第八章外源化学物致突变作用

1、(variation)-由于遗传物质在自我复制过程 中的偶而失误,或由于个体发育与生存受到变化的内外环境条件的影响,一种物种在个体或历代间的性状出现不同程度的差异. （ 指基因中frameshift mutation指发生一对或几对（3或3的倍数除外)碱基减少或增加，以致从受损点开始碱基序列完全改变，形成错误的密码，并转译成为不正常的氨基酸。：2。dna链受损1）二聚体的形成2）dna加合物形成3）dna-蛋白质交联物形成( (gene pool)指某一物种在特定时期中能将遗传信息传至下一代的处于生育年龄的群体所含有的基因总和。（即指一种物种的群体中在生殖细胞内具有、并能传给下一代的全部基因总

2、和。(genetic load): 指一种物种的群体中每一个携带的可遗传给下一代的有害基因的平均水平. dna 1） 光修复 2） “适应性”反应 3） 切除修复 4） 复制后修复 5） 呼救性修复(sos修复) 1）代谢酶遗传多态性 2）修复功能的个体差异 有许多致突变试验所观察到的现象并不能反 映基因突变和染色体畸变或染色体不分离，而仅仅 反映致突变过程中发生的其它事件。将试验观察到 的现象所反映的事件称为 l遗传学终点包括：（归纳） 基因突变 染色体畸变 原发性dna损伤 非整倍体 1.遗传学终点齐全； 2.应包括多种进化程度不同的物种； 3.体内、体外试验相结合； 4.应包括生殖细胞和

3、体细胞突变的试验方法。 2. 鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株： ta97、ta98 ： 移码突变； ta100： 碱基置换； ta102： 移码突变+碱基置换 组氨酸缺陷（his-） 细菌屏障脂多糖缺陷（rfa 深粗型突变） 结晶紫抑菌试验 切除修复系统缺损（uvrb 突变） 紫外线敏感试验 r因子（pkm101、paq1质粒） 抗氨苄青霉素试验、抗四环素试验 剂量设计: * 最高剂量的确定主要取决于受试物对实验菌株的毒性和受试物的溶解度. * 一般最低剂量为0.2g/皿,最高剂量为5mg/皿.推荐的标准诱变剂方法s-9ta97ta98ta100ta102点试-敌克松敌克松叠氮钠敌克松+2-氨基芴2

4、-氨基芴2-氨基芴掺入-敌克松敌克松叠氮钠敌克松+2-氨基芴2-氨基芴2-氨基芴3. 平板掺入法 点试验法 预培养法4.结果评价标准l阳性结果判断标准: 平板掺入法: 受试组回变菌落数阴性对照组回变菌落数的2倍,并有剂量反应关系或至少某一测试点有可重复的并有统计学意义的阳性反应. 点试法: 如受试物点样纸片周围长出较多密集的回变菌落,与阴性对照组相比有明显区别.l结果报告(平板掺入法) 阳性结果至少重复试验共3次,阴性结果至少重复试验共2次,才能作出判断.l 本方法不适合用于杀菌和/或抑菌作用的受试物,不适用于具有妨碍哺乳动物细胞复制系统的受试物.（细胞遗传学试验）（ 慧星试验（comet a

5、ssayl原理 : 在5-三氟胸苷(tft)参与下，通过评价细胞集落生长率来鉴定受试物诱导l5178ytk+/-小鼠淋巴瘤细胞系正相突变能力。 tk座位位于常染色体上,其基因产物为胸腺嘧啶脱氧核苷(胸苷)激酶（tk）.其作用是通过磷酸化将基质中外源性的胸苷用于dna合成.如果一个胸苷类似物（如tft）存在于基质中,也可经tk途径磷酸化掺入dna中,最终导致细胞死亡。 本试验使用的tk座位杂合子(tk+/-)细胞，它单步正相突变就会形成tk+/-表型，失去tk活性，获得tft抗性，即能像杂合子一样利用从头合成途径在普通培养基中生长，又能在tft选择性培养基中存活，此时存活的即为自发或致突变的tk+-集