国家自然科学基金项目申报的体会

1、 国家自然科学基金项目申报的体会国家自然科学基金项目申报的体会 南京医科大学基础医学院南京医科大学基础医学院 朱昌亮朱昌亮 国家自然科学基金项目申报的体会国家自然科学基金项目申报的体会 1. 确定目标确定目标 2. 做好申报的准备工作做好申报的准备工作 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写 4. 常见的问题常见的问题 1. 确定目标确定目标n 个人个人、学科、单位发展的需要、学科、单位发展的需要n 学术水平提高的过程学术水平提高的过程n 正确认识不中标的原因正确认识不中标的原因 失败是成功之母失败是成功之母 2. 做好申报的准备工作做好申报的准备工作n 掌握国内外研究动态掌握国内外研究动态* *

2、n 选好切入点选好切入点n 加强工作积累，显现特色与优势加强工作积累，显现特色与优势 n 掌握国内外研究动态掌握国内外研究动态n 文献阅读文献阅读n 国家自然科学基金当年度资助项目国家自然科学基金当年度资助项目n 国家自然科学基金下年度项目指南国家自然科学基金下年度项目指南 n文献阅读文献阅读Science, Nature, PNAS, JBCScience, Nature, PNAS, JBC科学通报，科学通报， 中国科学（中国科学（C C辑）辑） 生物化学与生物物理学报（生物化学与生物物理学报（Acta Bioch Bioph SinActa Bioch Bioph Sin） 生物化学与生

3、物物理进展生物化学与生物物理进展n了解生命科学发展趋势，帮助选择切入点了解生命科学发展趋势，帮助选择切入点n学习创新思维学习创新思维, , 拓展科研思路拓展科研思路n学习研究方法与实验设计学习研究方法与实验设计掌握国内外研究动态 寄生虫感染与哮喘寄生虫感染与哮喘nChitin是真菌是真菌,节肢动物和某些寄生虫体表的组成部分。在原核生物和简单的真核节肢动物和某些寄生虫体表的组成部分。在原核生物和简单的真核生物中，其产生生物中，其产生Chitin酶分解酶分解Chitin，帮助防止寄生虫的感染。，帮助防止寄生虫的感染。n哺乳动物也能产生哺乳动物也能产生Chitin酶，但其作用一直不清楚。酶，但其作用

4、一直不清楚。 作者注意到作者注意到, 低等生物对寄生虫的免疫反应与哺乳动物涉及哮喘的免疫反应有相似低等生物对寄生虫的免疫反应与哺乳动物涉及哮喘的免疫反应有相似之处之处，因此推测哺乳动物，因此推测哺乳动物Chitin酶可能与哮喘有关。作者实验发现酶可能与哮喘有关。作者实验发现, Chitin酶在哮酶在哮喘病人和哮喘模型小鼠的肺组织中明显高表达，提示人的喘病人和哮喘模型小鼠的肺组织中明显高表达，提示人的Chitin酶可能是抗哮喘药酶可能是抗哮喘药物的有用靶标。物的有用靶标。 作者进一步推测，在幼儿阶段受富含作者进一步推测，在幼儿阶段受富含Chitin的病原体的病原体(寄生虫寄生虫)感染的减少，也许

5、会感染的减少，也许会使儿童易感哮喘。这与流行病学数据是一致的。使儿童易感哮喘。这与流行病学数据是一致的。 本研究将低等动物抗寄生虫能力与人类哮喘病联系起来，研究结果为哮喘病的新本研究将低等动物抗寄生虫能力与人类哮喘病联系起来，研究结果为哮喘病的新药开发提供了新线索。药开发提供了新线索。 Zhu Z, et al. Zhu Z, et al. ScienceScience 2004; 304: 1678 - 1682 2004; 304: 1678 - 1682 掌握国内外研究动态n2006年度十大科学进展之一年度十大科学进展之一 新一类的小新一类的小RNA: 科学家发现了一类关闭基因表达的新小

6、科学家发现了一类关闭基因表达的新小RNA 分子，命名为分子，命名为 “Piwi-干扰干扰 RNA” n值得注意的领域值得注意的领域 整基因组相关性研究、比较灵长类的基因组整基因组相关性研究、比较灵长类的基因组 - Science Science 20062006；314314：58075807 掌握国内外研究动态n国家自然科学基金年度资助项目一览表国家自然科学基金年度资助项目一览表 ( “生命科学生命科学” 第第6 6期期) ) 了解生命科学整体和本学科的研究动态了解生命科学整体和本学科的研究动态, ,如如n 基因克隆基因克隆 （19981998）n 基因芯片基因芯片 （19991999）n

7、功能基因组功能基因组 （20002000）n 蛋白质组蛋白质组 （20012001）n RNAi RNAi （20022002）n 细胞和分子的功能研究细胞和分子的功能研究 （2002003 3以后）以后） 掌握国内外研究动态n 国家自然科学基金项目指南国家自然科学基金项目指南 n资助方向资助方向n学科学科现状，存在的问题，鼓励研究的领域现状，存在的问题，鼓励研究的领域n标书的学科投向标书的学科投向 掌握国内外研究动态n国家自然科学基金资助方向国家自然科学基金资助方向n 国家自然科学基金作为我国支持基础研究的主渠道国家自然科学基金作为我国支持基础研究的主渠道 之一，面向全国，重点资助具有良好研

8、究条件、研之一，面向全国，重点资助具有良好研究条件、研 究实力的高等院校中和科研机构中的研究人员究实力的高等院校中和科研机构中的研究人员 - 20072007年度国家自然科学基金项目指南年度国家自然科学基金项目指南. .前言前言掌握国内外研究动态n 国家自然科学基金项目指南国家自然科学基金项目指南 n资助方向资助方向n学科学科现状，存在的问题，鼓励研究的领域现状，存在的问题，鼓励研究的领域n标书的学科投向标书的学科投向 掌握国内外研究动态 3.3.重视标书的撰写重视标书的撰写n 简表简表, , 摘要摘要n 立论依据立论依据* *n 研究目标、研究内容和拟解决的关键问题研究目标、研究内容和拟解决

9、的关键问题n 研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析* *n 创新之处创新之处n 年度研究计划及预期进展年度研究计划及预期进展n 预期研究成果预期研究成果n 研究基础研究基础* *n 经费预算经费预算n 正在承担的其它研究项目正在承担的其它研究项目 n 简表简表 项目组成员（项目组成员（4-64-6人）人）n 摘要摘要 研究目标、方法、内容及科学意义等研究目标、方法、内容及科学意义等 （限（限400400字）字） 3. 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写 n 立论依据立论依据* * 对基础研究，论述项目科学意义对基础研究，论述项目科学意义; ; 对应用

10、基础研究，着重对应用基础研究，着重 论述其应用前景论述其应用前景n 做什么？做什么？ 提出科学问题（假说）提出科学问题（假说）n 为什么做？为什么做？围绕科学问题围绕科学问题, ,详细论述国内外研究现状、存在详细论述国内外研究现状、存在 的问题及发展趋势的问题及发展趋势, , 阐明重要性阐明重要性, ,必要性必要性n 如何做？如何做？ 对拟采用的新技术方法进行介绍和分析。提出本对拟采用的新技术方法进行介绍和分析。提出本 项目的研究设想项目的研究设想n 创新性与科学意义创新性与科学意义3. 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写 需要注意的问题需要注意的问题n 文字表述文字表述n 通俗通俗( (高级

11、科普高级科普) )n 逻辑性和层次感逻辑性和层次感( (对科学意义阐述对科学意义阐述: :重要性重要性, ,必要性必要性, ,迫切性迫切性) )n 简洁简洁, ,准确准确( (如如尚无报道尚无报道, ,未发生未发生, ,首次首次, ,报道甚少等报道甚少等) )n 重点突出重点突出( (导读导读) )立论依据立论依据 新的蚊抗药性基因的功能研究新的蚊抗药性基因的功能研究 - - 立论依据立论依据本研究目的在于本研究目的在于验证以下科学假说验证以下科学假说：昆虫对杀虫剂的抗性是多基因或基因群决定的昆虫对杀虫剂的抗性是多基因或基因群决定的。化学防治一直是媒介综合治理策略中的主要方法。杀虫剂的大量、连

12、续使用导致了媒介抗药性的发生和发展。化学防治一直是媒介综合治理策略中的主要方法。杀虫剂的大量、连续使用导致了媒介抗药性的发生和发展。WHOWHO报告，在全世界范围内已有报告，在全世界范围内已有146146种媒介昆虫对不同杀虫剂产生了抗性种媒介昆虫对不同杀虫剂产生了抗性11。媒介抗药性及其导致的环境改变加剧了虫媒。媒介抗药性及其导致的环境改变加剧了虫媒病传播的恶化趋势。然而，由于化学防治容易操作，能够迅速、有效地控制猖獗的害虫种群，迄今乃至今后相当长的病传播的恶化趋势。然而，由于化学防治容易操作，能够迅速、有效地控制猖獗的害虫种群，迄今乃至今后相当长的一段时期内无疑仍是媒介综合治理的主要方法之一

13、。因此一段时期内无疑仍是媒介综合治理的主要方法之一。因此媒介抗药性已成为国内外虫媒病防治中的突出问题媒介抗药性已成为国内外虫媒病防治中的突出问题2-42-4。抗药性是由基因决定的。抗药性是由基因决定的。- - 多年来媒介抗药性研究进展不大，其根本原因是抗药性的分子基础所知甚少。多年来媒介抗药性研究进展不大，其根本原因是抗药性的分子基础所知甚少。克隆克隆抗药性基因一直是研究热点抗药性基因一直是研究热点5,65,6。近近2020多年来，国外研究者采用经典的多年来，国外研究者采用经典的“功能克隆功能克隆”法（从已知功能蛋白质克隆基因的策略）仅克隆到个别昆虫抗法（从已知功能蛋白质克隆基因的策略）仅克隆

14、到个别昆虫抗性相关基因，仅能从性相关基因，仅能从“点点” 的层面上认识抗药性的层面上认识抗药性, , 致使抗药性研究长期进展缓慢致使抗药性研究长期进展缓慢 33，66。当前存在的问题是需要采当前存在的问题是需要采用大通量方法克隆抗药性基因用大通量方法克隆抗药性基因, ,进而从进而从“面面” 或整体或整体的层面上认识抗药性、阐明抗药性的分子基础的层面上认识抗药性、阐明抗药性的分子基础。新近，新近，DiatchenkoDiatchenko等（等（1996,19991996,1999）建立并改进了抑制性差减杂交（）建立并改进了抑制性差减杂交（suppression subtractive hybri

15、dizationsuppression subtractive hybridization，SSHSSH）这一）这一“表型克隆表型克隆”新策略。该法无须事先了解基因的蛋白质结构和功能等背景资料，仅根据表型便可直接分离目新策略。该法无须事先了解基因的蛋白质结构和功能等背景资料，仅根据表型便可直接分离目的基因的基因77，88。 cDNAcDNA芯片是近年发展起来的分析基因表达图式的新方法，其可高效、快速地同时测定大通量基因的时芯片是近年发展起来的分析基因表达图式的新方法，其可高效、快速地同时测定大通量基因的时空表达信息，空表达信息， 并且杂交点可经信号检测仪定量测定与经相应软件分析并且杂交点可经信

16、号检测仪定量测定与经相应软件分析99。SSH SSH 结合结合 cDNA cDNA 芯片是目前发展的目的基芯片是目前发展的目的基因分离、鉴定的最佳策略之一因分离、鉴定的最佳策略之一。迄今已见到国外用于疾病基因研究的。迄今已见到国外用于疾病基因研究的 3 3 篇报告篇报告10-1210-12，寄生虫学与昆虫学研究领域，寄生虫学与昆虫学研究领域尚未见报道尚未见报道。本实验室本实验室19991999年在国家自然科学基金（批准号：年在国家自然科学基金（批准号：3997066639970666）的资助下，采用）的资助下，采用SSH SSH 结合结合cDNAcDNA芯片法，芯片法， 从我国重要传从我国重要

17、传病媒介淡色库蚊病媒介淡色库蚊( (Culex pipiens pallensCulex pipiens pallens) )对常用菊酯类杀虫剂溴氰菊酯抗性品系分离并鉴定了对常用菊酯类杀虫剂溴氰菊酯抗性品系分离并鉴定了1515个表达差异的抗性相个表达差异的抗性相关新序列（关新序列（GenBank/NCBI, 2000GenBank/NCBI, 2000年）；大部分新序列未检索到同源基因或相关蛋白，线粒体年）；大部分新序列未检索到同源基因或相关蛋白，线粒体rRNArRNA基因、胰蛋白酶前体基因、胰蛋白酶前体基因、糜蛋白酶基因、糜蛋白酶A A前体基因和视蛋白基因等同源基因在抗性品系中高表达。前体基

18、因和视蛋白基因等同源基因在抗性品系中高表达。结果提示：昆虫抗药性可能涉及的并非个别结果提示：昆虫抗药性可能涉及的并非个别基因，而是多基因或基因群基因，而是多基因或基因群13,1413,14。本项目拟在以上工作的基础上，进一步获取抗性相关克隆的全长序列本项目拟在以上工作的基础上，进一步获取抗性相关克隆的全长序列, ,以抗性相关基因转染及共转染蚊细胞系，研以抗性相关基因转染及共转染蚊细胞系，研究基因功能究基因功能1414，进而鉴定蚊虫抗药性基因。，进而鉴定蚊虫抗药性基因。本项目拟鉴定的抗药性基因对于媒介抗药性检测、抗药性的分子机理研究和抗药性基因资源的开发和利用等具有本项目拟鉴定的抗药性基因对于媒

19、介抗药性检测、抗药性的分子机理研究和抗药性基因资源的开发和利用等具有重要意义；本项目可望发现一批新基因，为我国在国际寄生虫重要意义；本项目可望发现一批新基因，为我国在国际寄生虫/ /昆虫基因组计划中抢占一席之地作出贡献。昆虫基因组计划中抢占一席之地作出贡献。 - - 国家自然科学基金国家自然科学基金 3017083530170835 需要注意的问题需要注意的问题n 文字表述文字表述n 通俗通俗( (高级科普高级科普) )n 逻辑性和层次感逻辑性和层次感( (对科学意义阐述对科学意义阐述: :重要性重要性, ,必要性必要性, ,迫切性迫切性) )n 简洁简洁, ,准确准确( (如如尚无报道尚无报

20、道, ,未发生未发生, ,首次首次, ,报道甚少等报道甚少等) )n 重点突出重点突出( (导读导读) )n 篇幅篇幅, , 图文并茂图文并茂n 参考文献参考文献n 规范规范 ( (格式一致等格式一致等) )立论依据立论依据 参考文献格式参考文献格式 哈佛格式哈佛格式 Mouches, C., Pasteur, N., Berge, J.B., & 3 others (1986). Amplification of an esterase gene is responsible for insecticide resistance in a California Culex mosqu

21、ito. Science, 233, 778 温哥华格式温哥华格式 “ 生物医学期刊投稿的统一要求生物医学期刊投稿的统一要求 ”，19791 . Mouches C, Pasteur N, Berge JB, et al. Amplification of an esterase gene is responsible for insecticide resistance in a California Culex mosquito. Science 1986; 233:778-80立论依据立论依据 主要参考文献主要参考文献 3.Hemingway J, Field L, Vontas J.

22、3.Hemingway J, Field L, Vontas J. ScienceScience 2002 2002，298:92-6298:92-6 4.Couzin J. 4.Couzin J. Science Science 2002; 298: 2293-62002; 298: 2293-6 5.Dennis C. 5.Dennis C. NatureNature 2002; 420: 732-741 2002; 420: 732-741 6.Kennerdell JR, Carthew RW. Nature Bio6.Kennerdell JR, Carthew RW. Nature

23、 Bio 2000; 18:8962000; 18:896 7.Aoki Y, et al. 7.Aoki Y, et al. Clin.Exp.Pharmacol.Physiol, Clin.Exp.Pharmacol.Physiol, 2003; 30:962003; 30:96 8.Doi, N., Zenno, S., Ueda, R., et al. 8.Doi, N., Zenno, S., Ueda, R., et al. Curr Biol Curr Biol 20032003（6 6）; 13:41; 13:41 9.Paula S, Petr S, Martin A, et

24、 al. RNA 9.Paula S, Petr S, Martin A, et al. RNA 2003; 9:1872003; 9:187 10.Kawasaki H, Kazunari T. 10.Kawasaki H, Kazunari T. Nucleic Acids Res 2003; 31:700 Nucleic Acids Res 2003; 31:700 11.Mathhew NA, Shale D, Jeffrey G, et al. 11.Mathhew NA, Shale D, Jeffrey G, et al. RNA RNA 2003; 9:252003; 9:25

25、 12.M Scherr, Morgan MA, Eder M. 12.M Scherr, Morgan MA, Eder M. Curr Med Chem Curr Med Chem 2003; 10:2452003; 10:245 13.MT Hemann, Fridman JS, Zilfou JT, et al. 13.MT Hemann, Fridman JS, Zilfou JT, et al.Nature Genetics Nature Genetics 2003;33:3962003;33:396 14.Kapadia SB, Andersen AB, Chisari FV.

26、14.Kapadia SB, Andersen AB, Chisari FV. PNAS PNAS 2003; 100:2014-2020 2003; 100:2014-2020 15.Qingmei J, Sun R. 15.Qingmei J, Sun R. J Virol J Virol 2003; 77:3301-112003; 77:3301-11 16.Lawrence D. 16.Lawrence D. LancetLancet 2002; 359:2007-2013 2002; 359:2007-2013 立论依据立论依据 需要注意的问题需要注意的问题n 文字表述文字表述n 通

27、俗通俗( (高级科普高级科普) )n 逻辑性和层次感逻辑性和层次感( (对科学意义阐述对科学意义阐述: :重要性重要性, ,必要性必要性, ,迫切性迫切性) )n 简洁简洁, ,准确准确( (如如尚无报道尚无报道, ,未发生未发生, ,首次首次, ,报道甚少等报道甚少等) )n 重点突出重点突出( (导读导读) )n 篇幅篇幅, , 图文并茂图文并茂n 参考文献参考文献n 规范规范 ( (格式一致等格式一致等) )n 注意引用最新国外权威文献注意引用最新国外权威文献n 注意引用国内同行知名专家的成果注意引用国内同行知名专家的成果 立论依据立论依据 n 研究目标、研究内容和拟解决的关键问题研究目

28、标、研究内容和拟解决的关键问题n 研究目标研究目标 回答回答1 1个科学问题个科学问题n 研究内容研究内容 围绕研究目标围绕研究目标, ,根据根据1 1个研究周期、资助强度确定个研究周期、资助强度确定n 拟解决的关键问题拟解决的关键问题 与实现预期目标和完成研究内容有关的与实现预期目标和完成研究内容有关的 关键技术或研究手段关键技术或研究手段, , 写出解决办法写出解决办法( (参考文献参考文献) ) 需要注意的问题需要注意的问题n 研究目标应集中研究目标应集中n 避免研究内容过多避免研究内容过多n 研究内容篇幅适度，避免与技术路线、实验方案过多重复研究内容篇幅适度，避免与技术路线、实验方案过

29、多重复n 拟解决的关键问题不宜多拟解决的关键问题不宜多, ,以以2 2个为宜个为宜3. 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写 n 研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析* *n 研究方法研究方法 简述主要技术方法简述主要技术方法n 技术路线技术路线 设计技术路线流程图设计技术路线流程图n 实验方案实验方案 以研究内容为主线以研究内容为主线, ,分级标题，顺序叙述具体步骤分级标题，顺序叙述具体步骤n 可行性分析可行性分析* *u 理论分析理论分析u 研究手段、方法及所用特殊实验材料（试剂）的分析研究手段、方法及所用特殊实验材料（试剂）的分析u 所具备实验室

30、条件的分析所具备实验室条件的分析u 项目组成员研究背景项目组成员研究背景( (包括运用相关技术方法的能力包括运用相关技术方法的能力) )分析分析u 预实验结果分析预实验结果分析3. 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写 n 创新之处创新之处n 原始创新原始创新 填补空白或修改传统的理论填补空白或修改传统的理论 新技术、新方法的发明创造新技术、新方法的发明创造n 跟踪创新跟踪创新 在前人工作基础上补充、完善现有理论在前人工作基础上补充、完善现有理论 进一步完善原有技术、方法进一步完善原有技术、方法n 需要注意的问题需要注意的问题 应低调描述应低调描述, ,避免自我评价过高避免自我评价过高3. 3.

31、 重视标书的撰写重视标书的撰写 n 年度研究计划及预期研究成果年度研究计划及预期研究成果n 年度研究计划年度研究计划 按年度列出研究内容及其阶段性目标按年度列出研究内容及其阶段性目标 重要学术交流活动、国际合作计划等重要学术交流活动、国际合作计划等n 预期研究成果预期研究成果 理论成果理论成果, ,技术方法技术方法; ; 专利专利, ,论文论文; ; 人才培养人才培养n 需要注意的问题需要注意的问题 避免预期值过高避免预期值过高 3. 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写 n 研究基础研究基础* *n与本项目与本项目直接有关直接有关的研究工作积累和已取得的成绩的研究工作积累和已取得的成绩 ( (

32、有关项目、论文、成果、专利及应用有关技术方法的经历有关项目、论文、成果、专利及应用有关技术方法的经历) )n已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟解决的途径已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟解决的途径 n申请者和项目组主要成员的学历和研究简历，近期承担的与申请者和项目组主要成员的学历和研究简历，近期承担的与本项目本项目有关有关的项目、发表的主要论文和获得学术奖励情况及的项目、发表的主要论文和获得学术奖励情况及在本项目中承担的任务在本项目中承担的任务n需要注意的问题需要注意的问题 避免申请者实验条件、工作基础、学术避免申请者实验条件、工作基础、学术水平与地位等的不恰当描述水平与地位等的不恰当

33、描述 3. 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写 n 经费预算经费预算n 28-3528-35万元万元n 不列或少列仪器设备费和实验室改装费为宜不列或少列仪器设备费和实验室改装费为宜n 正在正在承担承担的其它研究项目的其它研究项目n 与本项目直接有关的研究项目，应与本项目直接有关的研究项目，应阐明区别阐明区别n 间接有关项目间接有关项目, ,应应阐明与本项目的关系阐明与本项目的关系3. 3. 重视标书的撰写重视标书的撰写4. 常见的问题常见的问题 n 缺乏工作基础缺乏工作基础n 无明显的特色与优势无明显的特色与优势n 研究研究内容偏多内容偏多n 自我评价不恰当自我评价不恰当n 写作问题写作问题( (论理不清楚论理不清楚, ,层次不够等层次不够等) ) 基础医学院近基础医学院近5 5年年国家自