确证化学结或组分研究资料撰写的基本要求讲课稿北京申报资料

1、 确证化学结构或组分确证化学结构或组分研究研究 资料资料撰写的基本要求撰写的基本要求 -申报资料申报资料 9申报资料的格式和内容申报资料的格式和内容o 一一. 新药的化学结构式、分子式及分子量新药的化学结构式、分子式及分子量o 二二. 供确认化学结构用供试品的纯度及检查纯度供确认化学结构用供试品的纯度及检查纯度的方法的方法o 三三. 确证化学结构的方法确证化学结构的方法o 理化常数理化常数o 元素分析元素分析o 紫外吸收光谱紫外吸收光谱o 红外吸收光谱红外吸收光谱o 核磁共振氢谱核磁共振氢谱o 核磁共振碳谱核磁共振碳谱o 质谱质谱o 差热分析差热分析o x-射线衍射谱射线衍射谱o 其他其他o四

2、四. 综合解析综合解析o五五. 参考文献参考文献 (一一) 结构确证研究的一般原则结构确证研究的一般原则和要求和要求 1. 结构确证研究的主要对象结构确证研究的主要对象 2. 结构确证研究的基本方法结构确证研究的基本方法 3. 结构确证研究的主要内容结构确证研究的主要内容 4. 结构确证研究的一般要求结构确证研究的一般要求1. 结构确证研究的主要对象结构确证研究的主要对象 经化学全合成或半合成、微生物发酵以经化学全合成或半合成、微生物发酵以及从动、植物中提取的原料药及从动、植物中提取的原料药,包括新药、包括新药、进口药和已有国家标准的药品进口药和已有国家标准的药品.o按来源：按来源： 化学合成

3、、半合成、天然产物中提取、发酵等化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等;o按组分：按组分： 单一组分、多组分混合物单一组分、多组分混合物;o按分子量：按分子量： 小分子化合物、大分子化合物小分子化合物、大分子化合物;o按结构特点：按结构特点： 成盐化合物和非成盐化合物、手性化合物和非手性化合物、成盐化合物和非成盐化合物、手性化合物和非手性化合物、含结晶水含结晶水/溶剂和不含结晶水溶剂和不含结晶水/溶剂等溶剂等;2.2.结构确证研究的基本方法结构确证研究的基本方法 化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等 物理方法：波谱方法、衍射技术物理方法：波谱方法、

4、衍射技术 a. a. 射频波、微波与物质的相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等射频波、微波与物质的相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等 b. b. 红外、可见、紫外光与物质的相互作用：红外光谱、紫外光谱、红外、可见、紫外光与物质的相互作用：红外光谱、紫外光谱、拉曼光谱等拉曼光谱等 c. xc. x射线与物质的相互作用：射线与物质的相互作用：x x射线衍射等射线衍射等 d. d. 电子与物质的相互作用：质谱、电镜等电子与物质的相互作用：质谱、电镜等 e. e. 其他：热分析、原子吸收、原子发射等其他：热分析、原子吸收、原子发射等3.3.结构确证研究的主要内容结构确证研究的主要内容 骨架结构：骨架结构

5、： 分子中各原子之间的连接顺序和方式分子中各原子之间的连接顺序和方式; ; 构型：构型： 分子中各原子之间的空间相对位置分子中各原子之间的空间相对位置; ; 结晶水结晶水/ /结晶溶剂：结晶溶剂： 与水、有机溶剂通过氢键等结合与水、有机溶剂通过氢键等结合; ; 晶型：晶型： 分子（或原子）在晶体中的排列方式分子（或原子）在晶体中的排列方式; ;骨架结构骨架结构 例：氟吗西尼例：氟吗西尼 骨架结构的研究骨架结构的研究: : a. a. 单晶单晶x x射线衍射射线衍射; ; b. b. 常规方法，如元素分析（或高分辨质常规方法，如元素分析（或高分辨质谱）、谱）、uvuv、irir、nmrnmr（包

6、括二维谱）、（包括二维谱）、msms等组合等组合; ; 应根据化合物骨架结构的特点及其复杂应根据化合物骨架结构的特点及其复杂程度、有无对照品及参考文献，合理选用程度、有无对照品及参考文献，合理选用测试项目。测试项目。 构构 型型 几何构型几何构型: 双键、环状化合物，常用顺反（双键、环状化合物，常用顺反（cistrans）或）或ze表示表示 例：西尼地平例：西尼地平 （）-3-（2-甲氧基乙基）甲氧基乙基）-5-3-苯基苯基-2（e）-丙烯基丙烯基-2,6-二甲基二甲基-4-（3-硝基苯基）硝基苯基）-1,4-二氢二氢- 3,5-吡啶二甲酸酯吡啶二甲酸酯 nhch3h3cno2oooh3coo

7、 例：拉米夫定例：拉米夫定 (2r-(2r-顺式顺式)-4-)-4-氨基氨基-1-(2-1-(2-羟甲基羟甲基-1-1，3-3-氧硫杂氧硫杂环戊环戊-5-5-基基)-1h-)-1h-嘧啶嘧啶-2-2-酮酮nnonh2osho 几何构型的研究：几何构型的研究： 理化性质差别明显理化性质差别明显 a. 理化常数，例如熔点等理化常数，例如熔点等; b. 氢谱、碳谱氢谱、碳谱; c. 红外光谱、紫外光谱等红外光谱、紫外光谱等;光学异构：由于分子的不对称性引起，光学异构：由于分子的不对称性引起，常用常用d- l或或r-s表示。表示。 例：例：那格列奈那格列奈 （）（）n-n-（反（反-4-4-异丙基环基

8、甲酰基）异丙基环基甲酰基）-d-d-苯丙苯丙氨酸氨酸ch3h3conch2hhcooh 例：前列腺素例：前列腺素e1e1（1r1r，2r2r，3r3r）-3-3-羟基羟基-2-2-（e e）- -（3s3s）- -3-3-羟基羟基-1-1-辛烯基辛烯基-5-5-氧代环戊烷庚酸氧代环戊烷庚酸 光学异构的研究：光学异构的研究： a. 比旋度测定比旋度测定 b. 手性柱色谱（手性柱色谱（hplc、gc） c. 核磁共振（核磁共振（nmr） d. 单晶单晶x射线衍射（射线衍射（sxrd） e. 旋光光谱（旋光光谱（ord） f. 圆二色谱（圆二色谱（cd） g. g. 其他方法其他方法 对照品法对照品

9、法根据对照品的构型推定根据对照品的构型推定 化学关联法化学关联法利用合成工艺分析利用合成工艺分析 例如，例如， 左旋西替利嗪的构型确证：左旋西替利嗪的构型确证： 手性柱色谱定位（与对照品对比手性柱色谱定位（与对照品对比) )、 比旋度数据、比旋度数据、光学纯度分析光学纯度分析 晶型的研究晶型的研究: : a. a. 粉末粉末x-x-射线衍射法射线衍射法 b. b. 红外光谱法、拉曼光谱法红外光谱法、拉曼光谱法 c. c. 熔点法熔点法 d. d. 热分析热分析 e. e. 光学显微镜法光学显微镜法 无对照品和文献报道：无对照品和文献报道： 考察不同结晶条件下（溶剂、温度、结晶速率等）制备样考察

10、不同结晶条件下（溶剂、温度、结晶速率等）制备样品的熔点、红外光谱、粉末品的熔点、红外光谱、粉末x x射线衍射等射线衍射等; ; 有对照品有对照品: : 对比自制药物与已上市药物的熔点、红外光谱图、粉末对比自制药物与已上市药物的熔点、红外光谱图、粉末x x射线衍射图谱等射线衍射图谱等; ; 有文献报道有文献报道: : 对文献资料进行分析，选取能够准确反映产品晶型的测对文献资料进行分析，选取能够准确反映产品晶型的测试项目试项目; ; 结晶水结晶水/ /结晶溶剂的研究结晶溶剂的研究: : a.a.元素分析元素分析 b.b.热分析热分析 c.c.干燥失重、水分检查干燥失重、水分检查 d.d.单晶单晶x

11、-x-射线衍射射线衍射 创新药：创新药： 在干燥失重、水分测定研究的基础上，通过热分析、元在干燥失重、水分测定研究的基础上，通过热分析、元素分析等确证样品分子中结晶水素分析等确证样品分子中结晶水/ /结晶溶剂的数量结晶溶剂的数量; ; 已上市的药品：已上市的药品： 采取合适的分析方法对样品进行分析，以确证其结晶水采取合适的分析方法对样品进行分析，以确证其结晶水/ /结晶溶剂的情况与已上市产品一致结晶溶剂的情况与已上市产品一致; ;4. 结构确证研究的一般要求结构确证研究的一般要求 对测试样品和对照样品的要求：对测试样品和对照样品的要求：测试样品测试样品: a. 精制方法精制方法 b. 纯度要求

12、纯度要求 大于大于99.0%，杂质含量应小于，杂质含量应小于0.5%； 对于手性药物，应增加对对映体、非对映体纯度要求，对于手性药物，应增加对对映体、非对映体纯度要求， 一般一般 不低于不低于99.5%。 对照品对照品: a. 合法来源证明合法来源证明 购得的标准品购得的标准品(已有国家标准的药品已有国家标准的药品) 市售原料药市售原料药 市售制剂中提取得到的原料药市售制剂中提取得到的原料药 从正规试剂公司购得的试剂等从正规试剂公司购得的试剂等 b. 精制方法精制方法 c. 纯度检查纯度检查 对图谱、数据的要求对图谱、数据的要求 附图应为原图的复印件或照片附图应为原图的复印件或照片; 图谱及图

13、谱图谱及图谱上的标记、数据应清晰，并有完整的检测日期、上的标记、数据应清晰，并有完整的检测日期、各项参数、测试条件、仪器型号及样品编号等各项参数、测试条件、仪器型号及样品编号等记录。记录。 各项检测数据应按规定列表说明，注明其各项检测数据应按规定列表说明，注明其顺序。有对照品的应将测试品和对照品同一波顺序。有对照品的应将测试品和对照品同一波谱的数据在一个表中对比列出。如有可作参照谱的数据在一个表中对比列出。如有可作参照的文献数据，也可列在同一表中。的文献数据，也可列在同一表中。 质谱应附离子裂解图。质谱应附离子裂解图。(二二) 对不同类别药品结构对不同类别药品结构确证的要求确证的要求o未知结构

14、的化合物：推论结构未知结构的化合物：推论结构o已知结构的化合物：验证结构已知结构的化合物：验证结构 未在国内外上市销售的原料药未在国内外上市销售的原料药 按全新化学单体要求：推论结构按全新化学单体要求：推论结构 a.完成必要的各项测试完成必要的各项测试; b.应提供充分的试验图谱和数据应提供充分的试验图谱和数据; c. 按新化合物要求进行图谱解析和综按新化合物要求进行图谱解析和综合解析合解析; 如有参考文献资料，可提供作参考。如有参考文献资料，可提供作参考。 已在国外上市销售但尚未在国内销已在国外上市销售但尚未在国内销售的原料药或已有国家标准的原料药售的原料药或已有国家标准的原料药 按已知化学

15、结构的药物：验证结构按已知化学结构的药物：验证结构 可以使用对照品可以使用对照品 可以参考文献可以参考文献 a. 有合格对照品的化合物：有合格对照品的化合物： 提供测试样品和对照品在完全相同条提供测试样品和对照品在完全相同条件和同一仪器上测得的各项图谱和数据，件和同一仪器上测得的各项图谱和数据，完成所需的各项目测试，若二者完全相同，完成所需的各项目测试，若二者完全相同，并对重要的波谱讯号和测试数据进行了正并对重要的波谱讯号和测试数据进行了正确解析，即可得出二者化学结构一致的结确解析，即可得出二者化学结构一致的结论。论。 b. 有详细文献数据的化合物：有详细文献数据的化合物： 可对结构确证研究的

16、内容、方法提供线索，并为解可对结构确证研究的内容、方法提供线索，并为解析提供参考，但是不能作为结构确证研究的充分证据，析提供参考，但是不能作为结构确证研究的充分证据，仍需要进行较为详尽的图谱解析和综合解析。仍需要进行较为详尽的图谱解析和综合解析。 c. 无对照品和文献数据的化合物：无对照品和文献数据的化合物： 除了目标化合物的结构外，缺乏其他支持性资料，除了目标化合物的结构外，缺乏其他支持性资料，因此原则上应按全新化学单体要求进行全面的研究，因此原则上应按全新化学单体要求进行全面的研究，提供充分的试验图谱和数据，可结合其它研究工作提供充分的试验图谱和数据，可结合其它研究工作（例如合成工艺路线的

17、确定）以进一步推论化合物的（例如合成工艺路线的确定）以进一步推论化合物的结构。结构。(三三) 对特殊化学结构药品对特殊化学结构药品结构确证的要求结构确证的要求 1. 立体异构体药物立体异构体药物 立体异构体：立体异构体： 光学异构体光学异构体 a. a. 对映异构体对映异构体 b. b. 非对映异构体非对映异构体 几何异构体（顺、反异构体）几何异构体（顺、反异构体） 手性药物手性药物-绝对构型和相对构型绝对构型和相对构型 a. 单一对映体单一对映体-绝对构型绝对构型 比旋度测定比旋度测定 手性柱色谱手性柱色谱 (手性手性hplc和和gc) 核磁共振核磁共振 单晶单晶x-衍射衍射 圆二色谱圆二色

18、谱 旋光光谱旋光光谱 b. 消旋体消旋体-有多个手性中心时要求有多个手性中心时要求确定相对构型确定相对构型; c. 立体异构混合物立体异构混合物-确定异构体的确定异构体的组成和比例组成和比例;“手性药物申报资料及审评要点手性药物申报资料及审评要点” (药审中心药审中心) 应注意确证产品的立体构型。可根应注意确证产品的立体构型。可根据手性中心的多少、文献数据是否充足、据手性中心的多少、文献数据是否充足、对照品的有无来选择合适的确证的方法，对照品的有无来选择合适的确证的方法，必要时可采用单晶必要时可采用单晶x射线衍射进行确射线衍射进行确证。证。 比旋度是必须的检测项目之一，已比旋度是必须的检测项目

19、之一，已知的起始原料的构型和化学合成方法的知的起始原料的构型和化学合成方法的立体选择性也可作为依据之一。立体选择性也可作为依据之一。2. 具有多晶型的药物具有多晶型的药物 晶型晶型: 是指结晶物质晶格内分子的排列形式。是指结晶物质晶格内分子的排列形式。 多晶型物质晶格内部分子间力的差异多晶型物质晶格内部分子间力的差异可能引起药物各种理化性质的变化，可能引起药物各种理化性质的变化， 主要对熔点、溶解度及溶出速率、稳定主要对熔点、溶解度及溶出速率、稳定性、有效性的影响性、有效性的影响。 重点：重点： 以适宜的方法获得药物晶型的数据。以适宜的方法获得药物晶型的数据。 常用方法：常用方法： 粉末粉末x

20、-衍射法衍射法 红外吸收光谱法红外吸收光谱法 熔点熔点 热分析热分析 光学显微镜光学显微镜 创新药物创新药物 a. 不同结晶条件下（溶剂、温度、不同结晶条件下（溶剂、温度、结晶速率等）晶型的一致性；结晶速率等）晶型的一致性； b. 不同晶型是否影响药物活性和毒性不同晶型是否影响药物活性和毒性等等; 结构已知的仿制药品结构已知的仿制药品 a. 力求与被仿制品保持一致；力求与被仿制品保持一致； 特别是被仿制药为晶型选择性药物，且各特别是被仿制药为晶型选择性药物，且各晶型的理化性质及生物药剂学性质有明显差异晶型的理化性质及生物药剂学性质有明显差异的仿制药品，要重点确定与被仿制品种晶型的的仿制药品，要

21、重点确定与被仿制品种晶型的完全一致性（熔点、红外吸收光谱、粉末完全一致性（熔点、红外吸收光谱、粉末x射线衍射图等射线衍射图等)。 b. 重点关注难溶性固体口服制剂重点关注难溶性固体口服制剂晶型的研究；晶型的研究；那格列奈晶型研讨会纪要那格列奈晶型研讨会纪要 （药审中心）（药审中心） 在临床前，那格列奈的晶型应达到如在临床前，那格列奈的晶型应达到如下要求：下要求： a. a. 红外光吸收图谱红外光吸收图谱, ,应能清晰分辨出晶型应能清晰分辨出晶型的特征吸收峰，即在的特征吸收峰，即在1714cm1714cm-1-1、1649cm1649cm-1-1、1542cm1542cm-1-1、1214cm1

22、214cm-1-1处有强吸收峰；处有强吸收峰； b. b. 粉末粉末- -射线衍射图谱中在射线衍射图谱中在=4.82=4.82- -4.94.9处不得出现型的衍射峰，同时在处不得出现型的衍射峰，同时在=19.6=19.6与与19.919.9的两个强衍射峰应能够识的两个强衍射峰应能够识别（应分离）别（应分离） c. c. 熔点控制在熔点控制在137-141137-141范围内，熔距限定范围内，熔距限定为为 。 在临床期间在临床期间, ,对那格列奈晶型进行如下工作对那格列奈晶型进行如下工作: : a. a. 熔点熔点: : 测定本品测定本品h h晶型与晶型与b b晶型分别晶型分别 以不同比例以不同

23、比例混合后的熔点混合后的熔点, ,并进行差热分析的试验工作并进行差热分析的试验工作; ; b. b. 溶解度溶解度: : 对对h h、b b晶型及熔点为晶型及熔点为170170c c左右的第左右的第三种晶型分别进行溶解度的测试三种晶型分别进行溶解度的测试; ; c. c. 粉末粉末x-x-射线衍射谱射线衍射谱: : 对目前原料中在对目前原料中在19.619.6、19.919.9( ()的衍射情况作进一步研究的衍射情况作进一步研究; ; d. ir: d. ir: 完成使用完成使用irir法控制法控制h h晶型中夹杂的晶型中夹杂的b b晶型晶型的方法学研究的方法学研究; ; 与粉末与粉末x-x-

24、射线衍射的方法进行比射线衍射的方法进行比较研究较研究, ,以提供制定生产用质量标准的依据。以提供制定生产用质量标准的依据。3. 合成多肽类药物合成多肽类药物 氨基酸分析氨基酸分析（证明多肽的组成是否正确）（证明多肽的组成是否正确）； 质谱测定（质谱测定（提供相对分子质量及序列的信息）；提供相对分子质量及序列的信息）； 序列分析以及肽图测绘等；序列分析以及肽图测绘等； 紫外：紫外：对具有生色团结构的小肽有一定的测试意义；对具有生色团结构的小肽有一定的测试意义； 红外：红外：适用于小肽（含三个氨基酸的肽）、拟肽等；适用于小肽（含三个氨基酸的肽）、拟肽等； 核磁共振：核磁共振：可对小肽的结构提供部分

25、信息；可对小肽的结构提供部分信息； 其他方法：其他方法： hplc、比旋度测定等。、比旋度测定等。 药物结构中有半胱氨酸，应明确其药物结构中有半胱氨酸，应明确其状态（氧化态或还原态）；状态（氧化态或还原态）； 药物结构中存在二硫键，应明确二药物结构中存在二硫键，应明确二硫键的正确连接点；硫键的正确连接点； 结合合成工艺对中间体的研究，对结合合成工艺对中间体的研究，对终产品的结构进行确证。终产品的结构进行确证。4. 多糖类药物多糖类药物多糖结构的描述包括多糖结构的描述包括:o多糖的分子量范围；多糖的分子量范围；o多糖的单糖组分；多糖的单糖组分；o单糖的连接点类型；单糖的连接点类型；o单糖和糖苷键

26、的构型；单糖和糖苷键的构型；o重复单位重复单位; o确证方法：确证方法： 单糖的分离、鉴定：单糖的分离、鉴定：纸色谱法、纸色谱法、tlc、hplc、气气-质联用技术等；质联用技术等； 多糖的相对分子量及分子量分布测定：多糖的相对分子量及分子量分布测定：凝胶色谱法；凝胶色谱法； 糖苷键的连接方式及糖苷键的位置：糖苷键的连接方式及糖苷键的位置：红红外、核磁共振、化学反应后产物的分析等外、核磁共振、化学反应后产物的分析等；5. 多组分药物多组分药物 明确各组分的组成比例，对影响药效和毒明确各组分的组成比例，对影响药效和毒性的性的主要成分主要成分进行结构确证。进行结构确证。 可使用经典的提取方法或其它

27、分离技术，可使用经典的提取方法或其它分离技术，如制备色谱（如制备色谱（tlc，hplc），分离得到主要），分离得到主要药效成分单体，按单体项目要求进行化学结构药效成分单体，按单体项目要求进行化学结构确证。确证。 在组分多，含量少，难于得到单体时，可使用联机分析技在组分多，含量少，难于得到单体时，可使用联机分析技术，如气一质联用（术，如气一质联用（gcms），液），液质联用（质联用（lcms），），气气付利叶红外联用（付利叶红外联用（gcftir），质），质质联用（质联用（msms），辅助组分结构的验证及定量分析。），辅助组分结构的验证及定量分析。6. 不含金属元素的有机盐类或不含金属元素的有机

28、盐类或复合物复合物 应同时提供应同时提供成盐前后成盐前后的两套波谱和试验数的两套波谱和试验数据。据。 对于某些波谱测定有困难或不易说明其结构对于某些波谱测定有困难或不易说明其结构的盐或复合物，可测定药物酸根或碱基的波谱，的盐或复合物，可测定药物酸根或碱基的波谱，并结合其他试验项目进行确证。并结合其他试验项目进行确证。7. 金属盐类和络合物金属盐类和络合物 除通常要求的各项测试外，还应提供确证除通常要求的各项测试外，还应提供确证分子中金属元素的种类、存在形式和含量的有分子中金属元素的种类、存在形式和含量的有关图谱和分析数据。关图谱和分析数据。 不适于或不能测试金属盐本身的项目，可以不适于或不能测

29、试金属盐本身的项目，可以用成盐前的酸分子或配位体的相应测试结果进用成盐前的酸分子或配位体的相应测试结果进行佐证。行佐证。8. 半合成化合物半合成化合物 分子母核的结构为已知并可以确证其原分分子母核的结构为已知并可以确证其原分子母核结构在合成过程中未发生改变的，可子母核结构在合成过程中未发生改变的，可适当简化对母核部分结构的确证工作。重点适当简化对母核部分结构的确证工作。重点对对新引入基团新引入基团进行结构确证，可以结合原料进行结构确证，可以结合原料结构和合成路线进行论证和说明。结构和合成路线进行论证和说明。 如涉及构型确证，若母核手性中心构型没有改变时，重点如涉及构型确证，若母核手性中心构型没

30、有改变时，重点在于侧链和取代基中新引入手性中心的构型确定。在于侧链和取代基中新引入手性中心的构型确定。(四四)各项波谱和测试的技各项波谱和测试的技术要求术要求1. 1. 红外吸收光谱红外吸收光谱(ir)(ir) 基本原理：基本原理： 分子中化学键振动能级的跃迁。分子中化学键振动能级的跃迁。主要应用：主要应用： a.a.鉴定化合物的结构鉴定化合物的结构 有对照品、标准图谱有对照品、标准图谱 b.b.推测化合物的结构推测化合物的结构 确定特征官能团、区分晶型等确定特征官能团、区分晶型等 技术要求：技术要求： a. 按药典规定方法校正和检定仪器；按药典规定方法校正和检定仪器； b. 正确选择测试方法

31、和条件正确选择测试方法和条件 固体样品首选溴化钾压片法；固体样品首选溴化钾压片法； 离子交换离子交换-氯化钾压片；氯化钾压片； 晶型变化晶型变化-糊法；糊法； c. 准确、合理、充分的图谱解析准确、合理、充分的图谱解析; d. 按要求格式列表和撰写资料按要求格式列表和撰写资料; 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 仪器校正和检定仪器校正和检定 数据表数据表 解析解析吸收峰(cm-1) 强 度振动类型基 团 2. 2. 紫外吸收光谱紫外吸收光谱(uv)(uv) 基本原理：电子跃迁基本原理：电子跃迁 主要应用：推测共轭体系的骨架结主要应用：推测共轭体系的骨架结构（发色团、助色团）

32、构（发色团、助色团） 紫外光谱紫外光谱定性定性 吸收系数吸收系数定量定量o技术要求技术要求 a. 按药典规定方法校正和检定仪器；按药典规定方法校正和检定仪器； b. 通常要求三种溶剂：中性、通常要求三种溶剂：中性、0.1n hcl 、0.1n naoh； c. 要求定量，准确计算摩尔吸收系数；要求定量，准确计算摩尔吸收系数； d. 归属主要吸收谱带；归属主要吸收谱带； e. 数据列表说明；数据列表说明；o 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 仪器校正和检定仪器校正和检定 数据表数据表 解析解析 溶 剂 max 值基团和吸收带3.3.核磁共振氢谱核磁共振氢谱( (1h-nmr)

33、 ) 基本原理：基本原理： 利用原子核的核自旋现象，通过一定利用原子核的核自旋现象，通过一定 振振动频率的电磁波照射时，原子核吸收电动频率的电磁波照射时，原子核吸收电 磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。主要应用主要应用 可提供供试品中氢原子数目、周围化学可提供供试品中氢原子数目、周围化学环境、相互间关系、空间排列等信息。环境、相互间关系、空间排列等信息。 技术要求技术要求 a. 应使用应使用200mhz以上高分辨以上高分辨nmr仪。仪。 b. 对各项测试条件应有明确、详尽的说明，如对各项测试条件应有明确、详尽的说明，如仪器型号、规格、溶剂、内标。仪器型

34、号、规格、溶剂、内标。 c. 对分子中全部对分子中全部h原子均要有明确的解析和归原子均要有明确的解析和归属。属。 d. 对复杂结构化合物，应考虑采用合适的其它对复杂结构化合物，应考虑采用合适的其它技术加以佐证。技术加以佐证。 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 溶剂、内标溶剂、内标 给出原子编号的分子结构式给出原子编号的分子结构式 数据表数据表 (如有对照品或文献数据可以对比列入表中) 解析解析原子序号化学位移质子数多重性 j 值相应质子4.4.核磁共振碳谱核磁共振碳谱( (13c-nmr) ) 基本原理基本原理： 利用原子核的核自旋现象，通过一定利用原子核的核自旋现象，通过一定 振动频率的电

35、磁波照射时，原子核吸收电振动频率的电磁波照射时，原子核吸收电 磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。 主要应用主要应用: : 可提供供试品中碳原子的数目、所处的可提供供试品中碳原子的数目、所处的不同化学环境信息。不同化学环境信息。 技术要求技术要求 a. 对各项测试条件应有明确、详尽的说明，对各项测试条件应有明确、详尽的说明，如仪器型号、规格、溶剂、内标。如仪器型号、规格、溶剂、内标。 b. 在图谱复杂时，应使用质子噪声去偶或偏在图谱复杂时，应使用质子噪声去偶或偏共振去偶技术，使图谱简化。共振去偶技术，使图谱简化。 c. 对分子中全部对分子中全部c原子均要

36、有明确的解析和归原子均要有明确的解析和归属。属。 d. 对复杂结构化合物，可与类似结构化合物的对复杂结构化合物，可与类似结构化合物的化学位移进行计算比较，确定合理结构。化学位移进行计算比较，确定合理结构。 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 溶剂溶剂 给出碳原子编号的分子结构式给出碳原子编号的分子结构式 数据表数据表 (如有对照品或文献数据可以对比列入表中) 解析解析 碳原子序号 化学位移 碳原子类型5. 其他核磁共振谱其他核磁共振谱 deptdept谱谱: :可区分碳原子的类型可区分碳原子的类型; ;1 1h h1 1hcosy: hcosy: 可以显示相隔可以显示相隔2 23 3键相互之间

37、键相互之间存在偶合的质子对信息存在偶合的质子对信息; ;c- hcosy (hmqc ,c- hcosy (hmqc ,异核多量子相关谱异核多量子相关谱): ): 可可以了解分子中以了解分子中c-hc-h联结情况联结情况; ; hsqc ( hsqc (异核单量子相关谱异核单量子相关谱):):用于测定用于测定1 1h-h-1313c c相关相关信息，可以直接明确信息，可以直接明确c c、h h之间的连接关系之间的连接关系; ; hmbc ( hmbc (异核多重键相关谱异核多重键相关谱):):可以显示可以显示1 1h h、1313c c 之间之间远程偶合的信息，即相隔二键和三键的远程偶合的信息

38、，即相隔二键和三键的1 1h h、1313c c之间相之间相关信号关信号; ;解析化合物中存在的结构单元，推测化合物解析化合物中存在的结构单元，推测化合物中各官能团、结构单元之间的连接关系中各官能团、结构单元之间的连接关系; ; 1919f f、3131p p等等: :可提供相应元素的种类及数目、在分可提供相应元素的种类及数目、在分子中所处的化学环境等信息子中所处的化学环境等信息; ; 6. 质谱(ms) 基本原理：基本原理： 将气体分子经电子流轰击将气体分子经电子流轰击, ,使分子中的电子成为使分子中的电子成为带正电荷的分子离子带正电荷的分子离子, ,而后裂解成一系列的碎片离子而后裂解成一系

39、列的碎片离子, ,再通过磁场使不同质荷比的正离子分离并记录其相再通过磁场使不同质荷比的正离子分离并记录其相对强度对强度, ,画出质谱图。画出质谱图。 主要应用：主要应用： 提供分子离子峰、碎片峰、丰度等信息，可以确定提供分子离子峰、碎片峰、丰度等信息，可以确定分子量、分子式以及推测部分结构单元。分子量、分子式以及推测部分结构单元。 对含有同位素元素对含有同位素元素( (如如clcl、brbr等等) )的药物的药物, ,利用同位素利用同位素簇的丰度比，可推断药物中部分元素的种类、数量，乃簇的丰度比，可推断药物中部分元素的种类、数量，乃至分子式、裂解方式等。至分子式、裂解方式等。技术要求技术要求:

40、 a. 应尽量设法获得化合物分子离子峰。当用应尽量设法获得化合物分子离子峰。当用ei法不能法不能出现分子离子峰时，可试用其它电离源，如出现分子离子峰时，可试用其它电离源，如ci，fab，fi，fd等。等。 b. 所获数据按规定列表，并对重要的碎片离子峰的所获数据按规定列表，并对重要的碎片离子峰的产生进行解释，提供离子裂解图。产生进行解释，提供离子裂解图。 c. 高分辨质谱不能反映药品的纯度和结晶水，结晶溶高分辨质谱不能反映药品的纯度和结晶水，结晶溶剂，残留溶剂的情况。剂，残留溶剂的情况。 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 数据表数据表 裂解图裂解图 解析解析 m/ z 相对

41、丰度相对丰度 碎片离子碎片离子7. 元素分析 主要应用：主要应用： 确定元素组成、分子式确定元素组成、分子式; ; 除氧元素外，其余各种元素一般均能准确测定除氧元素外，其余各种元素一般均能准确测定其含量。其含量。 可以反映结晶水可以反映结晶水/ /结晶溶剂、成盐化合物的酸结晶溶剂、成盐化合物的酸根和碱基等。根和碱基等。 c c、h h、n n元素可采用自动元素分析仪测定，其元素可采用自动元素分析仪测定，其他元素可采用适宜的物理或化学方法测定。他元素可采用适宜的物理或化学方法测定。 技术要求：技术要求： a. 应详细说明使用仪器、测定方法及条件。应详细说明使用仪器、测定方法及条件。特别是对测试样

42、品的预处理方法、条件。特别是对测试样品的预处理方法、条件。 b. 同一样品测定两次，两次实验数据同时列同一样品测定两次，两次实验数据同时列出，不取平均值。出，不取平均值。 c. 应给出计算理论值所依据的分子式，包括应给出计算理论值所依据的分子式，包括结晶水（或结晶溶剂结晶水（或结晶溶剂) 。列表。列表比较实测值与理比较实测值与理论值（一般要求误差不超过论值（一般要求误差不超过0.30.3），初步判定），初步判定供试品与目标化合物的分子组成是否一致。供试品与目标化合物的分子组成是否一致。 d. d. 附测试报告单的复印件。附测试报告单的复印件。8. 热分析热分析 基本原理：基本原理： 采用程序控

43、温下，精确记录待测物质理化性采用程序控温下，精确记录待测物质理化性质与温度的关系，研究其受热过程中晶型转变、质与温度的关系，研究其受热过程中晶型转变、熔融、升华等物理变化和脱水、热分解、氧化、熔融、升华等物理变化和脱水、热分解、氧化、还原等化学变化。还原等化学变化。 主要应用：主要应用： 差示扫描量热法（差示扫描量热法（dsc): 测定熔点、测定熔点、结晶水结晶水/结晶溶剂、考察晶型等。结晶溶剂、考察晶型等。 热重法（热重法（tga): 测定结晶水、吸附水和测定结晶水、吸附水和结晶溶剂、分解温度等。结晶溶剂、分解温度等。 技术要求：技术要求： a. 应说明使用仪器型号、参数设定值，包括升温应说

44、明使用仪器型号、参数设定值，包括升温度速度、样品重量、温度范围。度速度、样品重量、温度范围。 b. 供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测定。定。 c. 差热分析曲线表达：纵坐标为热流率（差热分析曲线表达：纵坐标为热流率（dp/dt），），恒坐标为温度（恒坐标为温度（）。气体一般为氮气，流速为）。气体一般为氮气，流速为40ml/min。 热重分析曲线表达：纵坐标为重量（热重分析曲线表达：纵坐标为重量（mg）或重）或重量百分数，横坐标为温度（量百分数，横坐标为温度（），气体一般为氮气，），气体一般为氮气，流速为流速为40ml/min。 资料撰写格式资料撰

45、写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 测试结果和讨论测试结果和讨论9.x9.x射线衍射射线衍射 粉末粉末x-x-射线衍射射线衍射 主要应用主要应用: : a. a. 固体状态下单一化合物的鉴别固体状态下单一化合物的鉴别 b. b. 晶型确定晶型确定 c. c. 晶态与非晶态物质的判断等晶态与非晶态物质的判断等 单晶单晶x射线衍射射线衍射 主要应用主要应用: a. 化合物的骨架结构信息化合物的骨架结构信息 b. 化合物的相对或绝对构型化合物的相对或绝对构型 c. 构象及差向异构构象及差向异构 d. 盐键及配位键盐键及配位键 f. 结晶水结晶水/溶剂溶剂 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件

46、测试条件 结构解析结构解析 晶体学参数晶体学参数 结构测定方法结构测定方法 结构数据结构数据 结构图结构图 结论结论10. 10. 综合解析综合解析 综合解析的一般过程综合解析的一般过程: :a. a. 确定化合物的分子式确定化合物的分子式 元素分析元素分析 质谱法（尤其是高分辨质谱）质谱法（尤其是高分辨质谱） 综合各种谱图提供的碳、氢等原子数综合各种谱图提供的碳、氢等原子数b. b. 根据分子式计算不饱和度根据分子式计算不饱和度c. c. 确定分子中存在的主要官能团和结构单元确定分子中存在的主要官能团和结构单元d. d. 明确各官能团、结构单元的连接方式明确各官能团、结构单元的连接方式e.

47、e. 对构型、晶型、结晶水对构型、晶型、结晶水/ /结晶溶剂进行分析结晶溶剂进行分析 技术要求：技术要求： a. a. 有对照品有对照品 样品和对照品的测试结果是否一致样品和对照品的测试结果是否一致 波谱信号的归属波谱信号的归属 b. b. 无对照品无对照品 详细的解析、正确的归属详细的解析、正确的归属 参考文献可以作为重要的参考资料参考文献可以作为重要的参考资料 资料撰写要求：资料撰写要求： 简明扼要简明扼要 有机有机 合理合理 深入深入 稳定性研究稳定性研究资料撰写资料撰写 的基本要求的基本要求 -申报资料申报资料14申报资料的格式和内容申报资料的格式和内容 一一.供试品来源及批号供试品来

48、源及批号 二二.试验内容试验内容 1. 加速试验加速试验 (402、rh755 ) 2. 长期试验长期试验 (252、rh6010 三三.考察项目考察项目 四四.试验结果试验结果 五五.结论与讨论结论与讨论 六六.附图附图 ( (一一) )稳定性研究的基本内容稳定性研究的基本内容和特点和特点影响因素试验影响因素试验加速试验加速试验长期留样试验长期留样试验 三种试验的比较三种试验的比较 时时 间间 条条 件件 目目 的的影响因素影响因素试验试验 10天天最为剧烈最为剧烈初步确定药品的性质及包初步确定药品的性质及包装容器和材料，估测加速装容器和材料，估测加速与长期留样应采用的温度与长期留样应采用的

49、温度和湿度。和湿度。加速试验加速试验6个月个月较为剧烈较为剧烈初步评估正常条件下放置初步评估正常条件下放置更长时间的稳定性。更长时间的稳定性。长期试验长期试验时间最长，贯穿时间最长，贯穿研究工作的始终研究工作的始终模拟上市产品模拟上市产品的储存条件的储存条件是确定有效期、储存条件是确定有效期、储存条件和包装材料的最终依据。和包装材料的最终依据。 1. 影响因素试验影响因素试验 新药新药: 原料药和制剂均建议进行该项试验，制剂的原料药和制剂均建议进行该项试验，制剂的稳定性试验可以在处方筛选和工艺设计过程中稳定性试验可以在处方筛选和工艺设计过程中进行进行; 已有国家标准品种已有国家标准品种: 暂不

50、要求，但鼓励研发企业进行制剂的影响暂不要求，但鼓励研发企业进行制剂的影响因素考察因素考察; (1)(1)试验的目的试验的目的 a. a. 考察药物在极端条件下固有的稳定性，了解其考察药物在极端条件下固有的稳定性，了解其降解途径和可能的降解产物；同时得到的降解产物降解途径和可能的降解产物；同时得到的降解产物也可用于有关杂质检查的方法适用性评估。也可用于有关杂质检查的方法适用性评估。 b. 为制剂工艺筛选、包装材料和容器的选择、为制剂工艺筛选、包装材料和容器的选择、贮存条件的确定等提供依据。贮存条件的确定等提供依据。 c. 为加速试验和长期试验应采用的温度和湿度等为加速试验和长期试验应采用的温度和

51、湿度等条件提供依据。条件提供依据。 (2) (2) 试验的一般要求试验的一般要求 典型的影响因素试验典型的影响因素试验: 光照光照高温高温高湿高湿其它：氧化、其它：氧化、ph影响等。影响等。 原料药原料药:将一批供试品置适宜的容器将一批供试品置适宜的容器中中(量瓶或培养皿量瓶或培养皿),摊成摊成5mm厚的薄层厚的薄层(疏松原料药摊成疏松原料药摊成10mm厚的薄层厚的薄层)进行进行试验。试验。 制剂制剂:除去内包装的最小制剂单位除去内包装的最小制剂单位,分散为单层置适宜的条件下进行。分散为单层置适宜的条件下进行。 如试验结果不明确如试验结果不明确,应加试应加试2个批号的样品。个批号的样品。 光照

52、试验光照试验 供试品放在装有日光灯的光照箱内供试品放在装有日光灯的光照箱内, 于照度于照度 4500lux500lux下放置下放置10天，于天，于 第第5天和第天和第10 天取样。天取样。 ich q1b规定样品总照度不低于规定样品总照度不低于 1.2*106lux.hr， 近紫外能量不低于近紫外能量不低于 200w.hr/m2。 高温试验高温试验 60下放置下放置10天，于第天，于第5天和第天和第10天取样，检测天取样，检测评价指标。评价指标。 若供试品有明显变化（如含量下降若供试品有明显变化（如含量下降5%），则在），则在40下同法进行试验。下同法进行试验。若若60无明显变化，不再进行无明

53、显变化，不再进行40试验。试验。 ich规定的试验温度为规定的试验温度为: 高于加速试验温度高于加速试验温度10，如如50、60进行。进行。 高湿试验高湿试验 在在25、905rh下放置下放置10天，于第天，于第5天和第天和第10天取样，指标可包括吸湿增重项。天取样，指标可包括吸湿增重项。 若吸湿增重若吸湿增重5%以上，则在以上，则在25、75 5rh下同法进行试验；若吸湿增重下同法进行试验；若吸湿增重5%以下，以下，且其他考察项目符合要求，则不再进行此项试且其他考察项目符合要求，则不再进行此项试验。验。 ich规定的试验湿度为规定的试验湿度为: 高于加速试验高于加速试验75%rh的湿度进行。

54、的湿度进行。 热循环（冻融）试验热循环（冻融）试验 对于一些特殊的药品，如温度变化可能引起的物对于一些特殊的药品，如温度变化可能引起的物相分离、黏度减小、沉淀或聚集的药品，还需要通相分离、黏度减小、沉淀或聚集的药品，还需要通过热循环试验来验证其运输或使用过程中的稳定性。过热循环试验来验证其运输或使用过程中的稳定性。 如：凝胶剂、霜剂、软膏剂、栓剂、难溶性药如：凝胶剂、霜剂、软膏剂、栓剂、难溶性药物的注射剂等。物的注射剂等。美美fdafda关于关于“稳定性指导原则稳定性指导原则草案草案” （19981998年年6 6月发表）月发表） 对于易发生物相分离、黏度减小、沉淀或聚集对于易发生物相分离、黏

55、度减小、沉淀或聚集的药品需通过热循环实验来验证其运输或使用过程的药品需通过热循环实验来验证其运输或使用过程中的稳定性。作为影响因素实验的一部分，应模拟中的稳定性。作为影响因素实验的一部分，应模拟药品在运输与使用过程中可能碰到的温度条件下，药品在运输与使用过程中可能碰到的温度条件下，循环考察上市包装的药品的稳定性。循环考察上市包装的药品的稳定性。 具体方法如下：具体方法如下： a. a. 对于温度变化范围在冰点以上的药品，热对于温度变化范围在冰点以上的药品，热循环实验应包括三次循环，每次循环应在循环实验应包括三次循环，每次循环应在2 288两天，然后在两天，然后在4040加速条件下考察两天。加速

56、条件下考察两天。 b. b. 对于可能暴露于冰点以下的药品，热循环对于可能暴露于冰点以下的药品，热循环实验应包括三次循环，每次循环应在实验应包括三次循环，每次循环应在-10-10- -2020两天，然后在两天，然后在4040加速条件下考察两天。加速条件下考察两天。 c. c. 对于吸入气雾剂，推荐的热循环实验包括一对于吸入气雾剂，推荐的热循环实验包括一天内进行三到四次六小时的循环，温度在冰点以天内进行三到四次六小时的循环，温度在冰点以下和下和4040（757585%rh85%rh）之间，该实验需持续考）之间，该实验需持续考察六周。察六周。 d. d. 对于冷冻保存的药品，应考察该药在微波炉对于

57、冷冻保存的药品，应考察该药在微波炉或热水浴中加速融化时的稳定性，除非说明书中或热水浴中加速融化时的稳定性，除非说明书中明确禁止如此操作。明确禁止如此操作。2. 加速试验加速试验 新药申请以及已有国家标准品种新药申请以及已有国家标准品种的申请，均需进行该项试验。的申请，均需进行该项试验。(1) 试验的目的试验的目的 a. 通过加快市售包装中药品的化学或物理变化速通过加快市售包装中药品的化学或物理变化速度，考察药品的稳定性，为包装、配送及贮存提供度，考察药品的稳定性，为包装、配送及贮存提供必要的资料。必要的资料。 b. 初步估测短时期内超过正常贮存条件（如运输初步估测短时期内超过正常贮存条件（如运

58、输中可能出现的持续几天的高温）时对样品稳定性的中可能出现的持续几天的高温）时对样品稳定性的影响。影响。 c. 加速试验结果可以作为长期稳定试验加速试验结果可以作为长期稳定试验 的补充，的补充，估算在非加速条件下更长时间内的化学变化，为初估算在非加速条件下更长时间内的化学变化，为初步确定产品的有效期提供依据。步确定产品的有效期提供依据。 (2)试验的一般要求试验的一般要求 模拟市售包装三批样品，比长期放置温度至少高模拟市售包装三批样品，比长期放置温度至少高15的条件下进行。的条件下进行。 一般可选择一般可选择402、755rh条件下，进行条件下，进行6个月试验，在试验期间第个月试验，在试验期间第

59、0、1、2、3、6个月末取样。个月末取样。 如不符合质量标准要求，则应在中间条件即如不符合质量标准要求，则应在中间条件即302、605rh同法进行同法进行6个月以上的试验。个月以上的试验。 对采用不可透过性包装的含有水性介质的制剂对采用不可透过性包装的含有水性介质的制剂(如如:溶液剂、混悬剂、乳剂、注射剂等溶液剂、混悬剂、乳剂、注射剂等):可不要求相可不要求相对湿度对湿度; 对采用半通透性容器包装的制剂对采用半通透性容器包装的制剂(如如:多层共多层共挤挤pvc软袋装的注射液软袋装的注射液,塑料瓶装的滴眼液、滴鼻液塑料瓶装的滴眼液、滴鼻液等等): 应在应在402、20 5rh条件下进行条件下进行

60、; 乳剂、混悬剂、软膏剂、糊剂、凝胶剂、眼膏乳剂、混悬剂、软膏剂、糊剂、凝胶剂、眼膏剂、栓剂、气雾剂、泡腾片及泡腾颗粒等剂、栓剂、气雾剂、泡腾片及泡腾颗粒等:直接采用直接采用: 302、655rh条件下进行条件下进行; 对热敏感药物的加速试验可在对热敏感药物的加速试验可在252、 605rh条件下同法进行。条件下同法进行。3. 长期试验长期试验 新药申请以及已有国家标准品种的新药申请以及已有国家标准品种的申请，均需进行该项试验。申请，均需进行该项试验。 (1) 试验的目的试验的目的 主要考察原料药或制剂在市售包装条件下主要考察原料药或制剂在市售包装条件下,在运输、保存、使用过程中的稳定性在运输