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文档简介

1、实验四实验四一、一、 录像:肠道杆菌的检测录像:肠道杆菌的检测二、二、 肠道杆菌的生化反应肠道杆菌的生化反应三、三、 抗酸染色及抗酸染色及tb菌落菌落四、钩端螺旋体四、钩端螺旋体二、二、 肠道杆菌的生化反应肠道杆菌的生化反应(一)(一)ss琼脂培养基琼脂培养基 (肠道致病菌的强选择鉴别培养基)(肠道致病菌的强选择鉴别培养基)1 、原理:乳糖发酵、原理:乳糖发酵2、成分(胆硫乳琼脂)、成分(胆硫乳琼脂) 乳糖乳糖 中性红中性红 (6.88.0 ) 胆酸盐胆酸盐酸酸变红变红碱碱变黄变黄 非致病菌非致病菌 致病菌致病菌3、结果、结果大肠杆菌大肠杆菌 伤寒杆菌伤寒杆菌 菌落红色菌落红色非致病菌非致病菌

2、菌落黄色菌落黄色致病菌致病菌(二)糖发酵实验(二)糖发酵实验1、单糖发酵(液体培养基)、单糖发酵(液体培养基)糖糖酚红酚红6.88.0 倒置倒置u型管型管细菌细菌酸:酸:细菌葡乳麦甘蔗大肠杆菌大肠杆菌 + + + + -伤寒杆菌伤寒杆菌 + - + + -变黄变黄碱碱:变红变红2、双糖发酵、双糖发酵乳糖、酚红的固体培养基乳糖、酚红的固体培养基葡萄糖、酚红的半固体培养基葡萄糖、酚红的半固体培养基2、双糖发酵、双糖发酵大肠杆菌大肠杆菌 副伤寒杆菌副伤寒杆菌 + - + +斜面斜面底层底层 斜面斜面 底层底层(三)(三) 蛋白质分解产物蛋白质分解产物1、h2s 试验试验含硫氨基酸、醋酸铅的半固体培养

3、基pbs黑色沉淀乙型副伤寒杆菌 大肠杆菌 + -2、吲哚试验、吲哚试验含色氨酸的液体培养基 大肠杆菌乙型副伤寒杆菌 +-吲哚试剂三、抗酸染色 结核杆菌细胞壁脂质含量较高,特别是其结核杆菌细胞壁脂质含量较高,特别是其中大量分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合,中大量分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合,可抵抗盐酸酒精脱色,故菌体呈红色可抵抗盐酸酒精脱色,故菌体呈红色1、原理:、原理:初染:石炭酸复红初染:石炭酸复红810分钟,水洗分钟,水洗脱色:脱色:3%盐酸酒精盐酸酒精30秒,水洗秒,水洗复染:吕氏美兰复染:吕氏美兰1分钟,水洗分钟,水洗(5)吸水纸吸干,油镜观察)吸水纸吸干,油镜观察2 2、步骤:、步骤:(1)涂片)涂片(2)干燥)干燥(3)固定)固定(4)染色)染色3、结果:、结果: 抗酸菌抗酸菌 红色红色 非抗酸菌及细胞非抗酸菌及细胞 蓝色蓝色结核分枝杆菌结核分枝杆菌 抗酸染色抗酸染色 10 100观察要点1、抗酸染色阳性,呈红色、抗酸染色阳性,呈红色2、细长略带弯曲杆菌,末端可呈分枝状、细长略带弯曲杆菌,末端可呈分枝状3、排列方式、排列方式4、标本中可见有痰细胞、标本中可见有痰细胞四、钩端螺旋体四、钩端螺旋体 钩端螺旋体钩端螺旋体 镀银染色镀银染色 1000观察要点观察要点1.标本染色为标本染色为镀银染色,镀银染色,颜色比较特殊颜色比较特殊2. 菌体一端或两

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