(2ml左右)，装入无菌密

20、封容器立即送检。4.4采集容器 无菌加盖螺口试管。4.5采集量： 1-5ml(慢性非卧床腹膜透析有关的腹膜炎时，采集至少50mr的量可以提高检出率)。4.6标本容器标识 应包括病人姓名 病员号、标本种类，检验项目采集时间。4.7标本运送 采集后立即加盖，防止泄漏或容器外部留有残留物。保温。立即送检，保证在lh内送至实验室，实验室收到标本后应立即接种。4.8生物安全防护参见hs-jy-gl-xj-302生物防护的安全程序。5.粪便样本5.1采集指征 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细茵培养： 粪便涂片镜检白细膪5个hp 体温38.5 重症腹泻 血便或便中有脓液 未经抗菌药物

21、治疗的持续性腹泻病人 来自肠道传染病疫区的患者5.2采集时间 尽可能在发病早期和使用抗菌药物之前采集。在不同的时间采集2-3个标本可以提高致病菌的分离率。5.3采集方法 自然排便采集标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部份的粪便1-3g。水样便则取絮状物，一般取1-3ml，直接装入运送培养基中送检。 直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂和水，将肛门周围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门超越肛门括约肌约2-3cm，与直肠粘膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉拭子置于运送培养中送检。5.4采集量 成形粪便1-3g。水样便1-3ml。5.5容器 粪便标本装于无菌加盖螺旋广口塑料杯；直肠拭子置于cary-bl

22、air运送培养基。5.6标本容器标识 应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。5.7标本运送 标本采集后应立即加盖，防止泄漏或容器外部留有残留物。1h内送检，建议床边接种。 高度怀疑霍乱弧菌感染的标本运送必须符合相应的生物安全防护要求。 5.8注 住院超过3d或入院诊断不是胃肠炎的患者，应考虑抗菌药物相关腹泻的检测，一般不做常规粪便培养。 除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做常规病原检测。 有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血便或水祥便的效果最好。 疑似致病性大肠埃希菌、气单胞菌、邻单胞菌、弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌等感染的病人，需要培养时须另外提出申请。5.9生物安全

23、防护参见hs-jy-gl-xj-302生物防护的安全程序。 6.下呼吸道标本6.1采集指征 出现咳嗽、咯血、呼吸困难 发热等呼吸系统感染症状 怀疑呼吸机相关肺炎应采集支气管肺泡灌洗液或支气管刷取液做定量培养。62采集时间 以清晨为最好：63采集方法 自然咳痰 采痰标本前 应冷开水漱口刷牙，除去大部分口腔内杂苗。然后用力从气深部咳出痰液 放入痰杯内 下呼吸道肺泡灌洗 支气管刷洗，气管抽吸：将抽吸物或灌洗液直接放八痰杯内 刷物放入1ml无菌盐水的痰杯 诱导咳痰：刷完牙龈和舌头后让患者用水漱口，借助喷雾器使患者吸八约25m3一5的无菌盐水诱导咳痰。64采集量 lml支气管肺泡灌洗液，应采集lo100

24、ml。65容器 无菌密封容器66标本容器标识 应包括病人姓名 病员号、标本种类，检验项目，采集时间。67标本运送 标本采集后应正确盖好 防止泄漏或容器外部留有残留物。常温2h内送至实验室。6. 8注 不能自主咳痰的患者呼吸科医生应经抽吸获得标本，合格的标本应10个鳞状上皮细胞/lpf。6 9生物安全防护参见hs-jygl-xj302生物防护的安全程序。7鼻咽部标本7.1采集指征 发热，咽部发红 疼痛 咳嗽、喉部有脓样分泌物等临床症状。 直接拉查，手术中或组织病理检查发现脓疡者 怀疑脑膜炎奈瑟菌带菌者，应采集鼻咽拭子。72采集时间在使用抗菌药物之前采集。7. 3采集方法 上呼吸道标本通常采用含转

25、运培养基的无菌棉拭子。 鼻：用无菌盐水湿润的拭子插入鼻孔12cm对鼻粘膜旋转3圈擦取标本。插入运送培养基， 鼻咽;用无菌拭子经鼻轻轻插入鼻咽后部 慢慢旋转拭子5s以吸收分泌物 插入运送培养基。 咽部:采集前患者应用清水反复漱口 ,由采集者将舌向外拉 使腭垂尽可能向外牵引 ,将棉拭子通过舌根 到咽后壁或腭垂的后侧 ,涂抹数次,插入运送培养基,拭子要避免接触口腔和舌粘膜。74容器cary-blair运送培养基。75标本容器标识应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。76标本运送标本采集后应正确盖好,防止泄漏或容器外部留有残留物。常温2h内送亘实验室。7.7注咽拭子培养不能用于会厌发炎

26、的患者。7.8生物安全防护参见hsjygl-xj302生物防 护的安全程序。 8脓液和伤口标本8.1采集指征 皮肤软组织有急性化脓性炎症 脓肿、创伤感染等。8.2采集时间 在使用抗菌药物之前采集。83采集方法 开放式脓肿，用无菌盐水或70酒精拭去表面渗出物及坏死组织，尽可能抽吸或将拭子深入伤口紧贴伤口的基底部或脓肿壁取样。 封闭式脓肿，消毒后，用无菌注射器穿刺，抽取脓液，注射器颈密台后送检；或注入培养瓶，建议厌氧培养。84容器 转运培养基或血培养瓶。85标本容器标识 应包括病人姓名。病员号、标本种类、检验项目采集时间。8，6标本运送 标本采集后应正确盖好。肪止泄漏或容器外部留有残留物。常温2h

27、内送至实验室。87注 组织或液体优于拭子标本如必须用拭子，采集2份(1份培养，1份做革兰染色)从脓肿底部或脓肿壁的取样结果量好。88生物安全防护参见hs-j丫gl。xj-302生物防护的安全程序。9组织标本9.1采集指征 浅表皮肤枯膜感染 深部组织感染等。9.2采集时间 在使用抗菌药物之前采集。9. 3采集方法根据不同的病变部位。炎症或坏死组织部位，采用相应的方法采集组织标本。94采集量lg。9.5容器无菌封闭容器，需要加一些无菌盐水保持湿润。9.6标本容器标识应包括病人姓名、病员号 、标本种类、检验项目、采集时间。9. 7标本运送标本采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。常温1h内

28、送至。9 .8注送捡组织的量尽可能多，不要送表面简单摩擦的拭子。组织标本不能添加固定剂。9 .9生物安全防护参见hs-jy-glxj。302生物防护的安全程序。10生殖道标本10.1采集指征出现发热、乏力食欲不振等全身症状伴有皮肤粘膜损害。男性有尿痛 尿频 尿急 尿道分泌物增多、会阴部疼痛 阴囊疼痛 性功能障碍，泌尿生殖器畸形和缺损。女忙有阴道分泌物增多及性状异常，尿道口骚痒、脓性分泌物流出、下腹疼痛、月经失调。 阴道出血、外阴骚痒、外阴或阴道疼痛、性功能障碍等。102采集时间在使用抗菌药物之前采集；10.3采集方法103.1男性前列腺：用肥皂和水清洗阴茎头通过直肠按摩前列腺，用无菌拭子或无菌

29、管收集前列腺液。103.2男性尿道：患者排尿1h后采集，用泌尿生殖道拭予插入尿道腔2-4cm 旋转拭子，至少停留2s。10.3.3女性阴道：擦去过多的分泌物和排出液，用2支无菌拭子从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物。1支涂片 1支做培养。10.3.4女性尿道：患者排尿1h后，擦去尿道口的渗出物用手指通过阴道。靠着耻骨联合。按摩尿道，用拭子采集分泌物。10.3.5宫颈：用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见，用拭子擦去宫颈外溢的黏液分泌物，丢弃拭子用另一支无菌拭子插入宫颈内2cm旋转拭子，停留2s。拭子避免碰及阴道壁。10.3.6后穹窿： 送抽吸液。10.4采集量尽可能多取，10.5容器cary-blar拭子转

30、运系统。10.6标本容器标识应包括病人姓名。病员号、标本种类、检验项目、采集时间。10.7标本运送标本采集后应正确盖好。防止泄漏或窖器外部留有残留物。常温2h内送至实验室。10.8注推荐用革兰染色方法确定细菌性阴道病。细菌培养往往容易误导。疑似性传播感染，不能使用棉拭子，推荐使用藻酸钙拭子。109生物安全防护参见hsjy-glxj302生物防护的安全程序。11眼、耳部标本11.1采集指征 眼、耳部出现各种急慢性感染。11.2采集时间 在使用抗苗药物之前采集。11.3采集方法 11.3.1内耳：接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道消毒，再用注射器穿刺收集内耳液体；对破裂的鼓室，借助耳科诊视器，用拭子收集

31、液体。 11.3.2外耳 ：用湿拭子拭去耳道的任何碎屑或痂皮，换用无菌拭子在外耳道用力旋转取样。 11.3.3眼部：建议眼部检体在床边直接接种或涂片。 用无菌盐水预湿的两个拭子分别擦拭左右结膜部位，分别接种或涂片。11.4采集量 尽可能多取。11.5容器 cary-blair拭子转运系统。11.6标本容器标识 应包括病人姓名、病员号、标本种类 检验项目、采集时间。11.7标本运送 标本采集后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。耳部标本常温2h内送至。眼部标本应1530min送至。11.8注 耳部标本采集时，对于外耳道应用力取样，以免漏检(如引起蜂窝织炎的链球菌)。眼部标本采集时，注意避免

32、感染蔓延至眼部临近区域。标本须标明左、右眼。11.9生物安全防护参见hsjygl-xj302生物防护的安全程序。12血管导管标本12.1采集指征 病人出现导管相关血流感染征象，如导管留置超过48h，伴有发热，体温超过38度，或导管植入部位出现红肿热痛，流脓等症状 必须采集。122采集时间 尽可能在使用抗菌药物之前采集；12.3采集方法 用乙醇、碘液及乙醇清洗导管植入部位周围的皮肤，拔出导管，将导管末端剪下5cm，移入无菌管，防干燥。12.4采集量 导管末端5cm左右12.5容器 无菌密封塑料管。12.6标本容器标识 应包括病人姓名、病员号，标本种类，检验项目、采集时间。127标本运送 标本采集

33、后应正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。应1h送至实验室。12.8生物安全防护参见hs-jy-glxj-302生物防护的安全程序。13褥疮溃疡13.1 采集指征 褥疮部位出现感染征象。13.2采集时间 尽可能在使用抗茵药物之前采集13.3采集方法用无菌盐水清洗表面并移除坏死组织，用拭子用力采集伤口底部，量好采集组织样本，将标本放八cary-blair拭子转运系统。13.4采集量 尽可能多采集标本。13.5容器 cary-bair拭子转运系统。13.6标本容器标识 应包括病人姓名，病员号、标本种类、检验项目、采集时间。13.7标本运送 标本采集后应立即盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物。应在

34、2h内送至实验室。138注 褥疮溃疡拭子无法提供有价值的临床信息，因此一般选择蛆织活检或针头抽吸标本。139生物安全防护参见chsjyglxj-302生物防护的安全程序。14结核分枝杆菌14.1采集指征 14.1.1肺结核指征: 反复发作或迁延不愈的咳嗽、咳痰，或呼吸道感染经抗炎治疗3-4周仍无改变。 痰中带血或咯血。 长期低热或“发热待查”。 体检肩胛区有湿罗音或年轻患者有局限性哮呜音。 存在结核病危险因素如免疫抑制、肿瘤、营养不良等，并出现呼吸道症状或胸部x线检 查异常。 14.1.2除此之外，有结核性腹膜炎、肠结核 肝结核，结核性脑膜炎、肾结核、皮肤结核、骨及骨关节结核等指征。临床应根据

35、病人实际情况选择分枝杆菌检测项目。14.2采集时间 尽可能在使用抗结核药物之前采集标本。如已用药，在停药3天后采集。14.3采集方法 痰标本：尽量采集清晨第一口痰 每天一次连续2天。应以冷开水漱口刷牙后咳深部痰， 以脓样，干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本。痰量应为3-5m。 尿标本：需收集清晨清洁中段尿50ml左右。 脑脊液：腰穿取脑脊液13ml，盛于无菌容器送检， 穿刺液；包括胸水、腹水、心包液。关节液及鞘膜液等各种标本。胸、腹水一般取5-10ml，心包液，关节液取15m盛于无菌容器送检。 脓汁标本：无菌穿刺抽取脓汁1-5ml，盛于无菌容器送检。 气管洗涤液：在支气管镜检查时注入适量无

36、菌蒸馏水或生理盐水，抽吸几次后，抽吸出的液体即可送检。 粪便标本：取粪便3-5g送检,与10ml左右饱和生理盐水混合，静置12h，取浮面液体检查。14.4容器 洁净、无菌、加盖、密封、防渗漏，最好为50ml离心管。 不含防腐剂和抑菌剂，一次性使用。14.5标本容器标识 应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。146标本运送 标本采集后应正确盖好防止泄漏或容器外部留有残留物。及时送楦，不超过1h，否则应置4c冰箱保存除血。脑脊液、无菌体液)，以防标本干燥或污染。14.7注 分枝杆菌标本注意生物安全防护，具体参见生物防护文本，14.8生物安全防护参见hs-jy-gl-xj-302生物

37、防护的安全程序。附表附表一，微生物标本指南1标本类型采集送检时间温度报告时间重复采样说明原则装置和最小量 转运限制血培养培养瓶口的消毒 用70酒精擦拭血培养瓶口橡皮塞，作用60s。用无菌棉签清除橡皮塞表面残余液体然后注入血液。静脉穿刺点皮肤消毒：1.70酒精消毒皮肤以采血点为中心，螺旋式用力由内到外直径5cm以上)，作用60s2.用碘伏消毒皮肤，作用1.5-2min；或用碘酊消毒皮肤，作用30s （以采血点为中心 螺旋式用力由内到外直径5cm以上)3.再用70酒精脱碘(以采血点为中心 螺旋式用力由内到外直径5cm。4.静脉穿刺采血。注：血液培养须特别注意消毒，因许多微生物 尤其葡萄球菌属通常存

38、在皮肤表面或近袁层处，易污染血培养标本。血培养瓶成人：5ml/瓶。婴儿：1ml/瓶2h内送至实验室，室温放置 5天3套/24h1.急性脓毒症。lomin内从不同的部位采2-3套2.急性心内膜炎:对于可能的心内膜炎患者必须在经验使用抗菌药物前30min之内抽取血培养, 起始采集3套血培养,如果在24h内仍报告为阴性，则继续采集2套血培养。全部培养一共为5套。3.亚急性心内膜炎 需在24h内连续从不同部位抽取3套血培养，间隔30-6omin如24h内为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一共为5套注意事项同脑脊液骨髓对穿刺一侧准备同外科切口血培养瓶2h内送至实验室，室温放置5天1次/天注意事项同脑

39、脊液脑脊液1.用2碘酒消毒采集体2.用带l3-l4，l4-l5，或l5-s1通管丝的针头插八3进入蛛网膜腔下后移去通丝管，采集1-2ml液体，分别放入3个防漏管无菌管或血培养15-30分钟内送至实验室，室温放置3天无注：患者标签不可贴在血培养瓶的条形码上；标本采集后立即送检，如不能立刻送至检验室，应置于室温，禁止放置冰箱。附表二，微生物标本指南2标本类型采集送检时间温度报告时间重复采样说明原则装置和最小量 转运限制下呼吸道肺泡灌洗、支气管刷洗、支气管抽吸物痰：咳出痰：诱导痰1将抽吸物或洗出物放入痰标本容器中。2刷出物放入有生理盐水的无菌容器中1在医生或护士的直接监护下采集标本2让患者冷开水漱口

40、，去除口腔杂菌。3指导患者深咳，产生下呼吸道标本（非鼻液或口水）。采集到无菌容器中。1让患者用冷开水漱口刷牙2借助喷雾器使患者吸入25ml3-10%的无菌生理盐水3采集诱导的痰到无菌容器中无菌容器1ml无菌容器1ml无菌容器1ml室温立即送检室温立即送检室温立即送检3天3天3天1次/天1次/天1次/天对于不能产生标本的患者，呼吸道治疗医生应经抽吸获得标本，最好的标本10个鳞状细胞/lpf烧伤标本采集前，先以无菌生理盐水清洗和清创烧伤伤口将组织放入无菌管中，用拭子取渗出物2h,室温3天1次/天只进行需要培养，烧伤表面的培养可能是污染菌或皮肤寄生菌组织1用无菌容器呈送2小样本应滴加几滴无菌生理盐水

41、保持湿润3不能使组织干枯。无菌容器，需要加一些无菌生理盐水。1h,室温3天无呈送组织的量尽可能多，不要呈送表面简单摩擦的拭子。附表三，微生物标本指南3标本类型采集送检时间温度报告时间重复采样说明原则装置和最小量 转运限制鼻鼻咽喉用被无菌生理盐水湿润的拭子插入鼻孔约2cm对鼻粘膜用力旋转1用无百拭子经鼻轻轻插入鼻咽后部。2慢慢旋转拭于5s以吸收分泌物。3放八无菌管中。1用压舌板压舌。2用无菌拭子从咽后，扁桃体和发炎区采样转运培养基2h，室温3天1次/天喉拭子培养不能用于会厌发炎的患者脓肿伤口用无菌生理盐水或70酒精拭去表面渗出物。尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口基底部或脓肿壁取样，转运培养基

42、2h 室温2h 室温3天3天 1次/天 1次天组织或液体优于拭子标本如必须用拭子，采集2个，1个培养 ，1个做革兰染。从脓肿底部或脓肿壁的取样，结果量好。体液1皮肤消毒参照血培养穿刺点皮肤消毒2经皮穿刺抽吸或外科获取标本3立即转运实验室。4尽量多送液体；不要将拭子浸入液体转运。血培养瓶或无菌管：1mllh 室温3天无羊水和后穹隆穿刺液革兰染色前不需离心，其他液体检测最好用细胞离心制备物做革兰染色。附表四，微生物标本指南4标本类型采集送检时间温度报告时间重复采样说明原则装置和最小量 转运限制粪便常规培养e.colio157:h7直肠拭子含血液或脓液样，置入转运培养基将液体或血便放入转运培养基。1

43、小心插入拭子超越肛门括约肌约2-3cm2轻轻旋转拭子，在肛门隐窝取样。3用于检测病原的拭子应能见到粪便用转运培养基：用转运培养基，转运拭子lh 室温lh。室温lh 室温3天3天3天1次天1次天 1次天住院超过3d或入院诊断不是胃肠炎的患者不做常规粪便培养。除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做常规病原检测。有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血便或液状便的效果最好胃灌洗液患者早晨未进食并卧床采样。1用鼻胃臂经口或鼻进2用25-50m冷却的无 茵蒸馏水灌沃3获得标本并放入到防 漏无菌容器：无菌 防漏容器lh 室温 3天 1次天附表五，微生物标本指南5标本类型采集送检时间温度报告时间重复采

44、样说明原则装置和最小量 转运限制尿：女性中段男性：中段导尿管1用肥皂水完全清洗尿道区域。用湿纱布垫漂洗。2分开阴唇，开始排泄。3排除前段后，不停止尿流，采集中段尿。1用肥皂水清洗阴茎头，用湿纱布垫漂洗。2回缩包皮，开始排泄-3排除前段后，不停止尿流，采集中段尿1用肥皂水完全清洗尿道区域。2将导管无菌插入膀胱。2流过15m尿后，采集尿至无菌容器内。无菌容器无苗容器无菌容器2h 室温2h 室温2h 室温3天3天3天 1次天 1次天 1次天该程序可能导致尿道菌落进入膀胱并增加医源性感染的危险。阴道1擦除过多的分泌物和排出液。2用2支无菌拭子从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物。3 1支需要涂，1支拭 子做培

45、养转运拭子2h 室温 3天 1次天对于子宫内装置将全装置放入无菌容器并室温转运，推荐用革兰染色方法确定细菌性阴道炎，细菌培养往往不准确和容易误导。静脉导管1用75乙醇消毒导管周围的皮肤2将导管末端及夹子5cm无菌移八无菌管，防干燥无菌试管lh 室温 3天 1次天不需要进行增菌培养。附表六，微生物标本指南6标本类型采集送检时间温度报告时间重复采样说明原则装置和最小量 转运限制褥疮溃疡不选择拭子标本（见备注)：1用无菌盐水清洗表面2如得不到活检标本，用拭子用力采集损伤底部。3将拭子放入适当的转运系统。转运拭子2h，室温 3天 1次天 感染源由于褥疮溃疡拭子提供不了什么临床信息因此不选择，一般选择组

46、织活检或针头抽吸标本。耳内耳外耳对复杂的，反复的或慢性顽固的中耳炎做鼓室穿刺1接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液体。2对破裂的鼓室，借助耳科诊视器，用拭子收集液体。1用湿拭子将耳道的任何碎屑或痂皮拭去。2在外耳道用力旋转拭子取样， 无菌管，转运拭子转运拭子2h，宣温2h。室温 3天3天 1次天 感染源 1次天 感染源对于外耳道应用力取样。表面取样可能采不到蜂窝织炎链球菌。眼结膜1分别用(无菌盐水预湿)拭子绕每一个结膜取。2采集完即接种培养基。3将拭子涂抹在两个玻片上染色直接接种bap和choc 或转运拭子平皿15-30minrt3天 无建议在床边接种和涂片。采集时，须小心地避免感染蔓

47、延至眼部邻近区城。注意：须标明左眼 右眼的标本。附表七，微生物标本指南7项目标本类型采集量容器转运注意事项结核培养 痰3-5ml无菌容器，最好用50ml离心管除血、脑脊液。无菌体液标本应保温外，其余应冰箱保存1h内送检一天一次，连续3天每天用冷开水漱口刷牙后，用力深部咳痰，以晨痰为佳。支气管肺泡灌洗液、支气管冲洗液5ml支气管镜不能被自来水污染，因其可能含有腐生分枝杆菌病引起假阳性。血5ml专用培养瓶无菌采集粪1g无菌容器，最好50ml离心管不推荐组织1g组织需侵入在生理盐水或用无菌生理盐水纱布包裹，对于皮肤损伤，应在病灶边缘采样尿（清晨中段尿）50ml连续采集3天，在采集之前应对外尿道进行清

48、洁处理胃冲洗液5-10ml无菌管，最好50ml离心管连续3d，采集到得标本要立即或4h内用碳酸钠将ph调至中性，否则，标本中的酸会杀死部分分枝杆菌。脑脊液2ml无菌采集：标本采集后保温送检，禁止冰箱保存。如果标本量少，可直接加入到分枝杆菌液体培养基中。体液10ml所有标本应尽量置于注射器中，无菌采集。体积较少的抽液应使用分枝杆菌液体培养基转运脓液、伤口、抽取液1-5ml结核涂片痰3-5ml无菌容器所有标本不能放置蜡化容器内。可导致假阳性涂片结果。避免自来水中的分枝杆菌交又污染。其余同上一般3 -5天报告，如医生有特殊要求。可争取在24h内报告尿10ml无菌管脑脊液2ml体液10ml胃冲洗液5-10ml脓液、伤口、抽取液1-5ml支气管刷子1-5ml载玻片至少2张静脉血标本采集操作流程（2012年8月7日第3次修改）一、准备 即开即