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文档简介

1、乙肝病毒表面抗原及乙肝病毒表面抗原及Pre-S2抗原的检测抗原的检测指导老师：韩秀霞 王云 小组成员：王嘉怡 田东兴 苏倩倩 尚庆娟三、拟采取的技术路线及实验方案三、拟采取的技术路线及实验方案 l基本原理 l1、时间分辨l2、Stokes位移l3、发射光谱和激发光谱l4、荧光标记物的相对比活性l5、信号增强器材与试剂器材与试剂l标本：患者血清l标记物：镧系元素铕(Eu3+)l包被缓冲液：0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液l洗涤缓冲液l聚苯乙烯板实验步骤实验步骤 l1、参考标准品的耐备 l2、标记 l3、双抗体夹心法 四、预期结果四、预期结果 l1、标准曲线分析范围和分析灵敏度 100ul不同

2、浓度标准HBsAg分析结果表明，线性范围是0.2-300 ng/m1，以20个零标准的荧光值的平均值加上2倍标准偏差在标准曲线上算出HBsAg-TRFIA分析的灵敏度是0.05ng/ml。l2、重复性 1个月内标准曲线重复20次。每次每个标准点3个复孔，批内变异系数(cv)是3,43，批间变异系数(cv)是5.64。l3、方法准确性 在3种已知浓度的HbsAg浓度血清样品中加入1 ngml的标准HBsAg。测定回收率分别为101.4，106.7，98.1。1l4、方法评价 时间分辨荧光免疫分析法是继放免、酶标、化学发光、电化学发光后的一项新兴的标记免疫检测方法,该技术灵敏度可高达1018 mol/L, 针对于HBsAg 最低检出量均可达0.2 ng/mL, TRFIA 法高灵敏度主要取决于它所用标志物的独一无二的物理性质及化学性质:标志物体积很小,标记后不会影响被标志物的空间立体结构,保证了被检测物质的稳定性,因此具备了高稳定性干扰因素少等优点2。其不足之处是易受环境、试剂和容器中的镧系元素离子的污染，使检测本底升高。请老师同学批评指正双抗体夹心法双抗体夹心法1、时间分辨、时间分辨5、信号增强、信号增强荧光增强荧光增强结合结合-二酮体二酮体 Eu Eu3+

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