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文档简介
1、专题 2细胞工程(一)植物细胞工程1.理论基础(原理):全能性表达的难易程度:2.植物组织培养技术( 1)过程: 离体 的植物器官、组织或细胞 愈伤组织试管苗植物体( 2)用途:。( 3)地位:是培育、培育植物新品种的最后一道工序。3. 植物体细胞杂交技术( 1)过程:( 2)诱导融合的方法:物理法包括等。化学法一般是用作为诱导剂。( 3)意义:(二)动物细胞工程1.动物细胞培养( 1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的,将它分散成,然后放在适宜的中,让这些细胞。( 2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用处理分散成制成转入培养瓶中进行培养贴满瓶壁
2、的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续培养。( 3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就,称为。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面时,细胞就会,这种现象称为。( 4)动物细胞培养需要满足以下条件:培养液应进行处理。通常还要在培养液中添加一定量的,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止。:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入等天然成分。:适宜温度:哺乳动物多是; pH:。: 95%5%。 O2 是所必需的, CO2的主要作用是。( 5)动物细胞培养技术的应用:2. 动物体细胞核移植技术和克隆动物( 1)哺乳动物核移植可以
3、分为核移植(比较容易)和核移植(比较难)。( 2)选用去核 卵 ( 母 ) 细胞 的原因:卵(母)细胞;的重要手段。卵( 母) 细胞。( 4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:( 3)体细胞核移植的大致过程是:(下图)比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细细胞膜的流动性去除细胞壁后诱离心、电刺激、克服了远缘杂交胞杂交导原生质体融合振动,聚乙二醇的不亲和性,获得等试剂诱导杂种植株核移植动物细胞细胞膜的流动性使细胞分散后诱除应用植物细胞制备单克隆抗体融合导细胞融合杂交手段外, 再加灭活的病毒诱导的技术之一胚胎移植4. 单克隆抗体( 1)抗体:一个B 淋巴细胞只分泌一种。从血清中
4、分离出的抗体(4)体细胞核移植技术的应用:。( 2)单克隆抗体的制备过程:抗原注入小鼠体内分离B 淋巴细胞骨髓瘤细胞( 5)体细胞核移植技术存在的问题:细胞融合克隆动物存在着问题、表现出缺陷等。3. 动物细胞融合杂交瘤细胞细胞培养( 1)动物细胞融合也称,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融选择培养细胞合后形成的具有原来细胞遗传信息的单核细胞,称为。注入小鼠培养基( 2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体体内培养体外培养融合的方法类似,常用的诱导因素有等。从腹水提取从培养液提取( 3)动物细胞融合的意义:克服了单克隆抗体,成为研究(
5、3)杂交瘤细胞的特点:既能大量,又能产生。( 4)单克隆抗体的优点:。( 5)单克隆抗体的作用:准确识别各种物质的细微差异,并跟发生特异性结合,具有的优点。:主要用于治疗,可制成,也有少量用于治疗其它疾病。受精卵生殖细胞干细胞体细胞;植物细胞动物细胞2.( 2)微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。( 3)转基因植物 、植物体细胞杂交3.离心、振动、电刺激聚乙二醇( PEG)克服了远缘杂交不亲和的障碍。(二)动物细胞工程1. 组织单个细胞培养基生长和繁殖 。( 2)胰蛋白酶或胶原蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代( 3)贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑制停止分裂增殖细胞的接
6、触抑制( 4) 无菌、无毒的环境:无菌抗生素代谢产物积累对细胞自身造成危害营养:血清、血浆温度:36.5 0.5 ; pH:7.2 7.4 。 气体环境 :空气CO 2。细胞代谢维持培养液的 pH。( 5)制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2. ( 1)胚胎细胞体细胞( 2)比较大,容易操作细胞质多,营养丰富(4) 加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育; 保护濒危物种,增大存活数量; 生产珍贵的医用蛋白;作为异种移植的供体; 用于组织器官的移植等。( 5)健康遗传和生理3. ( 1)细胞杂交两个或多个杂交细胞( 2)聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激( 3)远缘杂交的不亲和性细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育4.( 1)特异性抗体产量低、纯度低、特异性差( 3)繁殖专一的抗体
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