培养基的配制灭菌课件

1、培养基的配制灭菌Microbiology DepartmentCollege of Resource & EnvironmentLiyongTel:E-mail: 培养基的配制灭菌l实验目的实验目的l实验材料实验材料l实验方法实验方法l实验作业实验作业培养基的配制灭菌了解培养基的配制原理和方法，掌握其了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。配制过程。了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的使用方法。加压蒸汽灭菌法的使用方法。熟悉微生物的有关准备工作及操作方法。熟悉微生物的有关准备工作及操作方法。培养基的配制灭菌药品：相关配方药品：相关配方器材：高

2、压蒸汽灭菌器器材：高压蒸汽灭菌器其它：其它：培养基的配制灭菌选择配方选择配方: :称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加加热热溶解。溶解。过滤：除去杂质。过滤：除去杂质。培养基的配制灭菌加琼脂溶化加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当加热过程要不断搅拌，可适当补水。补水。调调pHpH值值：用：用NaOHNaOH或或 HClHCl调调pHpH，用，用pHpH试纸试纸对照。对照。分装：注意不要污染棉塞。分装：注意不要污染棉塞。包扎成捆，挂上包扎成捆，挂上标签标签, ,

3、注明何种培养基。注明何种培养基。灭菌备用：培养基灭菌后必须在灭菌备用：培养基灭菌后必须在37370 0C C下恒温培下恒温培养养24h24h，确定无菌生长，方可使用。，确定无菌生长，方可使用。培养基的配制灭菌培养基的配制灭菌l去皮马铃薯去皮马铃薯 200g200g （煮沸煮沸30min30min后过滤后过滤, ,用汁液）用汁液）l蔗糖蔗糖 20g 20g l自来水自来水 1000mL 1000mL l琼脂琼脂 24g 24g lpH pH 自然自然培养基的配制灭菌l蛋白胨：蛋白胨：10g10gl牛肉浸膏：牛肉浸膏：3g3glNaClNaCl： 5g5gl乳糖：乳糖：5g5gl水：水：1000m

4、l1000mll1.61.6溴甲酚紫乙醇溶液：指示剂溴甲酚紫乙醇溶液：指示剂lpHpH：7.27.2l分装试管分装试管;10ml/;10ml/管，内放置倒置小管；管，内放置倒置小管；培养基的配制灭菌同单倍乳糖蛋白胨培养液；乳糖蛋白胨培养液；浓度三倍浓度三倍；l蛋白胨：蛋白胨：10g10g* *3 3l牛肉浸膏：牛肉浸膏：3g3g* *3 3lNaClNaCl： 5g5g* *3 3l乳糖：乳糖：5g5g* *3 3l水：水：1000ml1000mll1.61.6溴甲酚紫乙醇溶液：指示剂溴甲酚紫乙醇溶液：指示剂lpHpH：7.27.2l分装试管分装试管;10ml/;10ml/管，内放置倒置小管；

5、管，内放置倒置小管；培养基的配制灭菌注意：伊红和美蓝液单独分装灭菌，使用前再和注意：伊红和美蓝液单独分装灭菌，使用前再和其它成分混合使用；其它成分混合使用；培养基的配制灭菌1 1组：组：牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏蛋白胨培养基：1000mL1000mL 斜面：斜面：4040支支7mL7mL 其它：分装三角瓶其它：分装三角瓶(700ml(700ml) )培养基的配制灭菌2 2组：组：马铃薯培养基：马铃薯培养基：500mL500mL 装入三角瓶中装入三角瓶中培养基的配制灭菌3组：组：单倍乳糖发酵培养基：单倍乳糖发酵培养基： 600 mL600 mL 分装至试管分装至试管6060支；支；三倍乳糖发酵培

6、养基：三倍乳糖发酵培养基：300 mL300 mL 分装至试管分装至试管3030支；支；培养基的配制灭菌4组：伊红美兰培养基：伊红美兰培养基：400mL 分装至三角瓶中；分装至三角瓶中；培养基的配制灭菌90mL无菌水：无菌水：250mL三角烧瓶（加石子），精确加三角烧瓶（加石子），精确加水水90.0mL；塞上棉塞，包扎、灭菌备用；塞上棉塞，包扎、灭菌备用； 1个个/组；组；试管无菌水：试管精确加水试管无菌水：试管精确加水9.0mL，塞上棉塞，包扎、，塞上棉塞，包扎、灭菌备用灭菌备用:（14支支/组）；组）；250ml空三角瓶：空三角瓶：1个个/组；灭菌后取样用；组；灭菌后取样用；1mL 无菌吸管无菌吸管: 20-30支支/组；组；10mL