尼古丁的量对肺细胞活性影响的初步探究

1、尼古丁的量对肺细胞活性影响的初步探究临床三班组长：陈中波组员：王强，黄浩，许艺璇研究背景：尼古丁是烟草烟雾中的7000多种化合物之一，是吸烟成瘾的主要化学成分。吸烟是可预见的癌症发生的重要原因之一，大约有30%的癌症患者死于吸食烟草1。尼古丁作为一种试剂在机体内具有多种生物学效应，可以通过与烟酰乙酰胆碱受体（nAChRs）偶联并激活该受体，近年来研究发现nAChRs越来越多的参与到癌症的发病机理和过程中。2研究背景：尼古丁进入机体后迅速地被吸收并分布到整个机体。大约75%的尼古丁首先通过细胞色素P450（CYP），2A6，CYP2B6和醛氧化酶的作用代谢生成可替宁，课题宁进一步通过羟基化作用生

2、成3-OH可替宁，以及通过葡萄糖醛酸化作用以尿液形式排出体外。3,4意义所以在这一次的设计性实验中，我们打算探究尼古丁对肺部细胞的活性影响，进而呼吁吸烟患者不要对周围的人进行慢性毒杀。实验目的通过探究控制尼古丁的量，对其肺细胞活性的影响。实验原理实验材料生长状况相类似的健康小鼠若干，纸箱，笼子，酒精灯，铁架台，蒸发皿，解剖刀，载（盖）玻片，显微镜，台盼蓝，蒸馏水，生理盐水，尼古丁试剂1，动物分组及处理 四十只小鼠随机分为五组：分别放入五个不同的笼子中，再将笼子放入纸箱中实验步骤A对照组对照组 0 umgB实验组1 umgC实验组5 umgD实验组 10 umgE实验组 15 umg2，尼古丁烟

3、熏， 将尼古丁试剂稀释为1umg/ml、5umg/ml、10umg/ml、15umg/ml 再分别将稀释好的1umg/ml、5umg/ml、10umg/ml、15umg/ml的尼古丁提取液分别在B、C、D 、E 组的纸箱中在蒸发皿中进行蒸发，给A组的小鼠进行蒸馏水的蒸发。 每次进行熏制二十分钟，一天进行三次，连续三天。期间停止给食物 3，剖开小鼠胸腔，取出肺。 4，先对比观察并记录各组小鼠的肺的外表（颜色，形态，大小） 5，取少量肺组织取少量肺组织细胞置于不同的载玻片上，加入等量且适量的生理盐水，调解PH在7.0-7.2之间，每片载玻片上加入0.2ml台盼兰染液，染色10分钟之后，盖上盖玻片制

4、成装片，在显微镜下观察细胞总数和被染色的细胞数，并计算各组细胞的细胞活力。预期结果1. 低倍镜下观察到B、C、D、E五组小鼠装片多有呈蓝色的区域。2. 高倍镜下观察，E组小鼠肺细胞呈蓝色细胞最多，D组较多，C组次之，A组最少。细胞活力=3经计算，A组细胞活力最大，B组较大，C组次之，E组细胞活力最小。参考文献：1SecretanB,Staif K,Baan r,etal.A review or human carcinogens-part E：tobacco,areca nut,alcohol,coal smoke,and saltedJ,The lancet oncolgy,2009(10):103310372Schuller H M Regulatory role of the alpha7nAChE in cancerJ,Current grug targets,2012(13):6807003Hukkanen J,Jacob P,3rd,Benowitz N l Metabolism and disposition kinetics of nicotineJ.Pharmacological reviews, 2005(57):791154Tutka P,Mosiewicz J,Wielosz M Pharmaco