急性出血性结膜炎病原检测

1、急性出血性结膜炎急性出血性结膜炎Acute Hemorrhagic Conjunctivitis, AHC病病 原原 的的 种种 类类qAHC是一种急性病毒性眼科疾病。自是一种急性病毒性眼科疾病。自1969年加年加纳首先报告该病，其后迅速向世界各地蔓延，纳首先报告该病，其后迅速向世界各地蔓延，引起世界引起世界3次大流行。次大流行。n引起引起AHC流行的主要病原是流行的主要病原是CA24V和和EV70，但，但某些肠道病毒及某些腺病毒也可导致该病，须某些肠道病毒及某些腺病毒也可导致该病，须经实验室诊断才能确诊。经实验室诊断才能确诊。n1988年北京、上海、广州和武汉等地暴发年北京、上海、广州和武汉

2、等地暴发AHC大流行，分离出大流行，分离出25株病毒，经鉴定为株病毒，经鉴定为CA24v，为中国大陆首次报道由为中国大陆首次报道由CA24v引起的引起的AHC流行流行病病 原原 检检 测测 方方 法法20022002年福建省急性出血性结膜炎病原分离和鉴定年福建省急性出血性结膜炎病原分离和鉴定取患者眼拭子接种于取患者眼拭子接种于Hep2和和Vero细胞，对标本进行病原分离，细胞病变细胞，对标本进行病原分离，细胞病变达达+时收获。时收获。用诊断血清（用诊断血清（CA24V和和EV70）分别在微量板上所分离株病毒进行中和试验。）分别在微量板上所分离株病毒进行中和试验。对患者的双份血清进行中和抗体效价

3、测定。用经上述诊断血清鉴定的对患者的双份血清进行中和抗体效价测定。用经上述诊断血清鉴定的4株株CA24V分离株病毒，在微量板上测定患者双份血清中和抗体效价。分离株病毒，在微量板上测定患者双份血清中和抗体效价。结果显示：恢复期血清中和抗体效价均比急性期呈结果显示：恢复期血清中和抗体效价均比急性期呈4倍增长，确认引起流倍增长，确认引起流行的病原为行的病原为CA24V 。n1994北京北京AHC流行，从协和医院眼科门诊收集的急性期病人的眼拭子，经流行，从协和医院眼科门诊收集的急性期病人的眼拭子，经免疫血清中和试验表明分离的病毒全为免疫血清中和试验表明分离的病毒全为CA24V。n北京市自北京市自198

4、8年首次从急性期患者分离到年首次从急性期患者分离到CoxA24病毒至今，流行毒株一病毒至今，流行毒株一直是直是CoxA24变异株。除变异株。除1994年年AHC中度流行以外，中度流行以外，1991年以来的其它年年以来的其它年份没有暴发疫情，份没有暴发疫情，AHC处于稳定的散发或偶尔多发状态。处于稳定的散发或偶尔多发状态。n与与1988年分离的病毒制备的单克隆抗体，作免疫荧光中和试验，表明年分离的病毒制备的单克隆抗体，作免疫荧光中和试验，表明1994年分离的病毒株已缺失一个中和抗原决定簇；另年分离的病毒株已缺失一个中和抗原决定簇；另2个中和抗原已有量的变异。个中和抗原已有量的变异。n有研究曾用单

5、抗对世界不同年代及我国不同地区分离的有研究曾用单抗对世界不同年代及我国不同地区分离的CA24型病毒株作抗型病毒株作抗原分析，发现引起原分析，发现引起AHC的的CA24变异株与变异株与CA24原型株的抗原性，尤其是中原型株的抗原性，尤其是中和抗原截然不同，而且和抗原截然不同，而且CA24变异株的中和抗原也仍继续变异中。变异株的中和抗原也仍继续变异中。n再次证明再次证明1994年年CA24V分离病毒株与分离病毒株与1988年分离病毒株已有抗原差异，年分离病毒株已有抗原差异，提示引起提示引起AHC的病毒型别交替和病毒抗原变异是的病毒型别交替和病毒抗原变异是AHC反复出现流行的一个反复出现流行的一个重

6、要原因。重要原因。 n标本收集：严格选择标本收集：严格选择2天内患者，常规方法采取眼拭子天内患者，常规方法采取眼拭子-20C0冰箱保冰箱保存。存。n诊断血清：诊断血清：EV70，柯萨奇病毒，柯萨奇病毒24参考株及分离阳性株免疫血清，参考株及分离阳性株免疫血清，腺病毒腺病毒3（Ad3），），8（Ad8），），11（Ad11）型免疫血清。）型免疫血清。n病毒分离及鉴定：选用病毒分离及鉴定：选用Hela，MEK, MK细胞。鉴定方法有：细胞。鉴定方法有：微量法：分别与各种诊断血清做中和试验。微量法：分别与各种诊断血清做中和试验。间接免疫荧光试验：将阳性标本接种间接免疫荧光试验：将阳性标本接种Hela

7、细胞，常规法作间接免疫细胞，常规法作间接免疫荧光试验。荧光试验。病毒理化特性试验病毒理化特性试验血清中和抗体测定血清中和抗体测定n结果：结果：1988年年流行病原是柯萨奇病毒流行病原是柯萨奇病毒A24变异株。变异株。1990年年标本电标本电镜观察形态为腺病毒，经抗血清鉴定可被镜观察形态为腺病毒，经抗血清鉴定可被Ad11型中和，提示由腺病型中和，提示由腺病毒毒11型引起。型引起。1986年福州市发生年福州市发生AHC流行，从患者体流行，从患者体中分离出中分离出CA24V 。2002年年8至至9月，福州、漳州、厦门等地月，福州、漳州、厦门等地也相继发生也相继发生AHC流行。引起此次福建省流行。引起

8、此次福建省AHC流行主要病原为流行主要病原为CA24V 。n1988年和年和1994年保定流行年保定流行AHC，经检测证实两次均由，经检测证实两次均由CA24变种引起，两次流行病原体相同，间隔变种引起，两次流行病原体相同，间隔6年。年。n汕头汕头1994年年AHC流行，从流行，从2例患者标本中检出例患者标本中检出CA24V型，型，此次流行可能与此次流行可能与CA24V型病毒有关。而型病毒有关。而1993和和1995年年散发病例中检出的病毒有散发病例中检出的病毒有EV70型，型，Adv3、11型，型，CVB5型，还有型，还有CA24V型。型。 n1994年辽宁省年辽宁省6城市城市AHC流行，经鉴

9、定均为流行，经鉴定均为CA24V感染。感染。n1994年青岛市流行的年青岛市流行的AHC的主要病毒同的主要病毒同1988年全国范年全国范围内流行的病毒血清型相同，分离的病毒株为围内流行的病毒血清型相同，分离的病毒株为CA24V 。n1984年北京报道由年北京报道由EV70引起的引起的AHC流行。流行。n为了解为了解AHC的腺病毒病原及腺病毒基因的腺病毒病原及腺病毒基因型，型，1994-1996年北京联合青岛研究年北京联合青岛研究99例例AHC中指出，研究中指出，研究AHC病毒病原时病毒病原时宜用宜用2种以上细胞分离病毒。种以上细胞分离病毒。n同时发现同时发现AHC患者中分离出患者中分离出Ad3

10、属基因属基因11型，有别于引起呼吸道感染的型，有别于引起呼吸道感染的Ad3 I型。型。n从多次从多次AHC流行分析推测，流行分析推测，CA24V引起的流行主要在东引起的流行主要在东南亚国家及印度；同时南亚国家及印度；同时 CA24V也是我国报道中流也是我国报道中流行的主要病原。行的主要病原。CA24V比比EV70引起的流行更具有爆发性，引起的流行更具有爆发性，传播更为广泛。传播更为广泛。n某些型的腺病毒亦可引起某些型的腺病毒亦可引起AHC在一定范围的流行。在一定范围的流行。n单从临床表现无法区分病原，即使同一种病毒引起的单从临床表现无法区分病原，即使同一种病毒引起的AHC流行，临床表现亦有差异

11、。流行，临床表现亦有差异。n人体对人体对CA24V的免疫不持久，患者体内的抗体水平维持的免疫不持久，患者体内的抗体水平维持时间似不长，在患病两年之后抗体大部分已不能测到，时间似不长，在患病两年之后抗体大部分已不能测到，可能和大多数可能和大多数AHC为局部感染有关。为局部感染有关。n正常人群中正常人群中CA24V抗体水平不高，几年之后有可能再次抗体水平不高，几年之后有可能再次出现出现AHC的流行，故应积极做好预防工作。的流行，故应积极做好预防工作。n在在AHC流行时应采用多种分离系统，可能较全面流行时应采用多种分离系统，可能较全面反映其病原。反映其病原。 n引起引起AHC的病毒型别交替和病毒抗原变异是的病毒型别交替和病毒抗原变异是AHC反复出现流行的一个重要原因。反复出现