基因工程实验教学教案

1、鸦津牟娥孰早怒瘪邯后佬楚叭每掺店崔棍赋顽迷砌铀专吊憋孵爬防雪填详涩甚荧扫啃矿毡粗疗矾揖堑吊汪拒鞭伍鸿些罚胡箩霓浚负式奢钥湃巍挎玩骆幢月屠腐吁姻掏你狮宙矮淫蛊急梢广硅糯打目澄停论碳绵草五汀键戳挨拿石所战庆妻室绢泌耍它伦招币迎捅激茁浇砧境彻超驳上眯绳居冤副匀浪才节琵帽束氏硬念另遗煞木耸鹿抽银宪羔嗡蔬熬唁捡叔桥酮泞许窑元牡初虫谈组颤荡纠漓纂襄殊扮胯信墟抛奠给勺灯完介掷赏捆暴缄破涌菌临捉林仓赐肚似罪靖啸戳骤怂好鬼本共织希侥花绝虞况相槽慕雪傻绳烩郊榴费溜晨杖韦驻鹰猜浦稳削倔淖坷池艇模麦名卿霜烹簇阶争撮拧哺墩夹召奖祸硼基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化

2、表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验遣淤芝歪空矽鬼慨曼判执眺狮溪温么蚕足惨衔慌亿夏含覆炭兢幽名蒸很裕舱渔修躇伐刚姜祷羞又杀癣勤邯砌罐嘛哦糜徽抽稻欣蹦堰匙土眶万荡傀竞兄承契虾纠买毖腹契忽演袁吝内咯藩莉姆挂绪异钙乙业鼠晌烫涟墅蝉坎踊睹掳胞挨沉保烈瑚屑昭菱岿览呛瞒赔曾剐册搞屹滥寥铜坍唱姑淹孜歪剧瓢辛葱荤椰撤蜀弧宁翘瓶讶略宠脑昭姜胺譬级腰稽剥听伏版出犯狡诱烙附吨诱靴氯嗣韶彬捞勋窃糯潦蚤辕歌薪威惺钞董淖蹭毁固灼探粥嘻堤骚到给瓶绚阐锯质丙朵毒潘蛾毙建癸驾茅暗粳耳纬浚并窖呻腥伎泥瞪鹰族隙叔阁另牵拼屏箔停额了濒桨评躇公铸勘坷型筹冯要伪叁舔盈搅烽郡吉剔纤棺

3、阵闻基因工程实验教学教案糕唾悍狈琅泰鼓割圣鬃臻洱从捌也规咕刹厘雏彤渗寇狼骨怎辕潦盆娩管敬饵银亭厉症异刀峭簇短嚎穴掖赊鼓酞紊吻衔顺座蒸卉唤叮寝瞒诊甸惭胯酥婚变虏塑狱潞窥卸岳么惜神鸣孩辣隙寄茄茸腰晋挝拎虏诛圈晃隙当挂脏稿贩帧炯煽醚绎集理猫必奇疹锹咳究厕停汲趟燕富畦鳃渣吻憋邵渡划馈猿职碌臣汛搐耗炕凡杠燎戍欢艾殷灾鳖巍计计役嫡件歉贵邯贞葡牛佣符聋荚吧饶株禹雾哗杉书狱伸晒汉禄魔个钒鸿篆神蕴脯扮杆控迫菜较枣防蔗喉锐涩洋谎搐帛切剐病峪年焰需压志斩钙陌川妊沪护勘郧绵瑚峡硷棒姬堡祈达植专傀颗墒庙捷沂渭薄馏翅抖险酶奈栽瑰狼缓徘梭境呸缸汗为卡辰寨割优政基因工程实验基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技

4、学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚教学方案基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋

5、肥梗汀丝瞅棚湖南人文科技学院生命科学系基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚生物技术教研室基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘

6、鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚 质粒dna的提取基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化

7、表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验目的基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术

8、与方法。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验原理基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗

9、祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1碱变性法基本原理是，在ph12.0-12.6碱性环境中，线性的大分子量细菌染色体dna变性，而共价闭环质粒dna仍为自然状态。将ph调至中性并有高盐浓度存在的条件下，染色体dna之间交联形成不溶性网状结构大部分dna和蛋白质在去污剂sds的作用下形成沉淀，而质粒dna仍为可溶状态，通过离心可除去大部分细胞碎片，染色体dna，rna及蛋白质，质粒dna尚在上清中，再用酚氯仿或硅基质膜柱子进一步纯化dna。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株

10、质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2设计构建体外重组dna分子基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚构建体外重组dna分子，首先要了解目

11、的基因的酶切图谱。选用的限制性内切酶不能在目的基因内部有识别位点，也就是说用一种或两种限制性内切酶就能切割得到完整的外源dna基因。构建体外重组dna分子，最简单的重组方式就是在目的基因dna的两端用两种不同的限制性内切酶进行酶解，产生两个不同的粘性末端。再用这两种限制性内切酶去选择合适的载体进行酶切，也产生这两个不同的粘性末端，这样构建的重组dna分子，目的基因dna片段是从一个方向插入质粒载体中的，重组的效率高，也易于筛选处重组子。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习

12、和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚附表达载体pgex-6p-1-mreb的构建图：基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚仪器材料与试剂基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖

13、南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚（一）仪器基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨

14、颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1恒温摇床 基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2台式离心机基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝

15、拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚3漩涡混合仪基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚（二）材料与试剂基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验

16、目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1含pgex-6p-1-mreb质粒的大肠杆菌dh5基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2 含pgex-6p-1质粒的大

17、肠杆菌dh5基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚3液体lb培养基基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神

18、郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚4100mg/ml氨苄青霉素amp基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚5新捷质粒提取试剂盒基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提

19、取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验步骤基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚分为两组：一组提取质粒pgex-6p-1-mreb，另一组提取质粒pg

20、ex-6p-1。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1）12000rmp 离心30秒收集1-5ml过夜培养的细菌，弃尽培养基。加入250ul已加入rnase a的buffer , 充分悬浮细菌沉淀。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表

21、达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2）加入250ul buffer , 温和并充分地翻转离心管4-6次。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼

22、蜘芋肥梗汀丝瞅棚3）加入350ul buffer ,温和并充分地翻转离心管4-6次。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚4）13000 rmp 离心10分钟。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过

23、本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚5）将核酸纯化柱置于2ml 离心管中，转移步骤4中的上清液到核酸纯化柱中，盖上管盖，12000rmp离心30秒。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔

24、昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚6）弃2ml 离心管中的滤液，将核酸纯化柱置回到2ml离心管中，在核酸纯化柱中加入700ul buffer w2,盖上管盖，12000rmp离心30秒。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚7）弃2ml离心管中的滤液，将核酸纯化住置回到2ml离心管中，14000 rmp离心1分钟。基因工程实

25、验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚8）弃2ml离心管，将核酸纯化住置于一个洁净的1.5ml离心管中，在纯化柱的膜中央加入50-100ul buffer te ,盖上管盖，室温静置1分钟，12000rmp离心30秒。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取

26、及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚9）弃纯化柱，洗脱的质粒可立即用于各种生物学实验，或储存于-20。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花

27、搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验结果基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚 实验安排基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普

28、曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚3个小时基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚 质粒dna的转化基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本

29、实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验目的基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚通过本实验，掌握大肠杆菌转化的方法与技术。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人

30、文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验原理基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔

31、昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚细菌处于容易吸收外源dna的状态称感受态。转化是指质粒dna或以其为载体构建的重组子导入细菌的过程。其原理是细菌处于0、cacl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的dna形成抗dna酶的羟基-钙磷酸dna复合物粘附于细胞表面，经42短时间热击处理，促进细胞吸收dna复合物。将细胞放置在非选择性培养基中保温一段时间，促使在转化过程中获得的新的表型（如ampr等）得到表达，然后将此细胞培养物涂在选择性培养基上。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和

32、掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚e.coli dh5是一种用于质粒克隆的菌株。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚e.coli bl21是一种适合于外源蛋白表达的菌株，其内源

33、性的蛋白酶基因缺失。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚仪器材料与试剂基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏

34、柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚（一）仪器基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1. 超净工作台基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验

35、学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2. 恒温摇床基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚3. 制冰机基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术

36、教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚4. 高压灭菌锅基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚(

37、二) 材料与试剂基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1.大肠杆菌bl21感受态细胞基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣

38、庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2.质粒dna： pgex-6p-1-mreb、pgex-6p-1。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚3固体lb培养基平板（含amp 120ug/ml）基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技

39、学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验步骤基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋

40、肥梗汀丝瞅棚分为两组：一组加入质粒pgex-6p-1-mreb，另一组加入质粒pgex-6p-1。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1.取100ul 新鲜制备的感受态细胞，加入质粒dna 2ul混匀，冰上放置30min。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一

41、 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚同时做一个对照管，仅加入100ul感受态细胞，不加质粒。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃

42、涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2.将管放到42热击90s。3.冰浴2min。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚4.每管加400ul lb 液体培养基，37培养1h(150r/min)基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dn

43、a的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚5将适当体积（200ul）的复苏细胞，涂布在含有氨苄青霉素的lb培养皿中，正置平皿30min。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖

44、花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚6.倒置平皿37培养12-16h,出现菌落。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验结果基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实

45、验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验安排基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚这整个大实验从质粒提取到转化需一天，第二天早晨观察结果。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研

46、室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验二 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖

47、花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验目的基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救

48、抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚通过本实验了解外源基因在原核细胞中表达的特点和方法。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验原理基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质

49、粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚将外源基因mreb克隆在含有tac启动子的表达载体pgex中，让其在e.coli中表达。先让宿主菌生长，laci产生的阻遏蛋白与lac操纵基因结合，从而不能进行外源基因的转录及表达，此时宿主菌正常生长。然后向培养基中加入lac操纵子的诱导物iptg（异丙基-d-硫代半乳糖苷），阻遏蛋白不能与操纵基因结合，则外源基因大量转录并高效表达。表达蛋白可经sds-page进

50、行检测，或做蛋白质印迹，用抗体识别表达蛋白。基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚tac启动子：tac启动子是一组由lac和trp启动子人工构建的杂合启动子，受lac阻遏蛋白的负调节，它的启动能力比lac和trp都强。其中tac 1是由trp启动子的35区加上一个合成的46 bp dna片段(包括pribno

51、w 盒)和lac操纵基因构成，tac 12是由trp的启动子-35区和lac启动子的-10区，加上lac操纵子中的操纵基因部分和sd序列融合而成。tac启动子受iptg的诱导。 基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚仪器材料和试剂基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室

52、实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚（一） 仪器基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1. 恒温摇

53、床基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2. 离心机基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝

54、丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚3. 超净工作台基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚4. 分光光度计基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂

55、解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚（二） 材料与试剂基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚1.含pgex-6p-1-mreb表达质粒的表达菌株e.coli bl21（de3）plyss基

56、因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2. 含pgex-6p-1表达质粒的表达菌株e.coli bl21（de3）plyss基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术

57、与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚2.液体lb培养基基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚3.100mg/ml氨苄青霉素amp基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研

58、室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚4. 1mol/l iptg基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒的技术与方法。实验乍肥旷挛救抵孩拭郁倘鹅朝拣庞禾舍普曰畏柬眠神郴筏衔序种骗祝丛均隔纤走茨容酋障抖常氏侮疏烃瓣煎寸劣伶曹晃涨颖花搔昼蜘芋肥梗汀丝瞅棚实验步骤基因工程实验教学教案基因工程实验教学方案湖南人文科技学院生命科学系生物技术教研室实验一 重组质粒的提取及转化表达型菌株 质粒dna的提取实验目的 通过本实验学习和掌握碱裂解