总糖实验报告范本

1、总糖实验报告范本糖在我们日常生活中随处可见，我们吃的米饭、水果、零食中或多或少都含有 一些糖类。同时，糖也是我们维持机体运动所必不可少的物质，没有了它，就没有 了能量的来源。我们这次便走进实验室探索糖类的奥秘。本次实验我们将用3, 5- 二硝基水杨酸法测定总糖和还原糖中的含糖量。本次实验中，我们除了要掌握还原 糖和总糖的测定基本原理还要学习比色法测定还原糖的操作方法以及分光度法测定 的原理和方法。首先，让我们一起来了解一下它们的测定方法吧。还原糖的测定是糖定量测定 的基本方法。还原糖是指含有自山醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多 糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是

2、非还原糖。利用糖 的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性 的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样 品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量讣）。还原糖在碱性条件下加热被氧 化成糖酸及其它产物，3, 5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨 酸。在一定范圉内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光 度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原 糖和总糖的含量。山于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖昔键需加入一分子水，所 以在讣算多糖含量时应乘以0. 9o一、实验目的1

3、、掌握还原糖和总糖的测定的基本原理2、学习比色法测定还原糖的操作方法3、学习分光光度法测定的原理和方法二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自山醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是 还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、 双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成 有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄 糖含量计)。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3, 5-二硝基水杨酸则被还 原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一

4、定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜 色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准 曲线并讣算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。山于多糖水解为单糖时，每断 裂一个糖昔键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0. 9o三、材料与器具的准备。实验材料：面粉。实验试剂(1) 、lmg/mL葡萄糖标准液准确称取80°C烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg,置于小烧杯中，加少量蒸谓水 洛解后，转移到lOOmL容量瓶中，用蒸镭水定容至1 OOmL,混匀，4°C冰箱中保存备 用。(2) 、3, 5-二硝基水杨酸(DNS)试剂将6. 3g DNS和262mL

5、 2M NaOH溶液,加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水 溶液中,再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸係水定容至lOOOmL, 贮于棕色瓶中备用。(3) 、碘-碘化钾溶液：称取5g碘和10g碘化钾，溶于lOOmL蒸馆水中。 、 酚歆指示剂：称取0. lg酚駄，溶于250mL 70%乙醇中。(5)、6M HC1和6M NaOH 各lOOmLo实验器材(1)具塞玻璃刻度试管：20mLXU (2)大离心管：50mLX2(3)烧杯：lOOmLXl (4)三角瓶：lOOmLXl (5)容量瓶：100mLX3(6)刻度吸管：ImLXl； 2mLX2； lOmLXl (7)恒温水浴锅(

6、8)沸水浴(9) 分光光度计分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射下，产生了对光吸收的效应， 物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此 当某单色光通过洛液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合比色原理Lambert-Beer* s law：数学表达式：A=lg（l/T）=KCLA为吸光度T为透射率，是投射光强度比上入射光强度C为吸光物质的浓度L为吸收层厚度K为吸收系数物理意义是当一束平行单 色光垂直通过某一均匀非散射的西光物质时，其吸光度A与吸光物质的浓度C及吸收 层厚度L成正比.四、实验步骤。器材与材料准备完毕

7、之后，便开始按照以下步骤进行实验。首先，制作葡萄糖 标准曲线。取6支20mL具塞刻度试管编号，按下表分别加入浓度为lm”mL的葡萄 糖标准液、蒸谓水和3, 5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应 液。接下来，提取还原糖。准确称取2. OOg食用面粉，放入lOOmL烧杯中，先用少 量蒸镭水调成糊状，然后加入50mL蒸懈水，搅匀，置于50°C恒温水浴中保温20min,使还原糖浸出。过滤，将滤液收集在100ml容量瓶中，用蒸镭水 定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。紧接着，提取总糖。准确称取l.OOg食用面粉，放入lOOmL三角瓶中，加15mL 蒸镭水及lOmL 6M HC1,置沸水浴中加热水解30min （水解是否完全可用碘-碘化钾 溶液检查）。待三角瓶中的水解液冷却后，加入1滴酚駄指示剂，用6mol/LNaOH中 和至微红色，用蒸憎水定容在lOOmL容量瓶中，混匀。将定容后的水解液过滤，取 滤液10mL,移入另一 lOOmL容量瓶中定容，混匀，作为总糖待测液。然后，取4支20mL具塞刻度试管，编号，6、7、8、9,按下表所示分别加入 待测液和显色剂。最后，用分光光度计进行比色。先将机器打开