广西中医药大学研究生班仪器复习思考题

1、2012级研究生仪器分析复习思考题名词解释：摩尔吸光系数()：一定波长下，吸光物质的溶液浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。百分吸光系数（）：一定波长下，吸光物质的溶液浓度为1g/100ml(1%)，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。分配系数：指一定温度下，处于平衡状态时，组分在固定相中的浓度和在流动相中的浓度之比，以K表示。保留时间：即待测组分从进样到出现峰最大值所需的时间。调整保留时间：溶质在固定相上滞留的时间，即扣除死时间后的保留时间。分离度：相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。梯度洗脱：在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。半峰宽：

2、色谱峰高一半处的峰宽度，又称半宽度。化学键合相：将固定液的官能团键合在栽体的表面，而构成化学键合相。 正相分配色谱：固定相极性大于流动相极性的色谱法称为正相色谱法。反相分配色谱：流动相极性大于固定相极性的色谱法称为反相色谱法。课本上的练习题：（李发美主编：分析化学 第7版）P210： 第4、5、7、10、13题第4题：卡巴克洛的摩尔质量为236，将其配成每100ml含0.4962mg的溶液，盛于1cm吸收池中，在lmax为355nm处测得A值为0.557，试求其及e值。(=1123，e=2.65104)答：第5题：称取维生素C 0.05g溶于100ml的0.005mol/L硫酸溶液中，再准确量

3、取此溶液2.00ml稀释至100ml，取此溶液于1cm吸收池中，在lmax245nm处测得A值为0.551，求试样中维生素C的百分含量。 （245nm=560） (98.39%)答：第7题：有一化合物在醇溶液中的lmax为240nm，其e为1.7104 ，摩尔质量为314.47。试问配制什么样浓度（g/100ml）测定含量最为合适。 (3.7010-41.4810-3，最佳8.0310-4)答：吸光度在0.20.7之间时为分光光度法的最适宜范围。设l=1cm第10题精密称取VB12对照品20mg，加水准确稀释至1000ml，将此溶液置厚度为1cm的吸收池中，在l361nm处测得其吸收值为0.4

4、14，另有两个试样，一为VB12的原料药，精密称取20mg，加水准确稀释至1000ml，同样在l=1cm，l361nm处测得其吸光度为0.400。一为VB12注射液，精密吸取1.00ml，稀释至10.00ml，同样测得其吸光度为0.518。试分别计算VB12原料药及注射液的含量。 (原料药=96.62%，注射液含量0.250mg/ml)答：第13题：有一浓度为2.0010-3mol/L的有色溶液，在一定波长处，于0.5cm的吸收池中测得其吸收度为0.300，如果在同一吸收波长处，于同样的吸收池中测得该物质的另一溶液的百分透光率为20%，则此溶液的浓度为多少？ (4.6610-3mol/L)答：

5、P351： 第6题：某YWG-C18H37 4.6mm25cm柱，以甲醇水（80:20）为流动相，记录纸速为5mm/min，测得苯和萘的tR和W1/2分别为4.65和7.39(min), 0.79和1.14 (mm)。求柱效和分离度。(=1.92104m1；=2.33104m1；R=8.36)答：P374-375：第6、7题第6题：某五元混合物的GC分析数据如下：组分 A B C D E峰面积 120 85 68 132 96相对校正因子 0.87 0.95 0.76 0.97 0.90计算各组分的百分含量。解：第7题：精密称取冰片对照品45.0mg置10ml量瓶中，加乙醚使溶解并稀释至刻度。

6、精密称取牛黄解毒片（去糖衣）1.048g用乙醚浸提3次，浸出液置10ml量瓶中并加乙醚至刻度。分别称取对照品溶液和样品液1ul注入气相色谱仪，测定样品峰面积为2065uvs，对照品峰面积2546uvs，求牛黄解毒片中冰片含量。解：P398：第7题：外标法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷含量：色谱柱为Zirchrom C8柱（20cm4.6mm，5um）；流动相为乙腈-甲醇-水（含0.5%三乙胺，磷酸调pH3.0）（28：18：54）；以黄芩苷对照品配成浓度范围为10.3144.2ug/ml的对照品溶液。进样，测得黄芩苷峰面积，以峰面积和对照品浓度求得回归方程为：A=1.168105c-1.574103，

7、r=0.9998.精密称取黄芩颗粒0.1255g，置于50ml量瓶中，用70%甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取1ml于10ml量瓶中，30%甲醇定容到刻度，摇匀即得供试品溶液。平行测定供试品溶液和对照品溶液（61.8ug/ml），得峰面积分别为4250701，5997670.解： P412-413：第1、2、3、5、8题第1题：在薄层色谱中，以硅胶为固定相，氯仿为流动相时，试样中某些组分Rf值太大，若改为氯仿甲醇(2:1)时，则试样中各组分的Rf值会变得更大，还是变小？为什么？以硅胶为固定相的应为吸附薄层色谱，氯仿为流动相时，试样中某些组分Rf值太大，若改为氯仿甲醇(2:1)时，则试样中各

8、组分的Rf值会变得更大，此时应加入适量极性小的溶剂如环已烷，以降低展开剂的极性。第2题：某物质在硅胶薄层板A上，以苯甲醇(1:3)为展开剂，某物质的Rf值为0.50，在硅胶板B上，用相同的展开剂，此物质的Rf值降为0.40，问A、B两种板，哪一种板的活度大？B板的活度大。第3题：在一定的薄层色谱条件下，已知A、B、C三 组分的分配系数顺序分别为KAKBKC。三组分在相同条件下Rf值顺序如何？RfARFBRFc第5题：化合物A在薄层板上从原点迁移7.6cm，溶剂前沿距原点16.2cm，(a)计算化合物A的Rf值。(b)在相同的薄层系统中，溶剂前沿距原点14.3cm，化合物A的斑点应在此薄层板上何

9、处？(0.47，6.72cm)第8题：今有两种性质相似的组分A和B，共存于同一溶液中。用纸色谱分离时，它们的比移值分别为0.45、0.63。欲使分离后两斑点中心间的距离为2cm，问滤纸条应为多长？(L0=11cm，滤纸条长至少13cm)思考题：1、分光光度法的定量分析依据什么定律？其数学表达式？各项物理意义？分光光度法的定量分析依据是朗伯比尔定律。A=abc 式中A为吸光度，b为溶液层厚度（cm），c为溶液的浓度（g/dm3)， a为吸光系数。2、在紫外分光光度分析中，通常如何选择定量分析用的测量波长？为什么 ？用全光谱扫描，得到的峰值就是最大吸收波长。最大吸收波长就是用来作测量波长，原因是使

10、用最大吸收波长作为测量波长可使得所有物质有一个统一的选择过程，最大吸光度下测量，数据更大，能减小误差。3、UV光谱法与IR光谱法有何不同？其用途主要有何差异？紫外-可见光谱，常用波长从200-80nm，通常激发待测物质的电子能级。红外光谱，常用波数在3000-400cm-1，处于远红外波段，通常激发待测物质的振动能级。I RUV起源分子振动、转动能级跃迁外层价电子能级及振动、转动能级跃迁适用所有红外吸收的化合物具n-*、-*跃迁有机化合物特征性特征性强简单、特征性不强光谱描述透光率为纵坐标，波数为横坐标吸光度或透光率为纵坐标，波长为横坐标用途鉴定化合物类别、鉴定官能团、推测结构定量、推测有机物

11、共轭骨架4、用UVVis法进行定性和定量分析常用的方法有哪些？为什么说UV用于定性分析有一定的局限性？不同物质结构不同或者说其分子能级的能量（各种能级能量总和）或能量间隔各异，因此不同物质将选择性地吸收不同波长或能量的外来辐射，这是紫外-可见分光光谱法中的定性分析的基础。对于已知物的鉴定，将试样的谱图与标样的谱图进行对照，或者与文献上的标准谱图进行对照。对于未知物结构的测定，如果未知物不是新化合物，可以通过两种方式利用标准谱图来进行查对：一种是查阅标准谱图的谱带索引，寻找与试样光谱吸收带相同的标准谱图；另一种是进行光谱解析，判断试样的可能结构，然后再由化学分类索引查找标准谱图对照核实。（2）紫

12、外-可见分光光谱法中的定量方法利用Lambert-Beer定律：当入射光波长一定时，待测溶液的吸光度A与其浓度和液层厚度成正比，即A=kbc，k为比例系数，与溶液性质、温度和入射波长有关。UVVis法主要用于有机物微量和常量、组分定量分析, 在有机物定性鉴定和结构分析时有一定局限性，常用于研究不饱和有机物,特别是具有共轭体系的有机化合物。作为重要辅助手段可与 IR、NMR等进行配合进行有机化合物鉴定和结构分析，紫外吸收光谱的特点：图形比较简单，特征性不强，当不同的分子含有相同的发色团。它们的吸收光谱的形状就大体相似,所以该法的应用有一定的局限性。5、分光光度计的主要光路类型有哪些？(1)单光束

13、分光光度计。 (2)双光束分光光度计。(3)双波长分光光度计。 (4)双重单色器分光光度计。 (5)配置光多道二极管阵列检测器的分光光度计。6、描述色谱峰的参数主要有哪些，在色谱分析中各有什么作用？一个组分的色谱峰可用三项参数即峰高或峰面积、峰位及峰宽说明。其中峰高或峰面积用于定量；峰位用保留值表示，用于定性；峰宽用于衡量柱效。7、气相色谱GC和HPLC有何不同？常用的检测器有哪些？常用的定量方法有哪几种？各有何特点？1、分析对象的区别：GC适于能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品；但对高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品，尤其对大多数生化样品不可检测，占有机物的20% ； HP

14、LC适于溶解后能制成溶液的样品（包括有机介质溶液），不受样品挥发性和热稳定性的限制，对分子量大、难气化、热稳定性差的生化样品及高分子和离子型样品均可检测用途广泛，占有机物的80%。2、流动相差别的区别 GC：流动相为惰性，气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相有相互作用。HPLC：流动相为液体，流动相与组分间有亲合作用力，能提高柱的选择性、改善分离度，对分离起正向作用。且流动相种类较多，选择余地广，改变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用，当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。 3操作条件差别 GC：加温操作 HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小） 电位滴

15、定分析的特点： (1) 能用于混浊或有色溶液的滴定与缺乏指示剂的滴定; (2) 能用于非水溶液中某些有机物的滴定; (3) 能用于测定热力学常数; (4) 能用于连续滴定和自动滴定,并适用微量分析; (5) 准确度较直接电位法高。气相色谱GC和HPLC进样技术方式不同，在液相色谱中为了承受高压，常常采用停流进样与高压定量进样阀进样的方式常用的高效液相色谱检测器主要是紫外、示差折光、荧光、电导和电化学检测器等。高效液相色谱的定量方法与气相色谱定量方法类似，主要有归一化法、外标法和内标法。其中内标法是比较精确的定量方法。它是将已知量的内标物加到已知量的试样中，在进行色谱测定后，待测组分峰面积和内标

16、物峰面积之比等于待测组分的质量与内标物质量之比，求出待测组分的质量，进而求出待测组分的含量。8、光谱法与色谱法有何不同？其定性、定量分析依据分别是什么？光谱法定性分析依据每种物质（元素）都会发射特定频率（颜色）的光谱，光谱的亮度与该元素的含量成正比，或光谱带的数目、位置、形状和强度定性，定量分析的依据是比尔-兰博定律。色谱定性分析主要依据是每个组份的保留值，色谱图上每一个峰所代表的组份。色谱法常采用归一化法、内标法、外标法进行定量分析。定量分析依据组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号（峰面积或峰高）成正比。经常采用峰面积来进行定量分析。9、色谱法作为分析方法的最大特点是什么？什么是四大

17、基本类型色谱？色谱法以高超的分离能力为最大特点,具有高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快及应用广泛等优点。四大基本类型色谱：按原理分为吸附色谱法(AC)、分配色谱法(DC)、离子交换色谱法(IEC)、空间排阻色谱法(EC)。10、试述UV、IR、 NMR 及MS在有机分子结构鉴定中各有何作用，可提供哪些信息？UV紫外一般用来测定浓度，定量分析比较多，用于定性的话分析共轭官能团。IR红外液体固体都可以，用来分析特征官能团，定量分析基本不用。NMR核磁很多种，用来分析物质具体结构，即是定性分析。确定分子量质谱是最好方法。紫外线UV可以提供一些基团的信息如共轭（C=C-C=C 、苯环、羰基类）；红

18、外线IR提供主要的官能团信息。（基本一个分子中的各种基团的振动都可以看到）；核磁共振波谱法NMR用处具体到一些H、C的化学位移，可以结合前面的谱图分析出其机构式；质谱法MS 提供分子量，以及分子式。11、气相色谱GC内标法有何优点？对内标物的要求是？气相色谱GC内标法优点是无影响因子(内标物和测定物误差同时抵消掉)，当某种混合物组分复杂不能知道所有成分时首选内标法。内标物的要求有以下几点：(1)应是试样中不存在的纯物质； (2)内标物质的色谱峰位置，应位于被测组分色谱峰的附近； (3)其物理性质及物理化学性质应与被测组分相近； (4)加入的量应与被测组分含量接近。12、色谱定量分析中的内标法和外标法有何不同？各有何特点？两种不同的定量方法，内标法是准确称取样品，加入一定量内标物，根据被测物和内标物的重量及相应峰面积求出某组分的含量。外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。内标法的优点