医用显微镜简介

1、医用显微镜简介医用显微镜简介2015.05.27显微镜的概念显微镜的概念 显微镜显微镜是用于放大微小物体使人肉眼能够是用于放大微小物体使人肉眼能够看到的光学仪器，是人类进入原子时代的标志。看到的光学仪器，是人类进入原子时代的标志。显微镜的发展简史显微镜的发展简史1616世纪世纪 荷兰的眼镜商詹森荷兰的眼镜商詹森（Zaccharias Janssen）和他的显微镜和他的显微镜 世界上最早的一台显微镜世界上最早的一台显微镜显微镜的发展简史显微镜的发展简史1717世纪世纪罗伯特罗伯特 虎克（虎克（Robert Hook）改进了显微镜，并发现了细胞改进了显微镜，并发现了细胞 列文虎克（列文虎克（Ant

2、ony van Leeuwenhoek） 首次用显微镜发现微生物首次用显微镜发现微生物显微镜的发展简史显微镜的发展简史1717世纪世纪现代的现代的光学显微镜光学显微镜显微镜的发展简史显微镜的发展简史181819世纪世纪显微镜分类显微镜分类光学显微镜光学显微镜电子显微镜电子显微镜光学显微镜可分为光学显微镜可分为: l普通光学显微镜普通光学显微镜l暗视野显微镜暗视野显微镜l相差显微镜相差显微镜l荧光显微镜荧光显微镜l倒置显微镜倒置显微镜l体视显微镜体视显微镜l偏光显微镜等偏光显微镜等10多种。多种。 显微镜分类显微镜分类电子显微镜可分为电子显微镜可分为: l透射电子显微镜透射电子显微镜l扫描电子显

3、微镜扫描电子显微镜l分析电子显微镜分析电子显微镜l高压电子显微镜高压电子显微镜 显微镜分类显微镜分类光学显微镜光学显微镜可把物体放大可把物体放大2000倍，分辨的最小极限达倍，分辨的最小极限达0.1微米。微米。看到细胞和部分细胞器，如线粒体和叶绿体，但只能看到其存看到细胞和部分细胞器，如线粒体和叶绿体，但只能看到其存在，看不到细胞器的具体结构（如叶绿体的基粒、线粒体的脊在，看不到细胞器的具体结构（如叶绿体的基粒、线粒体的脊就不能看到）就不能看到） 电子显微镜电子显微镜最大放大倍率超过最大放大倍率超过300万倍，可以看到细胞器的万倍，可以看到细胞器的精细结构，甚至可以看到病毒这种最小生物的结构，

4、更甚至精细结构，甚至可以看到病毒这种最小生物的结构，更甚至可以看到大分子，如蛋白质可以看到大分子，如蛋白质普通光学显微镜普通光学显微镜原理原理 普通光学显微镜普通光学显微镜由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成，目镜和物镜都是凸透镜，焦距不同。光学系统由物镜和目镜组成，目镜和物镜都是凸透镜，焦距不同。物体通过物镜成倒立、放大的实像。目镜相当于普通的放大镜，该物体通过物镜成倒立、放大的实像。目镜相当于普通的放大镜，该实像又通过目镜成正立、放大的虚像。经显微镜到人眼的物体都成实像又通过目镜成正立、放大的虚像。经显微镜到人眼的物体

5、都成倒立放大的虚像。倒立放大的虚像。普通光学显微镜普通光学显微镜构造构造 机械部分：镜座、机械部分：镜座、镜臂、镜筒、物镜镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、转换器、载物台、粗准焦螺旋、细准粗准焦螺旋、细准焦螺旋焦螺旋 照明部分：反光器、照明部分：反光器、聚光器聚光器 光学部分：目镜、光学部分：目镜、物镜物镜普通光学显微镜普通光学显微镜构造构造目镜：装在镜筒的上端，通常备有目镜：装在镜筒的上端，通常备有13个，上面刻有个，上面刻有5、10或或15符号以表示其放大倍数，一般装的是符号以表示其放大倍数，一般装的是10的目镜。的目镜。物镜：装在镜筒下端的旋转器上，一般有物镜：装在镜筒下端的旋转器上，一般

6、有34个物镜，个物镜， “10”符号的为低倍镜，较长的刻有符号的为低倍镜，较长的刻有“40”符号的为高倍镜，最长的符号的为高倍镜，最长的刻有刻有“100”符号的为油镜。物镜常加有一圈不同颜色的线，符号的为油镜。物镜常加有一圈不同颜色的线，以示区别。以示区别。 显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积。显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积。 显微镜目镜长度与放大倍数呈负相关，物镜长度与放大倍数呈正相关。显微镜目镜长度与放大倍数呈负相关，物镜长度与放大倍数呈正相关。即目镜长度越长，放大倍数越低；物镜长度越长，放大倍数越高。即目镜长度越长，放大倍数越低；物镜长度越长，

7、放大倍数越高。普通光学显微镜普通光学显微镜用途用途 普通光学显微镜在医学中主要是用来生物切片、细胞、细普通光学显微镜在医学中主要是用来生物切片、细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究。菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究。普通光学显微镜普通光学显微镜检验中的应用检验中的应用 在临床检验中，普通光学显微镜的使用频率高，其中临床检在临床检验中，普通光学显微镜的使用频率高，其中临床检验基础、血液学检验、微生物学检验等都要用到显微镜。验基础、血液学检验、微生物学检验等都要用到显微镜。 体液室：尿常规复查镜检、粪便常规镜检、胸腹水常规细胞计数、体液室：尿常规复查镜检、粪便常规镜检、胸腹

8、水常规细胞计数、脑脊液常规细胞计数、脑脊液细胞学、脑脊液常规细胞计数、脑脊液细胞学、1小时尿细胞计数及尿红细小时尿细胞计数及尿红细胞形态等；胞形态等； 临检室：血常规有临检室：血常规有20%左右的标本需要进行显微镜复检；左右的标本需要进行显微镜复检； 微生物室：细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片、培养标本菌落涂微生物室：细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片、培养标本菌落涂片、血培养报阳涂片、墨汁染色等片、血培养报阳涂片、墨汁染色等普通光学显微镜普通光学显微镜使用注意事项使用注意事项 观察标本时，先使用低倍接物镜，转换高倍镜或油镜时转动观察标本时，先使用低倍接物镜，转换高倍镜或油镜时转动速度要慢，并从侧面

9、进行观察（防止镜头碰撞玻片），镜头速度要慢，并从侧面进行观察（防止镜头碰撞玻片），镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。 使用高倍镜观察液体标本时，一定要加盖玻片。否则，不仅使用高倍镜观察液体标本时，一定要加盖玻片。否则，不仅清晰度下降，而且试液容易浸入高倍镜的镜头内，使镜片遭清晰度下降，而且试液容易浸入高倍镜的镜头内，使镜片遭受污染和腐蚀。受污染和腐蚀。 油镜使用后，一定要擦拭干净。香柏油在空气中暴露时间过油镜使用后，一定要擦拭干净。香柏油在空气中暴露时间过长，就会变稠和干涸，到这时再去擦拭就比较困难了。镜片长，就会变稠和干涸，到

10、这时再去擦拭就比较困难了。镜片上留有油渍，清晰度必然下降。上留有油渍，清晰度必然下降。 微调是显微镜机械装置中较精细而又容易损坏的元件，拧到微调是显微镜机械装置中较精细而又容易损坏的元件，拧到了限位以后，就拧不动了。此时决不能强拧。否则，必然损了限位以后，就拧不动了。此时决不能强拧。否则，必然损坏。坏。 带有光源的显微镜，需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗，带有光源的显微镜，需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗，再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯。灯。普通光学显微镜普通光学显微镜保养保养 防潮防潮 防尘防尘 防腐蚀防腐蚀 防震与

11、放热防震与放热 机械部件的清洁机械部件的清洁 可用面纱或绸布擦拭，可用面纱或绸布擦拭，不能使用乙醇、乙不能使用乙醇、乙醚等有机溶剂擦拭醚等有机溶剂擦拭，以免损伤漆面，以免损伤漆面 光学系统的清洁光学系统的清洁 如镜片表面有擦不掉的污物、油渍或手指如镜片表面有擦不掉的污物、油渍或手指印镜片生雾长霉时，可用印镜片生雾长霉时，可用20%左右的酒精和左右的酒精和80%左右的乙醚左右的乙醚配置清洗剂进行清洗。清洗时应用软毛刷或棉球沾有少量清配置清洗剂进行清洗。清洗时应用软毛刷或棉球沾有少量清洗剂，从镜头中心向外做圆运动。切忌把这类镜头浸泡在清洗剂，从镜头中心向外做圆运动。切忌把这类镜头浸泡在清洗剂中清洗

12、，清洗镜头时不要用力擦拭，否则会损伤增透膜，洗剂中清洗，清洗镜头时不要用力擦拭，否则会损伤增透膜，损坏镜头损坏镜头 严禁用严禁用干棉球、干布块或干镜头纸擦拭镜头干棉球、干布块或干镜头纸擦拭镜头表面，否则会刮表面，否则会刮伤镜头表面，严重损坏镜头；也伤镜头表面，严重损坏镜头；也不能用水擦拭镜头不能用水擦拭镜头，否则会，否则会留下水渍，而且会滋生真菌，损坏镜头留下水渍，而且会滋生真菌，损坏镜头暗视野显微镜暗视野显微镜原理原理 暗视野显微镜是在普通光学显微镜的基础上构成的，其用强而暗视野显微镜是在普通光学显微镜的基础上构成的，其用强而窄的斜射光束照射标本，而又不让光束进入物镜。在没有光进入物镜窄的斜

13、射光束照射标本，而又不让光束进入物镜。在没有光进入物镜时，视野是黑暗的，故叫暗视野显微镜。而标本中的微粒受光照射后时，视野是黑暗的，故叫暗视野显微镜。而标本中的微粒受光照射后能够散射光线，当散射光线进入物镜时，在显微镜中能够看到微粒的能够散射光线，当散射光线进入物镜时，在显微镜中能够看到微粒的散射光点，好象微粒本身在发光一样。散射光点，好象微粒本身在发光一样。暗视野显微镜暗视野显微镜用途用途 暗视野显微镜常用来观察未染色的透明样品。这些样品因为暗视野显微镜常用来观察未染色的透明样品。这些样品因为具有和周围环境相似的折射率，不易在一般明视野之下看的清楚，具有和周围环境相似的折射率，不易在一般明视

14、野之下看的清楚，于是利用暗视野提高样品本身与背景之间的对比。但只能看到物于是利用暗视野提高样品本身与背景之间的对比。但只能看到物体的存在、运动和表面特征，不能辨清物体的细微结构。体的存在、运动和表面特征，不能辨清物体的细微结构。 暗视野显微镜常用于检查梅毒螺旋体，对早期梅毒的诊断有暗视野显微镜常用于检查梅毒螺旋体，对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。十分重要的意义。相差显微镜相差显微镜原理原理 光波有振幅（亮度）、波长（颜色）及相位（指在某一时间上光波有振幅（亮度）、波长（颜色）及相位（指在某一时间上光的波动所能达到的位置）的不同。当光通过物体时，如波长和振幅光的波动所能达到的位置）的不同。当光

15、通过物体时，如波长和振幅发生变化，人们的眼睛才能观察到，这就是普通显微镜下能够观察到发生变化，人们的眼睛才能观察到，这就是普通显微镜下能够观察到染色标本的道理。而活细胞和未经染色的生物标本，因细胞各部微细染色标本的道理。而活细胞和未经染色的生物标本，因细胞各部微细结构的折射率和厚度略有不同，光波通过时，波长和振幅并不发生变结构的折射率和厚度略有不同，光波通过时，波长和振幅并不发生变化，仅相位有变化，而这种微小的变化，人眼是无法加以鉴别的，故化，仅相位有变化，而这种微小的变化，人眼是无法加以鉴别的，故在普通显微镜下难以观察到。而相差显微镜可以把相差变为振幅差来在普通显微镜下难以观察到。而相差显微

16、镜可以把相差变为振幅差来观察活细胞和未染色的标本。观察活细胞和未染色的标本。相差显微镜相差显微镜用途用途 相差显微镜主要用于观察活细胞或不染色的组织切片，有时也相差显微镜主要用于观察活细胞或不染色的组织切片，有时也可用于观察缺少反差的染色样品。可以观察到透明标本的细节，适用可用于观察缺少反差的染色样品。可以观察到透明标本的细节，适用于对活体细胞生活状态下的生长、运动、增殖情况及微细结构的观察。于对活体细胞生活状态下的生长、运动、增殖情况及微细结构的观察。荧光显微镜荧光显微镜原理原理 荧光显微镜是以紫外线为光源，荧光显微镜是以紫外线为光源， 用以照射被检物体，用以照射被检物体， 使之发出使之发出

17、荧光，荧光， 然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。细胞中有些然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。细胞中有些物质，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，物质，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。荧光显微镜荧光显微镜用途用途 荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的

18、特殊蛋白、核酸等，用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布蛋白、核酸等，用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。一般用于组织细胞学、微生物学、寄生虫学、病理学的研及定位等。一般用于组织细胞学、微生物学、寄生虫学、病理学的研究以及自身免疫病的诊断。究以及自身免疫病的诊断。 电子显微镜是根据电子光学原理，用电子束和电磁透镜代替电子显微镜是根据电子光学原理，用电子束和电磁透镜代替光束和光学透镜，作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后打光束和光学透镜，作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后打到荧光屏上成像，使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像。到荧光屏上成像，使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像。电子显微镜电子显微镜成像原理成像原理 镜筒：电子枪、电子镜筒：电子枪、电子透镜、