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文档简介
1、第四章第四章 放射性核素标记化合物放射性核素标记化合物 第一节第一节 概述概述第1页/共47页二、放射性核素标记化合物二、放射性核素标记化合物(一)放射性核素标记化合物的特点(一)放射性核素标记化合物的特点第2页/共47页二、放射性核素标记化合物二、放射性核素标记化合物(一)放射性核素标记化合物的特点(一)放射性核素标记化合物的特点(二)同位素标记与非同位素标记(二)同位素标记与非同位素标记第3页/共47页第4页/共47页(三)(三) 放射性核素标记化物的命名放射性核素标记化物的命名第5页/共47页第6页/共47页第7页/共47页第8页/共47页第9页/共47页第二节第二节 蛋白质与多肽放射性
2、碘标记蛋白质与多肽放射性碘标记124Xe + 1n - 125I + 124Xe(n, ) 125IXian氙第10页/共47页第11页/共47页Na *I氧化剂*I2或*I+酪氨酸残基1. 直接标记法lao第12页/共47页1.1.直接标记法直接标记法(1)(1)氯胺氯胺T T法法第13页/共47页1.1.直接标记法直接标记法 (1)(1)氯胺氯胺T T法法第14页/共47页1.1.直接标记法直接标记法 (2 2)乳过氧化物酶法)乳过氧化物酶法第15页/共47页乳过氧化物酶法注意事项第16页/共47页1.直接标记法(3)固相氧化剂法第17页/共47页1.1.直接标记法直接标记法(3)(3)固
3、相氧化剂法固相氧化剂法第18页/共47页1.直接标记法直接标记法(3)固相氧化剂法固相氧化剂法第19页/共47页1.直接标记法直接标记法(3)固相氧化剂法固相氧化剂法第20页/共47页1.直接标记法直接标记法(3)固相氧化剂法固相氧化剂法第21页/共47页1.1.直接标记法直接标记法(4)N-(4)N-溴替丁二酰亚胺溴替丁二酰亚胺 (N-Bromosuccinimide)(N-Bromosuccinimide)第22页/共47页三、蛋白质与多肽的放射性碘标记技术三、蛋白质与多肽的放射性碘标记技术 1. 1. 直接标记法直接标记法 (1)(1)氯胺氯胺T T法法 (2)(2)乳过氧化物酶法乳过氧
4、化物酶法 (3)(3)固相氧化剂法固相氧化剂法 固相酶法固相酶法 氯甘脲氯甘脲(Iodogen)(Iodogen)法法 Iodo-Beads Iodo-Beads法法 (4)N-(4)N-溴替丁二酰亚胺溴替丁二酰亚胺 第23页/共47页2. 间接标记法又称联接标记法 是先将放射性碘联结到一个小分子载体上,再将这个小分子物质与蛋白质结合。3-丙酸-N-琥珀酰亚脂第24页/共47页2. 间接标记法优缺点和和碘的利用率均较直接标记法低碘的利用率均较直接标记法低第25页/共47页二、核酸的放射性碘标记技术第26页/共47页第三节第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定放射性标记化合物的纯化与鉴定第27页/
5、共47页第三节第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定放射性标记化合物的纯化与鉴定聚酰胺聚酰胺-氢键氢键第28页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第29页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第30页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第31页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第32页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第33页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第34页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定 特定组分的放射性(cpm)放射化学纯度= 100% 各组分的放射性之和(cpm)第35页/共47页第三节 放射性标记化合
6、物的纯化与鉴定第36页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第37页/共47页 特定组分峰的 各段放射性之和标记率(%)= 100% 全层析谱 各段放射性之和 投入标记的放射性活度标记率放射性比活度 = 投入标记的待标记物质的化学量1.直接测定计算法2.层析谱放射性测定计算法第38页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第39页/共47页第三节 放射性标记化合物的纯化与鉴定第40页/共47页(四)生物活性和免疫活性的测定第41页/共47页三、标记化合物的辐射自分解与对策三、标记化合物的辐射自分解与对策第42页/共47页H2OH2OO OH1. 2. 3. 核衰变释放的射线核衰变产生子体核素产生激活物质第43页/共47页三、标记化合物的辐射自分解与对策三、标记化合
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