白细胞计数2课件分享

1、白细胞计数 (2)（课件分享）作者：作者：dr.fengdr.feng白细胞计数 (2)（课件分享）2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）2实验一、实验一、 白细胞计数白细胞计数 n1.原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞，在血细原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞，在血细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数，换算成每升血液胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数，换算成每升血液中白细胞数。中白细胞数。n2.试剂器材试剂器材 白细胞稀释液：冰乙酸白细胞稀释液：冰乙酸 2.0ml 10g/l亚甲蓝亚甲蓝 3滴滴 加蒸馏水加蒸馏水 至至100ml2020-12-24白细胞计数

2、(2)（课件分享）3器材器材 改良牛鲍血细胞计数板及专用改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片、微量吸管、带孔盖片、微量吸管、带孔吸头、吸头、1ml刻度移液管、刻度移液管、小试管、洁净软纱布、小试管、洁净软纱布、干棉球、光学显微镜。干棉球、光学显微镜。2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）42020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）52020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）6毛细血管采血标准操作程序毛细血管采血标准操作程序 操作步骤：操作步骤：n1 采血部位成人以左手无名指内侧为宜，半岁以下婴幼儿通常采血部位成人以左手无名指内侧为宜，半岁以下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟两侧

3、采血。自拇指内侧或足跟两侧采血。n2 轻轻按摩采血部位。轻轻按摩采血部位。n3 用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）74 紧捏刺血部位，使其自然充血。紧捏刺血部位，使其自然充血。5 用无菌刺针穿刺取血，动作应迅速，深度用无菌刺针穿刺取血，动作应迅速，深度 23mm，稍加挤压，稍加挤压以血液流出为宜。以血液流出为宜。6 用干棉球擦去第一滴血。用干棉球擦去第一滴血。7 按需要依次采血。按需要依次采血。8 采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片刻。采血完毕，用干棉球压住伤口，止血片刻。2020-12-24白细胞计数 (2)

4、（课件分享）8 微量吸管的使用微量吸管的使用n1将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气；将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气；n2拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、中指轻微拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、中指轻微挤压排出适量空气；挤压排出适量空气；n3将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲（松动快血液会吸入将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲（松动快血液会吸入吸头），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有气泡），吸管呈吸头），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有气泡），吸管呈水平略下垂，松开示指；水平略下垂，松开示指；n4用干棉球顺吸管向下拭尽管

5、外余血（保证血量准确），轻触吸管用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血（保证血量准确），轻触吸管下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度；下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度；n5将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血液，用上将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血液，用上清液冲洗管内余血清液冲洗管内余血2-3次，轻摇试管混匀；次，轻摇试管混匀；n6拔出微量吸管弃入污物桶。拔出微量吸管弃入污物桶。2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）9 3.操作步骤操作步骤（1）加稀释液加稀释液 用移液管用移液管向小试管内加入向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。白细胞稀释液。

6、（2）采血、稀释用微量吸管采血）采血、稀释用微量吸管采血20ul，拭去管外余血，释放于小，拭去管外余血，释放于小试试 管管底部，用上部底部，用上部稀释液洗净吸管内余血，稀释液洗净吸管内余血，轻摇试管轻摇试管混匀，静混匀，静置等其溶血。置等其溶血。（3）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上。两侧支持堤上。（4）充计数池将小试管轻微振荡）充计数池将小试管轻微振荡2min，立即以一次性微量吸管吸，立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白取混匀后的白细胞悬液，充入计数池内。细胞悬液，充入计数池内。静置静置2-3min，使细

7、胞沉，使细胞沉于于计数池底面计数池底面。（5）调试显微镜）调试显微镜 将计数板放置载物台上，将计数板放置载物台上，选择（选择（4 ）低倍镜，低倍镜，调节聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，转至低倍镜调节聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，转至低倍镜（10），），调节光亮调节光亮 。（6）计数计数 低倍镜下计数四角低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数，压线细胞个大方格内白细胞总数，压线细胞数数上不数下，数左不数右上不数下，数左不数右。2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）102020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）11血细胞计数板的方格n计数板上下各一个计数池n计数区

8、域分为9个大方格n四角的大方格各划分为16个中方格n中央大方格划分为25个中方格n四角的大方格为白细胞计数区n中央大方格四角和正中5个中方格为红细胞计数区2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）12结果计算结果计算白细胞总数白细胞总数 =4大格白细胞数（大格白细胞数（n） /410 20 106 = n 20 109/l用用. 109/l（小数点后一位）表示（小数点后一位）表示2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）13 注意事项注意事项n 稀释液，小试管、计数板稀释液，小试管、计数板n 采血采血n 充池充池 n 计数原则计数原则n wbc过多过多n wbc过少过少 n w

9、bc校正校正n 显微镜调试显微镜调试 2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）145.注意事项注意事项(1).稀释液密封保存，防止污染，小试管、计数板、盖片均须清洁，稀释液密封保存，防止污染，小试管、计数板、盖片均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。以免杂质、微粒等被误认为细胞。(2).采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。采血时间太长引起血液凝固。(3).稀释液和采血量要准确，充分混匀，充液适量，无不足、外溢稀释液和采血量要准确，充分混匀，充液适量，无不足、外溢和气泡，细胞分布均匀。和

10、气泡，细胞分布均匀。(4).白细胞总数在参考范围内，大方格间的细胞数不得相差白细胞总数在参考范围内，大方格间的细胞数不得相差10个个以上，两次重复计数误差不得超过以上，两次重复计数误差不得超过10。(5).白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过低时，可白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过低时，可计数计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量。个大方格的白细胞数或取双倍血量。2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）15(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多，会计数在白细胞一些贫血患者血液中有核红细胞增多，会计数在白细胞总数内，应校正。总数内，应校正。校正公式：白细胞校正数

11、校正公式：白细胞校正数/l=m（100/100+n）m为未校正前白细胞数，为未校正前白细胞数，n为在白细胞分类时，计数为在白细胞分类时，计数100个白个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。细胞的同时计数到的有核红细胞数。(7).调试显微镜调试显微镜将血细胞计数板平放于载物台，低倍镜处所充计数池正中盖将血细胞计数板平放于载物台，低倍镜处所充计数池正中盖片略上方，向下微调载物台（防止压碎盖片）至看清计数区片略上方，向下微调载物台（防止压碎盖片）至看清计数区域内分隔线条为止。域内分隔线条为止。2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）166.细胞计数原则细胞计数原则n大方格四边压线细胞大方格四边压线细胞数左不数右，数上不数左不数右，数上不数下，数下，n弓形移动弓形移动2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）177.正常参考值正常参考值成人成人 ： （ 4.0-10.0）109/l新生儿：新生儿： （15.0-20.0）109/l2020-12-24白细胞计数 (2)（课件分享）188.考核评价考核评价 a. 常规考核标准常规考核标准 （rcs）rcs= 100%评价：评价： 白细胞白细胞 4.0109/l者，者， rcs30% 白细胞在（白细胞在（4.1-14.9）109/