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文档简介
1、哈尔滨医科大学大庆校区临床根哈尔滨医科大学大庆校区临床根底检验教研室底检验教研室梁松鹤梁松鹤 零落细胞学:是对人体各部位特别是管腔器零落细胞学:是对人体各部位特别是管腔器官外表的零落细胞,或对病变组织经过细针官外表的零落细胞,或对病变组织经过细针汲取的方法获得的细胞染色并在显微镜下察汲取的方法获得的细胞染色并在显微镜下察看作出诊断,又称诊断细胞学。看作出诊断,又称诊断细胞学。 标本来源:自然排出物标本来源:自然排出物 体腔抽出液体腔抽出液 细针穿刺汲取液细针穿刺汲取液一、标本采集一、标本采集原那么:尽量减少受检者的苦楚,获原那么:尽量减少受检者的苦楚,获得协作;方法简便、适用、经济;得协作;方
2、法简便、适用、经济;尽量获得足够供诊断的细胞成分;尽量获得足够供诊断的细胞成分;及时快速送检立刻制片;绝对防止及时快速送检立刻制片;绝对防止污染;标本号标志清楚。污染;标本号标志清楚。途径:途径: 细针穿刺;零落细胞学检查细针穿刺;零落细胞学检查w 直视采集法:直接用刮片刮取、吸管汲取、直视采集法:直接用刮片刮取、吸管汲取、刷洗刷洗w 自然分泌液采取法:痰涂片、尿液涂片、自然分泌液采取法:痰涂片、尿液涂片、前列腺液涂片、乳头溢液涂片前列腺液涂片、乳头溢液涂片w 灌洗法:空腔器官、盆腔或腹腔灌洗法:空腔器官、盆腔或腹腔w 摩擦法:鼻咽、食管、胃摩擦法:鼻咽、食管、胃w 针穿抽吸法:浆膜腔关节腔积
3、液,淋巴结、针穿抽吸法:浆膜腔关节腔积液,淋巴结、软组织、甲状腺、肝软组织、甲状腺、肝w 抽出应立刻送检抽出应立刻送检4保管,保管,24h内处置完内处置完标本标本w 对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和标本的严重凝固,需处置,淋巴细胞分别标本的严重凝固,需处置,淋巴细胞分别液或低渗方法可去除红细胞,凝固的积液液或低渗方法可去除红细胞,凝固的积液将凝块吸出,剩余液体离心涂片。将凝块吸出,剩余液体离心涂片。一要求:一要求: 1 标本要新颖标本要新颖 2 操作要轻柔:细胞分布均匀;薄厚适当操作要轻柔:细胞分布均匀;薄厚适当 勿挤压摩擦,以免细胞损伤变形;勿挤压摩擦
4、,以免细胞损伤变形; 3 玻片要清洁玻片要清洁 4 涂片要结实涂片要结实 5 涂片数量涂片数量 6 标号准确标号准确 w推片法推片法w涂抹法涂抹法w压拉涂片法压拉涂片法w吸管推片法吸管推片法w放射法放射法w印片法印片法w 目的:坚持细胞形状构造,防止其自溶。目的:坚持细胞形状构造,防止其自溶。w 固定液:首选固定液:首选95酒精,乙醇乙醚,氯仿酒精,乙醇乙醚,氯仿乙乙 醇醇w 本卷须知:巴氏染色,涂片勿在空气中枯本卷须知:巴氏染色,涂片勿在空气中枯燥后染色;固定时间不短于燥后染色;固定时间不短于15分钟分钟48h内内进展巴氏染色;固定液要到达进展巴氏染色;固定液要到达90以上;以上;液体标本离
5、心后涂片,待潮干后再固定,液体标本离心后涂片,待潮干后再固定,宫颈的刮片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜宫颈的刮片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜的刷片、针吸涂片应立刻固定。的刷片、针吸涂片应立刻固定。w 固定方法:带湿固定w 枯燥固定w 固定时间:1530minw 四涂片的染色w 目的:使细胞构造明晰显示;运用各种染色使细胞浆与核恰当显示不同颜色;使细胞透明度高,构造明晰。w 方法:常规染色为巴氏染色,配合HE、Giemsa、特染等。1 巴氏染色法巴氏染色法 水化:固定好的涂片水化:固定好的涂片80、70、50乙醇乙醇蒸馏水蒸馏水 各各1min 染核:苏木素染染核:苏木素染35min 分色:分色:1盐酸
6、中数秒,水洗盐酸中数秒,水洗 蓝化:置饱和碳酸锂溶液中蓝化:置饱和碳酸锂溶液中1min,水洗,水洗 脱水:脱水:50、70、80、95乙醇各乙醇各1min 染浆:置于橘黄染浆:置于橘黄G液中染液中染24min95乙乙醇洗醇洗2次次置于置于 EA36染液中染液中45min 脱水:脱水:95、无水乙醇各、无水乙醇各12min二甲二甲苯透明苯透明2 3min 2 封片:中性树胶封固封片:中性树胶封固w 结果断定:胞核呈紫蓝色,核仁红色,底结果断定:胞核呈紫蓝色,核仁红色,底层细胞、中层细胞和表层角化前细胞为淡层细胞、中层细胞和表层角化前细胞为淡蓝色,不全角化细胞角化前细胞呈粉蓝色,不全角化细胞角化前
7、细胞呈粉红色,角化细胞呈桔黄色。红色,角化细胞呈桔黄色。w 适用于上皮细胞染色和阴道涂片察看女性适用于上皮细胞染色和阴道涂片察看女性激素的影响激素的影响w 优点:细胞具有多色性优点:细胞具有多色性w 缺陷:染色程序较复杂缺陷:染色程序较复杂w 染液要充分溶解染液要充分溶解w 苏木素要染前月余配制,用时每天过滤苏木素要染前月余配制,用时每天过滤1次,加次,加新液。室温低时不易着色,可新液。室温低时不易着色,可20的假阴性的假阴性 2 详细部位难确定详细部位难确定 3 肿瘤分型困难肿瘤分型困难 4 非肿瘤性疾病诊断研讨少非肿瘤性疾病诊断研讨少细胞诊断学与病理诊断的关系细胞诊断学与病理诊断的关系 细
8、胞学诊断准确性低于病理组织细胞学诊断准确性低于病理组织学诊断,因此细胞学诊断有赖于病学诊断,因此细胞学诊断有赖于病理组织学诊断的证明。理组织学诊断的证明。w 组织化学组织化学w 免疫组化免疫组化w 流式细胞仪流式细胞仪DNA分析分析w 染色体倍体分析染色体倍体分析w 电镜电镜 第一节第一节 细胞诊断学的根本概念细胞诊断学的根本概念一、细胞增生活泼一、细胞增生活泼 细胞体积增大,核明显增大,核染色细胞体积增大,核明显增大,核染色质增多,颗粒质增多,颗粒 增粗,核仁增大增多,核浆比例失常增粗,核仁增大增多,核浆比例失常,胞浆蓝染,胞浆蓝染 巴氏,可伴核分裂像。巴氏,可伴核分裂像。二、组织修复细胞二
9、、组织修复细胞 组织损伤或修复过程中重新生上皮零组织损伤或修复过程中重新生上皮零落下来的细胞落下来的细胞 特征:细胞多成片出现,似合体细胞特征:细胞多成片出现,似合体细胞,陈列规那么;细胞稍增大,胞核也增大,陈列规那么;细胞稍增大,胞核也增大,核不深染,胞浆尚丰富,深染;核仁明,核不深染,胞浆尚丰富,深染;核仁明显增大或增多;能够出现核分裂像显增大或增多;能够出现核分裂像 。三、细胞化生三、细胞化生 1 未成熟的鳞状上皮化生细胞的特征:未成熟的鳞状上皮化生细胞的特征:似正常上皮外底层细胞大小;多成群出现,似正常上皮外底层细胞大小;多成群出现,可呈铺砖式陈列;细胞呈圆或卵圆形,边缘可呈铺砖式陈列
10、;细胞呈圆或卵圆形,边缘有小突起;胞浆常有小空泡使胞浆透亮。有小突起;胞浆常有小空泡使胞浆透亮。 2 成熟的鳞状上皮化生细胞的特征:细成熟的鳞状上皮化生细胞的特征:细胞似正常鳞状上皮中层细胞大小;多成群出胞似正常鳞状上皮中层细胞大小;多成群出现,细胞呈多边形,有锐角突起,形状多样现,细胞呈多边形,有锐角突起,形状多样;胞浆中常见小空泡。胞浆少,陈列严密,;胞浆中常见小空泡。胞浆少,陈列严密,无细胞间桥。无细胞间桥。四、贮藏细胞增生四、贮藏细胞增生 贮藏细胞是柱状上皮细胞下的一贮藏细胞是柱状上皮细胞下的一层具有分化潜能的幼稚细胞或未分层具有分化潜能的幼稚细胞或未分化细胞。化细胞。 形状特征:形状
11、特征: 细胞小,似鳞状上皮内底层细胞大细胞小,似鳞状上皮内底层细胞大小;小; 圆或卵圆形,胞浆有小突起;圆或卵圆形,胞浆有小突起; 胞浆淡染可见小空泡;胞浆淡染可见小空泡; 核偏位,能够大小稍不一致;核偏位,能够大小稍不一致; 核染色质匀细,可见核仁和几个大核染色质匀细,可见核仁和几个大小一致的核粒;小一致的核粒; 细胞常成群,有时彼此相连;其周细胞常成群,有时彼此相连;其周围常伴化生细胞。围常伴化生细胞。支气管黏膜支气管黏膜五、细胞增生五、细胞增生细胞分裂加强,数目增多,体积可增大,形细胞分裂加强,数目增多,体积可增大,形状可出现异常。状可出现异常。细胞大,核大,核染色质增多、增粗,双核细胞
12、大,核大,核染色质增多、增粗,双核或多核,核仁明显,核膜增厚,甚至轻度不或多核,核仁明显,核膜增厚,甚至轻度不规那么。可分为轻度和重度增生。规那么。可分为轻度和重度增生。六、细胞分化六、细胞分化从幼稚细胞发育成具有完备构造和功能的成从幼稚细胞发育成具有完备构造和功能的成熟细胞的过程。熟细胞的过程。上皮细胞分化的形状表现:上皮细胞分化的形状表现:1 细胞体积由小到大细胞体积由小到大2 胞浆量由少到多胞浆量由少到多3 核浆比由大到小核浆比由大到小4 饱和由大到小饱和由大到小5 染色质陈列由疏松到致密染色质陈列由疏松到致密6 核仁由大到小,由多到少核仁由大到小,由多到少 七、细胞核分裂像七、细胞核分
13、裂像 病理性分裂像应与核碎裂鉴别核染病理性分裂像应与核碎裂鉴别核染色质呈大小不色质呈大小不 等的块状等的块状八、细胞退行性变八、细胞退行性变 细胞退变包括变性和坏死,涂片中二细胞退变包括变性和坏死,涂片中二者鉴别较困难,者鉴别较困难, 统称退变。统称退变。 1 人工引起的退变人工引起的退变 缘由:标本放置过久,细胞自溶;细缘由:标本放置过久,细胞自溶;细胞置于高渗或胞置于高渗或低渗溶液中;固定液浓度或时间不适宜,过低渗溶液中;固定液浓度或时间不适宜,过湿或过干湿或过干 形状特征:细胞呈大片构造不清,细形状特征:细胞呈大片构造不清,细胞均增大或均缩胞均增大或均缩小,胞浆多呈红染,各种类型细胞退变
14、方式小,胞浆多呈红染,各种类型细胞退变方式一致。一致。2 细胞自然退变细胞自然退变 缘由:细胞零落过久,细胞营养不良,炎症、放疗、化缘由:细胞零落过久,细胞营养不良,炎症、放疗、化疗的影响,肿瘤外表供血缺乏,细胞生理性衰老疗的影响,肿瘤外表供血缺乏,细胞生理性衰老 类型:类型: 1肿胀性退变细胞及胞核肿大,染色质模糊、断肿胀性退变细胞及胞核肿大,染色质模糊、断裂并淡染,核内有空泡。胞浆空泡状、蜂窝状或网孔状裂并淡染,核内有空泡。胞浆空泡状、蜂窝状或网孔状,胞界不清胞膜消逝。,胞界不清胞膜消逝。 2固缩性退变细胞及胞核减少,胞浆红染、橘黄固缩性退变细胞及胞核减少,胞浆红染、橘黄、淡黄或多彩,常出
15、现核周晕,核固缩,染色质致密,、淡黄或多彩,常出现核周晕,核固缩,染色质致密,核碎裂核膜消逝。核碎裂核膜消逝。 一、上皮细胞一、上皮细胞一复层鳞状上皮一复层鳞状上皮 由底层到表层分为:基底层、中层、由底层到表层分为:基底层、中层、表层表层 1 基底层细胞:基底层细胞: 1内底层细胞:单层立方或柱状,内底层细胞:单层立方或柱状,很很 少零落。少零落。 2外底层细胞:外底层细胞:23层层w 中层细胞中层细胞 w 表层细胞表层细胞 w 1 角化前细胞角化前细胞w 2 不全角化细不全角化细胞胞w 3 完全角化细完全角化细胞胞贮藏细胞增生贮藏细胞增生 不成熟鳞化不成熟鳞化成熟化生细胞成熟化生细胞类型:单
16、层柱状上皮、假复层纤毛柱状上类型:单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上 皮、复层柱状上皮皮、复层柱状上皮涂片中常见:涂片中常见: 1 纤毛柱状上皮细胞纤毛柱状上皮细胞 2 黏液柱状上皮细胞黏液柱状上皮细胞 3 贮藏细胞贮藏细胞气管壁:黏膜、黏膜下层、外膜气管壁:黏膜、黏膜下层、外膜支气管黏膜:黏膜上皮及固有层支气管黏膜:黏膜上皮及固有层支气管黏膜支气管黏膜三移行上皮细胞三移行上皮细胞 1 表层表层 2 中层中层 3 低层低层四上皮细胞成团零落的形状四上皮细胞成团零落的形状 1 鳞状上皮鳞状上皮 2 纤毛柱状上皮纤毛柱状上皮 3 黏液柱状上皮黏液柱状上皮二、间皮细胞 1 分化程度:成熟型和幼稚型 2
17、大小:大、中、小 3 胞浆嗜色性:嗜酸性、嗜碱性 4 花边间皮细胞 5 创伤性间皮细胞增生的间皮细胞增生的间皮细胞三、非上皮细胞三、非上皮细胞 1 内皮细胞内皮细胞 2 成纤维细胞成纤维细胞 3 组织细胞组织细胞 4 多核异物巨细多核异物巨细胞胞 5 血细胞血细胞四、背景成分四、背景成分 红细胞红细胞 炎细胞炎细胞 多核巨细胞多核巨细胞 坏死物坏死物 黏液等黏液等一、普通形状特征一、普通形状特征一上皮细胞一上皮细胞 急性炎症:退化变性坏死急性炎症:退化变性坏死 慢性炎症:增生再生化生,慢性炎症:增生再生化生,退化变性退化变性 1 鳞状上皮细胞鳞状上皮细胞 1细胞核:核肥大、核固缩、细胞核:核肥
18、大、核固缩、核碎裂核碎裂 2细胞形状:变形梭性、星形、蝌蚪 形、不规那么形,核改动不明显 柱状上皮的鳞状化生。常见底层和中 层细胞团正常或轻度畸形2 柱状上皮细胞:纤毛柱状上皮常成片零落, 以固缩退变为主。 1细胞核:固缩退变 2细胞形状:减少3 病毒感染所致的上皮细胞改动病毒感染所致的上皮细胞改动 1单纯疱疹病毒:鳞状细胞核肿大,单纯疱疹病毒:鳞状细胞核肿大,弱嗜弱嗜 碱性不透明,大的嗜酸性包涵体,碱性不透明,大的嗜酸性包涵体,多核多核 巨细胞细胞变性。巨细胞细胞变性。 2巨细胞病毒:胞体增大,胞核、胞巨细胞病毒:胞体增大,胞核、胞浆见浆见 嗜酸性包涵体。嗜酸性包涵体。1 增生增生共同特点:
19、胞浆嗜碱性共同特点:胞浆嗜碱性 胞浆相对减少,核浆比胞浆相对减少,核浆比略大略大 核增大可见核仁核增大可见核仁 核分裂活泼核分裂活泼1鳞状上皮鳞状上皮2纤毛柱状上皮纤毛柱状上皮2 再生:再生上皮和基底层细胞再生:再生上皮和基底层细胞 再生细胞核大染色深,染色质结块及有丝再生细胞核大染色深,染色质结块及有丝分裂,核仁大、多,浆略嗜碱性,见双核分裂,核仁大、多,浆略嗜碱性,见双核多核,常见炎细胞。多核,常见炎细胞。3 化生:不成熟的鳞状化生上皮似基底层与化生:不成熟的鳞状化生上皮似基底层与棘层细胞之间的过渡细胞,成熟的鳞状化棘层细胞之间的过渡细胞,成熟的鳞状化生上皮与正常鳞状上皮很难区分。生上皮与
20、正常鳞状上皮很难区分。 如化生的细胞核染色质增粗,染色深,核如化生的细胞核染色质增粗,染色深,核大,染色大小异常称不典型化生或异型化大,染色大小异常称不典型化生或异型化生。生。1急性炎症:上皮细胞常严重退变,有较多急性炎症:上皮细胞常严重退变,有较多 中性粒细胞、吞噬细胞、坏中性粒细胞、吞噬细胞、坏死死 细胞碎屑,纤维素。细胞碎屑,纤维素。2亚急性炎症:退变上皮细胞、坏死细胞碎亚急性炎症:退变上皮细胞、坏死细胞碎 屑和增生上皮细胞,中性粒细屑和增生上皮细胞,中性粒细 胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞 和淋巴细胞。和淋巴细胞。3慢性炎症:较多成团的增生上皮细胞,淋慢性炎症:较
21、多成团的增生上皮细胞,淋 巴细胞浆细胞。巴细胞浆细胞。w 上皮样细胞:上皮样细胞:w 朗格汉斯巨细胞:仅靠此细胞诊断结核不可靠,朗格汉斯巨细胞:仅靠此细胞诊断结核不可靠,需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。w 干酪样坏死:假设临近出现上皮样细胞,更支持干酪样坏死:假设临近出现上皮样细胞,更支持结核的诊断。结核的诊断。w 其他细胞:大量单核细胞、淋巴细胞其他细胞:大量单核细胞、淋巴细胞一核异质一核异质 1 轻度核异质细胞:又称炎性核异质,病轻度核异质细胞:又称炎性核异质,病因因 去除多能恢复。多见于鳞状上皮的中、表去除多能恢复。多见于鳞状上皮的中、表 层细胞。层细
22、胞。 与炎性增生细胞的鉴别:核虽大,但染色与炎性增生细胞的鉴别:核虽大,但染色 质仍为细颗粒状,分布均匀,无染色加深质仍为细颗粒状,分布均匀,无染色加深 和核畸形。和核畸形。 重度核异质细胞:见于慢性炎症,可开展重度核异质细胞:见于慢性炎症,可开展为癌细胞,又称癌前核异质。核增大为癌细胞,又称癌前核异质。核增大12倍,染色质粗颗粒状,分布略不均,核膜倍,染色质粗颗粒状,分布略不均,核膜增厚,核仁大、多,胞浆与正常细胞类增厚,核仁大、多,胞浆与正常细胞类似,核浆比轻度增大。似,核浆比轻度增大。 见于癌前病变、原位癌、浸润癌的细胞见于癌前病变、原位癌、浸润癌的细胞 与癌细胞的鉴别:核异型性中等,核浆与癌细胞的鉴别:核异型性中等,核浆比无明显改动。比无明显改动。w又称异常角化、不成熟角化、细胞又称异常角化、不成熟角化、细胞内角化内角化w细胞呈圆形,核深染,胞浆呈深红细胞呈圆形,核深染,胞浆呈深红色,巴氏染色呈桔黄色,此种细胞色,巴氏染色呈桔黄色,此种细胞出如今底层、中层时,能够为癌前出如今底层、中层时,能够为癌前病变的表现,在老年和更年期妇女病变的表现,在老年和更年期妇女应高度注重。应高度注重。一良型上皮细胞的改动一良型上皮细胞的改动 1 急性放射反响急性放射反响 2 上皮细胞继续性放射改动上皮细胞继续性放射改动二癌细胞放射后的改动二癌细胞
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