植物油中磷脂含量的测定ppt课件

1、1项目五植物油中磷脂含量的测定食品分院刘深勇2主要内容n实验目的实验目的n 掌握用油脂中磷脂测定的原理和方法。n 学习吸收曲线的制作和结果计算。n 进一步熟练掌握分光光度计的使用方法。3磷脂的定义4实验原理植物油脂中的磷脂经灼烧成五氧化二磷，被热盐酸变成磷酸，遇钼酸钠生成磷钼酸钠，用硫酸联氨还原形成钼蓝，在680nm，用分光光度法测定其含量。5磷脂测定仪器和器具n钼蓝比色法钼蓝比色法n1.瓷坩埚或石英坩埚；n2.分光光度计或带塞的50 ml比色管；n3.移液管：5、10 ml；n4.电炉、高温炉；n5.容量瓶：100、500、1000 ml；n6.表面皿、烧杯、量筒；n7.恒温水浴锅；n8.漏

2、斗、坩埚钳、试剂瓶等 6磷脂测定的试剂1.50氢氧化钾溶液；2.盐酸、硫酸、氧化锌、滤纸；3.0.015硫酸联氨溶液；4.2.5钼酸钠稀硫酸溶液：量取140 ml硫酸注入300 ml水中，摇匀，冷却至室温，加入 12.5 g钼酸钠，溶解后加水至500 ml，摇匀，静置24 h备用。5.磷标准溶液：称取无水的磷酸二氢钾0.4391 g溶于1000 ml水中，作为1号液，含磷0.1 mg/ml，吸取1号液10 ml，加水稀释至100 ml，含磷0.01 mg/ml，作为2号液，比色用。7操作步骤1.绘制标准曲线绘制标准曲线：取4只50 ml比色管，编成1，2，4，8五个号码，按号码顺序分别注入磷标

3、准2号液1，2，4，8 ml，再按顺序分别加水9，8，6，2 ml。接着向4只管内各加0.015硫酸联氨溶液8.0ml；各加钼酸钠稀硫酸溶液2.0 ml，加塞、摇匀。去塞，将4只管置于正在沸腾的水浴中加热10 min，取出冷却至室温，用水稀释至50 ml，充分摇匀，静置10 min后，用分光光度计在波长650 nm 下，用1cm液槽，用水调整零点，分别测定吸光度值。以吸光度为纵坐标，以磷量（0.01、0.02、0.04、 0.08 mg）为横坐标绘制标准曲线。8操作步骤2.制备被测液制备被测液：用坩埚称取试样约10 g（准确至0.001 g），加氧化锌0.5 g（氧化锌在灰化中能和磷形成磷酸锌

4、防止磷以氧化物的形式挥发造成损失），先在电炉上加热炭化，然后送入550600的高温炉中灼烧至灰化（白色），灼烧时间约1 h，取出坩埚冷却至室温，用热盐酸（1 1）10 ml溶解灰分，并加热微沸5 min，将溶解液过滤注入100 ml容量瓶中，用热水冲洗坩埚和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50氢氧化钾溶液中和至出现混浊，缓慢滴加盐酸使氧化锌沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀释至刻度，摇匀。9操作步骤操作步骤3.比色比色：用移液管吸取被测液10 ml注入50 ml比色管中，加入0.015硫酸联氨8.0 ml，加2.0 ml钼酸钠稀硫酸溶液，加塞，摇匀。去塞，将比色管置于正在沸腾的水浴中加热10 min，取出冷却至室温，用水稀释至50 ml，充分摇匀，静置10 min后，用分光光度计在波长650 nm下，用1cm液槽，用水调整零点，测定吸光度值。10结果计算结果计算 根据被测液的吸光值，从标准曲线查得磷量（P），按公式（1）计算磷脂含量：式中：P标准曲线查得的磷量，mg；V1样品灰化后稀释的体积，ml；V2比色时所取的被测液体积，ml；26.31每毫克磷相当于磷脂的毫克数；W试样重量，g。双试验结果允