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文档简介
1、探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 1.1.基基 础础 回回 扣扣(1 1)酵母菌)酵母菌-实验材料:实验材料: 酵母菌是单细胞真核生物。 生长周期短,增殖速度快,世代不重叠 亲代看不见子代,即在子代出生之前亲代就死了 (2 2)种群数量的变化)种群数量的变化a a种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等 b b种群的数量变化有一定的规律。种群的数量变化有一定的规律。在理想条件下,种群呈在理想条件下,种群呈“j”j”型增长型增长 。在有限的环境下,种群呈在有限的环境下,种群呈“s”s”型增长型增长。种群数量的增长
2、也受到许多环境因素:种群数量的增长也受到许多环境因素: s”型曲线有一个型曲线有一个k值值(如温度、培养液的(如温度、培养液的phph、培养液的养分种类和浓度、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等)的影响。代谢产物等)的影响。.(3 3)血球计数板)血球计数板血球计数板是一种专门用于计算血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微较大单细胞微生物生物的一种仪器。的一种仪器。计数时,常采用样方法计数时,常采用样方法。(4 4)探究性实验)探究性实验 探究实验设计时要遵循的原则:探究实验设计时要遵循的原则:科学性原则、可行性原则、对照原则、单一科学性原则、可行性原则、对照原则、单一变量原则和平行重复原则
3、。变量原则和平行重复原则。培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系(1 1)实验原理)实验原理( (练习册练习册p57)p57)酵母菌生长周期短,增殖速度快酵母菌生长周期短,增殖速度快且世代间不重叠且世代间不重叠, 种群的数量变化有一定的规律。种群的数量变化有一定的规律。在理想条件下,种群呈在理想条件下,种群呈“j”j”型增长,型增长,在有限的环境下,种群呈在有限的环境下,种群呈“s”s”型增长型增长。 在实验室条件下,用液体培养基培养酵母菌,可以在实验室条件下,用液体培养基培养酵母菌,可以观察酵母菌种群数量随时间变化的情况。观察酵母菌种群数量随时间变化的情
4、况。计数计数对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。(2 2)引出培养液配制、灭菌、接种和培养等步骤)引出培养液配制、灭菌、接种和培养等步骤1 1培养液培养液配制配制和分装:和分装:配制质量分数为配制质量分数为5 5的葡萄糖溶液的葡萄糖溶液(葡萄糖(葡萄糖20g20g,1000 ml1000 ml水),分装到水),分装到5 5个烧杯中(个烧杯中(200ml/200ml/烧杯)烧杯)2 2灭菌:灭菌:用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。用的滴管分别灭菌。贴标签。3
5、 3接种接种:接种时要在酒精灯附近,用灭菌干净的:接种时要在酒精灯附近,用灭菌干净的1ml1ml刻度刻度吸管每次吸取吸管每次吸取0.1ml0.1ml酵母菌母液,往每个烧杯中加入。酵母菌母液,往每个烧杯中加入。(注意滴加量不要太多,避免初始菌数过多注意滴加量不要太多,避免初始菌数过多)4 4培养培养:将烧杯置于:将烧杯置于 2828的恒温箱中培养的恒温箱中培养 每天抽样检测,计数酵母菌数量每天抽样检测,计数酵母菌数量5.5.分析结果、得出结论分析结果、得出结论参考练习册p58 1、如何计数?(课本68)血球计数板的构造和使用以计数酵母菌为例以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌
6、个数用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小以每小方格内含有方格内含有4-5个酵母细胞为宜个酵母细胞为宜,一般稀释一般稀释10倍即可倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加在中央的计数室上加盖专用的厚玻片盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘片的边缘,使菌液缓缓渗入使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内使酵母菌全部沉降到
7、血球计数室内.血球计数板的使用血球计数板的使用(4)计数)计数计数:计数:1取样,时间:每取样,时间:每 天取样时间大体一致,并要遵天取样时间大体一致,并要遵守无菌操作规范守无菌操作规范每次取样前要试管振荡摇匀每次取样前要试管振荡摇匀2然后然后用滴管吸取用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘,待培养液自行渗入数板网格上的盖玻片的边缘,待培养液自行渗入并充满网格后并充满网格后,3计数:再放在显微镜下进行细胞计数,后立即计数:再放在显微镜下进行细胞计数,后立即将数据填到记录表格中。如记数时发现,细胞数将数据填到记录表格中。如记数时发现,细胞数较多,不易
8、分辨,吸取的样液应当稀释。较多,不易分辨,吸取的样液应当稀释。(5)计数时计数时,如果使用如果使用16格格25格规格的计数室格规格的计数室,要按要按对角线位对角线位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4个中格个中格(即即100个个小格小格)的酵母菌数的酵母菌数.如果规格为如果规格为25格格16格的计数板格的计数板,除了取其除了取其4个对角方位外个对角方位外,还需再数中央的一个中格还需再数中央的一个中格(即即80个小方格个小方格)的酵母菌数的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方一般只计数大方格的格的上上方和方和右右方线上的酵母细胞方线上的酵
9、母细胞(或只计数或只计数下下方和方和左左方线上的酵母细胞方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次对每个样品计数三次,取其平均值取其平均值,按下列公式计按下列公式计算每算每1ml菌液中所含的酵母菌个数菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式计算公式(1)16格格25格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞数酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/100400104稀释倍数稀释倍数(2)25格格x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞数酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80400104稀释倍数稀释倍数4.血球计数板的清洁血球计数板的清洁血球汁数板使用后血球汁数板使用后,用自来水冲洗用自来水冲洗,切勿用硬物洗切勿用硬物洗刷刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干
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