2018年自考医学类工程的心理学复习笔记第2章

1、AC900+三分群血液分析仪标准操作规程一、测定原理AC900+三分群血液分析仪采用电阻抗法，检测原理是：根据血细胞相对非导电的性质，悬浮有电解质溶液中的血细胞颗粒，在通过计数小孔时可引起电阻的变化为基础，对血细胞进行计数和体积测定。1、检测原理：将等渗电解质溶液（被称为稀释液，diluents ）稀释的细胞悬液置入一个不导电的容器中，将小孔管（也称传感器transducer）插到细胞悬液中。小孔管是电阻抗法细 胞计数的一个重要的组成部分，其内侧充满了稀释液， 并有一个内电极，外侧细胞悬液中有一个外电极。检测期间， 当电源接通后，位于小孔两侧的电极产生稳定的电流；稀释液通过 小孔的管壁上固有的

2、小孔 （直径一般100 （im.厚度为75 （im左右）向小孔内部流动。此时, 小孔周围充满了具有导电性的液体，其电子脉冲是稳定的。 如果供给电流I和阻抗R是稳定的，根据欧姆定律通过小孔的电压V是不变的（这时 V=IR ）。当有细胞通过小孔时，由于细胞的导电性质比稀释液要低，在电路中小孔感应区内的电阻的增加，于是瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。电压增加的变化的程度取决于非传导的细胞占据小孔感应区的体 积，即细胞体积越大，弓I起的脉冲越高，产生的脉冲振幅越高，测定脉冲的大小即可测出细胞体积大小，记录脉冲的数量就可测定细胞的数量。脉冲信号经过下列步骤，得出细胞计 数结果。（1）信号发生器：通

3、过小孔的各种血细胞都能产生电阻信号，信号电平的高低与细胞 的大小成正比。（2） 放大：由于血细胞通过微孔时产生的脉冲讯号非常微弱，不能直接触发计数电路， 因此必须通过电子放大器，将微伏讯号放大为伏级脉冲讯号。（3 ）阈值调节：在计数不同细胞时，应调节阈值电平，以给出合适的阈值度，使计数 结果尽量符合实际水平。（4 ）甄别：通过微孔时的各种微粒（血细胞、细胞碎片、杂质等）均可产生相应脉冲 讯号，讯号电平（脉冲幅度）与微粒大小成正比。因除血细胞外，血中细胞外，血中细胞碎 片、稀释液中杂质微粒均可产生假讯号，使计数结果偏高。所谓甄别就是利用甄别器根据阈值调节器提供的参考电平，将低于参考电平的假讯号去

4、掉，以提高细胞计数的准确性。（5）整形器：经过放大和甄别后的细胞脉冲讯号波形尚不一致必须经过整形器作用， 修整为形伏一致标准的平顶波后，才能触发电路。（6）计数：血细胞的脉冲信号，经过放大、甄别、整形后，送入计数系统；仪器对大 小不同的脉冲进行选择，区分出不同类型的细胞并分别进行计数。2、白细胞计数和分类计数原理：根据电阻抗的原理，不同体积的白细胞通过小孔时产 生的脉冲大小有明显的差异，依据这些脉冲的大小，可对白细胞进行分群。经过溶血剂处理后的白细胞可以根据体积大小初步确认其相应的细胞群：第一群是小细胞区（LYMF），指细胞体积在 35-90fl之间的小细胞区，主要分布的是淋巴细胞；第二群是

5、单个核细胞区，也被称为中间细胞（MID ），指细胞体积在 90-160fl之间的中间细胞区，主要包括单核细胞、 嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞，核左移的各阶段幼稚细胞或白血病时白 血细胞。第三群是大细胞区，主要是中性粒细胞（GRAN ），指细胞体积在160fl以上的大细胞区，主要分布的是中性粒细胞。仪器根据各亚群占总体的比例计算出各亚群的百分率， 如果与该标本的白细胞总数相乘，即得到各类细胞的绝对值。可以看出，电阻法只是根据细胞体积的大小，将白细胞分成几个群体。3、红细胞数和血细胞比容测定：绝大多数血液分析仪使用电阻抗法进行红细胞计数和红细胞比积测定，其原理同白细胞一样。 红细胞通过小孔时， 形成

6、的相应的脉冲的多少即红 细胞的数目，脉冲的高度代表单个脉冲细胞的体积。脉冲高度叠加经换算即可得到红细胞的比容。稀释的血液进入红细胞检测通道时，其中含有白细胞，因此，红细胞检测的各项参数均含有白细胞因素，但正常血液有形成分中白细胞比例很少约为500 : 1-700 : 1，故其影响可忽略不计，但在病理情况下，如白血病，白细胞数明显增加而又伴严重贫血时，即可使所得各项参数产生明显误差。血细胞比容，通常用红细胞平均体积（MCV ）与红细胞相乘得出红细胞比积 HCT=MCV XRBC。4、 血红蛋白测定：当稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解并释放血红蛋白，Hb与溶血剂中的某些成分结合形成血红蛋白衍生物

7、，进入血红蛋白测试系统， 在特定波长（一般在530-550nm ）下比色；吸光度的变化与液体中 Hb含量成比例，仪器便可显示 HGB浓 度。不同系列血液分析仪配套溶血剂配方不同，形成的血红蛋白衍生物亦不同， 吸光度各异但最大吸收峰均接近 540nm .这是因为ICSH推荐的氰化高铁法，HICN最大吸收峰在54 0nm。校正仪器必须以 HICN值为标准。大多数系列血液分析仪溶血剂内均含有氰化钾，与血红蛋白作用后形成氰化血红蛋白（注意不是氰化高铁血红蛋白），其特点是显色稳定， 最大吸收峰接近 540nm，但吸收光谱与 HICN有明显的不同。此点在仪器校正时应十分注 意。5、 红细胞其他参数的检测：

8、红细胞平均值，如红细胞平均体积（ MCV ）、平均红细胞血红蛋白量（MCH ）、平均红细胞血红蛋白浓度 （MCHC ）、均是根据仪器检测导出 （M CV），或由检测的红细胞数和血红蛋白含量的检测数据，经计算得到，MCH=HGB +RBCMCHC=HGB -HCT HCT=MCV XRBC。红细胞体积分布宽度（ RDW ）则是由血液分析 仪测量细胞体积后获得的，是反映外周血红细胞体积异质性的参数，即反映红细胞大小不等的客观指标。当红细胞通进小孔的一瞬间，计数电路得到一个相应的大小的脉冲，脉冲的高度是由细胞体积大小决定的，不同大小的脉冲的信号分别贮存在仪器内装计算机的不同通道 内，计算出相应的体积

9、及细胞数后，统计处理而得RDW 值。由于RDW 来自十几秒内近万个红细胞的检测数据，不但可以克服测量红细胞直径时人为制片因素和主观因素等影响。6、电阻抗法血小板检测原理血小板(platelet, PLT)随红细胞一起在一个系统中进行检测，当各种细胞引起电阻变化，产生的脉冲经数字化后，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板和红细胞数目。血小板分别储存于64个通道，直方图范围在 2-28fl，。血小板平均体积(mean platelet volume, MPV )就是PLT体积分布的直方图的产物。二、键盘介绍ENTER键用于：进入选择的菜单、进入菜单选项 :箭头用于：在菜单中前后移动或进入内层菜单；

10、改变光标在数字中的位置+ (加)-(减)键用于：打开关闭一个功能；增加或减少数字值。Prime cycle键用于：在"1measurement ”测量菜单下，用试剂冲冼或灌注血球计数 仪。功能同“ 8.1 ”MENU键：用于回到前一个菜单。Ready灯:绿色=准备状态，准备开始下一步分析；红色=吸入样本；闪烁红色=吸液完成，等待下一步操作；灯不亮=介于吸入和准备状态之间的。三、样本收集1、 静脉血：用注射器将血液收集在有抗凝剂K2EDTA (0.07mol/ml 血)的度管；停留15分钟进行分析标本采集后应8小时内进行分析。注意：8小时内进行分析！2、 毛细血管血：使用微量吸管收集手

11、指20讪，并立即与4ml的等渗稀释液一起转移到样品杯，用上清液反复清冼4-5次。混匀加盖。60分钟内进行分析。四、稀释液的分配菜单"Dispense ”用于分配4ml的稀释剂。1、在主菜单用键进入"3Dispense ”并按Enter键。2、 把一个新的样本杯置于分配管下，按键分配4ml的稀释剂到计数杯中。3、按menu键退出。注意：每次(指间隔4小时)第一个分配的稀释液应弃不用(因不足4ml )，可用其作空白！五、测试前仪器的调试1、测试前应首先进"8.6single count test ” (单一计数测试)这一菜单用于检查仪 器计数的时间，和稀释液的空白值，

12、计数时间指RBC和PLT计数。(1 )从主菜单进入“ 8 maintenance ”保养菜单并按 ENTER键。(2) 进入"8.6Single count test ”单一计数测试。(3) 按ENTER键盘于始单一计数。真空泵将稀释液抽入测量管开始RBC/PLT计数，计数时间显示在屏幕上，范围应在11.0-15.0sec 之间。（4 ）按menu键退出。注意：如上述操作结束，单一计数时间有在上述范围，则证明仪器计数孔阻塞，应在“8.5capillary clea ning清冼菜单中执行清冼程序反复数次。2、每次测试前必须做空白测定，如出现“LO、HI时，则说明LED电压不在4.1-

13、4.5V（匀值在4.2V为最佳）范围内，则应打开机器挡板调节电阻（R50）直LED电压2V即可； 如出现TB（ Tube bubble ）错误标志，则说明测量管有气泡应回到“8 maintenance ”保养菜单或“ 8.6single count test ”单一计数测试菜单进行单一计数，反复执行，直至错误 代码消失。完成上述操作再执行空白计数，无错误代码提示即可进行测量，否则结果不准确。六、样本的测试1、预稀释血样的计数（1 ）从主菜单进入“ 1measurement ”并按 Enter键。（2） 轻轻混匀样本，以混合预稀释样标本，并用键经吸液管吸入预稀释液，当Rea dy亮红灯时完成吸液

14、，小心地擦于净吸液管的外部残留液。（3）把样品杯置于 WBC/HGB位分析开始。（4） 按Enter键，用+-键输入ID号，后再按Enter确定。当完成测量时 ready亮红 灯。并按可查看直方图。(5) 重复预稀释样品的操作，从步骤(2) - (4)开始！七、样本储存血球计数仪可存储包括直方图在内的450多个数据，如果存储已满，仪器会自动删除最前一个样本数据，在菜单"4smprmvry ”中可以按ID号、日期和序号查询。1、在主菜单按键进入"4sampre memory ”按Enter键2、 按键选择在同的查询(ID号、日期和序号)条件，然后按Enter键，使用+或 键输

15、入ID号并按Enter键，使用+或-键输入ID号并按Enter键。3、进入"4sample memory ”样本存储菜单后，可在屏幕上看到当前日期。要完全清除日期就要进入日期区并按 Enter键，按键就可清除。输入所需日期。4、 进入"4 Sample memory ”样本存储菜单时，可以看到1-9999的序号。进入这 一区域并按键清除序号。输入所需的起止序号。5、进入"4.1view selected samples ”按Enter键。可在显示屏上查看样本的结果。&e668;&e658;键可查看方图，按可查看前一个或后一个结果，按Enter键可打

16、印结果。八、仪器的校准1、仅在必需时校准，在校准前保证质控物和仪器没有问题仪器出现下述情况时应重新校准仪器：在使用一种新试剂时连续三次分析两个试管中任何参数的平均值超出设定的范围时只有参数 RBC、MCV、HGB、PLT、和WBC可以进行校准2、校准步骤首先对仪器进行大清冼。单一计数PLT<10、空白WBC、RBC均为“ 0”，无错误代码提示 重新启动仪器，用于清除“ ”校准菜单的参数。注意： 此步骤不能省略必须执行方可进行下步操作。(2) 连续测定5次校准物。按 MENU键返回到主菜单。注意：加样前应充分混匀全血 质控物5分钟，并确保加样(20微升)准确无误！(3) 在主菜单按键进入“

17、 5calibratio n/QC”。RBC MCV HGB05.4589.81551 4.1384.91282 4.3584.91233 4.4085.11254 4.3384.6125MV : n 4.33 :484.8:4125:4TV:4.4184.0132% +1 -0.9+5.6 &e658;（4）进入“”校准菜单，上图是在屏幕上显示的最后5个测量值。每一行结果前的数字表示是否使用该结果参与计算平均值。1=计算；0=不计算；可用-键修改标记，当测定结果有问题时应改为“0”不参加计算。平均值（MV ）表示用于分析的样本个数（n）的平均值。目标值（TV）表示在需要校准时，由操作

18、者输入的值。（5）用和键选择所需参数，并按 Enter键。按照已知全血质控物的参数值，用 +或 -输入MCV和HGB、RBC目标值。在显示屏的 2/4页用+或-键输入除了参数 MPV外的P LT和WBC值。注意：MCV的目标值应在其质按物给出的靶值基础上加15fl进行靶值（TV）的输入。如：质按物给出的 MCV值是90fl则输入仪器应是 90+15=105fl,应输入MCV是105而不 是给出的90。如按质控物给出的值进行校准，实际患者的MCV测定值都会低于15fl从而影响HCT、MCHC 参数的计算。所以校准时 MCV值应加15fl。（6）当所有的参数校准的参数校准后，用MENE键退出“ ”

19、校准菜单。（7）在需要将校准值打印出时回答是否打印。（8）重复上述步骤“（2）（ 5） ”完成上述步骤“（2）（ 5 ） ”后，查看测定值，如偏差超过规定的范围；则执行步骤“6 ”。（9）再次测定质控物；符合要求即可，完成校准。九、仪器的保养1、每天用完仪器后。执行"8.2cleaningcycle ”清冼程序用去蛋白液或4%次氯酸钠清冼。(1) 把4ml的清冼剂放入一个样品杯中置于AC900+仪器的WBC/HGB位。(2) 从主菜单进入"8 maintenance ”菜单，并按 Enter键。(3) 进入清冼程序并按Enter键启动清冼程序。程序将持续几分钟。(4) 完成后进行空白测定。2、手工清冼转换器，每周一次。(1) 用带导管的注射器，把计数杯中的