园林祝圣洲长寿花组培技术的探讨

1、 编号：中国农业大学现代远程教育毕业论文（设计）长寿花组培技术的探讨学 生 祝圣洲 指导教师 专 业 园林学 层 次 专升本 批 次 学 号 学习中心 工作单位 年 月中国农业大学网络教育学院制独 创 性 声 明本人声明所呈交的毕业论文（设计）是我个人进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文（设计）中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在毕业论文（设计）中作了明确的说明并表示了谢意。学生签名： 时间： 年 月 日关于论文（设计）使用授权的

2、说明本人完全了解中国农业大学网络教育学院本、专科毕业论文（设计）工作条例（暂行规定）对：“成绩为优秀毕业论文（设计），网络教育学院将有权选取部分论文（设计）全文汇编成集或者在网上公开发布。如因著作权发生纠纷，由学生本人负责”完全认可，并同意中国农业大学网络教育学院可以以不同方式在不同媒体上发表、传播毕业论文（设计）的全部或部分内容。中国农业大学网络教育学院有权保留送交论文（设计）的复印件和磁盘，允许论文（设计）被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编论文（设计）。保密的毕业论文（设计）在解密后应遵守此协议学生签名： 时间： 年 月 日 密级： 长寿花组培技术的探讨摘要：在观赏

3、花卉中选取长寿花，旨在说明如何在短时间内提高产量。选用长寿花茎段作为外植体，选用不同浓度的6-BA对长寿花茎段形成不定芽与不定芽的诱导、增殖生长的影响，和选用不同浓度的IBA对长寿花不定芽丛生根的影响及研究不同消毒时间对外植体的影响。结果表明：不同浓度的激素对长寿花茎段形成不定芽及不定芽增殖有一定的影响，最适宜长寿花茎段形成不定芽与不定芽的诱导的培养基为：MS十6-BA 2.0mgL +IBA0.2mgL,最适合长寿花不定芽增殖的培养基是MS+6-BA1.5mgL +NAA0.2mgL，最适合长寿花不定芽生根的培养基为1/2MS+IBA0.1mgL ，最合理的84消毒液消毒的时间是8min。从

4、以上几个方面的实验，可以提高长寿花产量，对园林布景有一定的影响。关键词：长寿花；组织培养；消毒；快繁；不定芽增殖目 录引言11材料与方法1 1.1材料1 1.2方法2 1.2.1不同消毒时间处理2 1.2.2不定芽的诱导2 1.2.3增殖培养2 1.2.4生根培养22 结果与分析3 2.1不同消毒时间对外植体的影响 3 2.2不同浓度的生长调节剂对外植体不定芽诱导的影响3 2.3不同浓度的生长调节剂对长寿花增殖培养的影响4 2.4 不同浓度的生长调节剂对长寿花生根培养的影响43 小结与讨论5谢辞5参考文献6引言近年来,花卉以其较高的经济利益和社会、环境效益而吸引越来越多人的重视,花卉业已成为当

5、今世界上最具活力的产业之一。我国花卉产业的规模化发展始于20世纪80年代,自90年代初组培育苗技术开始在花卉生产中应用推广,特别是在鲜切花的规模化生产上,每年通过组培生产的种苗达几千万株,主要有长寿花、香石竹、满天星、情人草、月季、蝴蝶兰、非洲菊、菊花等,这些鲜切花种苗的90%以上是组培苗或以组培苗为母本的扦插苗。长寿花(Kahmchoe blossfeldiana)别名寿星花、假川莲、圣诞伽蓝菜、矮生伽蓝菜，景天科伽蓝菜属多年生肉质草本植物1，原产非洲。喜温暖稍湿润和阳光充足环境，不耐寒，生长适温为15-25，冬春开花，圆锥状聚伞花序，花多数，花色有红、橙红、红、绯红、桃红、黄多种2，花期长

6、2-3个月3。长寿花植株矮，株型丰满，是盆栽观花、观叶优良花卉，深受人们喜爱4。长寿花临近圣诞节日开花，拥簇成团，花色丰富，是惹人喜爱的室内盆栽花卉。长寿花还是元旦和春节期间馈赠亲友和长辈的理想盆花。至今，世界的花卉出口大国荷兰，1995年长寿花的产值己达到3330亿美元，列盆花生产的第三位。在丹麦，盆栽长寿花已成为丹麦盆栽花卉之冠，产量与产值均列第一位。说明长寿花在盆栽花卉中占有重要的地位，并成为国际花卉市场中发展最快的盆花之一。长寿花一般不结种子, 主要靠茎段及叶片扦插繁殖5。中国栽培长寿花的时间不长，20世纪30年代引种作为多浆植物栽培，栽培数量很少，主要在大城市的公园或大学的小温室中。

7、到90年代才从国外引种优良品种，由于其色彩丰富，开始在公共场所的栽植槽中摆放。目前，一些合资园艺公司已小批量生产供应市场。由于长寿花花期长、耐干旱、栽培容易、装饰效果好，其发展的前途还是看好的。在园林中因品种不同，可用于岩石园、专类园、沼泽园、地被、花境、花带、丛植、片植、花坛等。长寿花作为种植体，植株低矮，花繁密，有很好的景观价值。本文利用长寿花的茎段进行组织培养，目的是找出长寿花最佳84消毒的时间及诱导长寿花茎段产生愈伤组织、不定芽增殖及不定芽生根的最佳激素配比，对优良品系的保存和扩增有一定的意义，最重要意义比常规方法更有经济效益。希望通过本试验为发展长寿花大规模生产奠定基础，便于在园林中

8、应用。1材料与方法1.1材料本试验温室内无病虫害生长健壮的长寿花盆栽为试材来源，根据实验需要取其茎段为外植体材料。1.2方法以长寿花茎段为外植体，选择生长势佳的长寿花茎段剪成长为1厘米左右（带腋芽），放入大烧杯中用自来水冲洗40分钟后，放到滤纸上吸干水分。用酒精棉擦拭工具和台面，点燃酒精灯。将外植体放入装有75%酒精的培养瓶中振荡摇晃30秒，后用无菌水清洗一遍，在酒精灯外焰附近倒水，再倒入84消毒液以不同时间处理后，用无菌水冲洗45遍，每次2分钟。 1.2.1不同消毒时间处理用75%酒精灭菌消毒30 s, 但A1：用84消毒液消毒6min，A2：用84消毒液消毒消毒8min，A3：用84消毒液

9、消毒消毒10min。在培养基MS+6-BA l.0mgL +IBA 02 mgL各接种10瓶，每瓶放置3个外植体,一星期以后观察统计,比较不同灭菌消毒方式的效果，制表1。1.2.2不定芽的诱导将长寿花外植体按照3个不同培养基方案，即：B1：MS+6-BA l.0 mgL +IBA 02 mgL处理14瓶，B2；MS+6-BA l.5 mgL+IBA02 mgL处理15瓶，B3:MS十6-BA 2 mgL+IBA0.2mgL处理8瓶，每瓶放置3个外植体。接种后观察、记录不定芽形成情况，观察数据并记录，制表2，表3。1.2.3增殖培养将无菌萌发的茎段诱导的芽苗接种在继代培养基上，12-18d后可见

10、基部形成不定芽丛，4周后即可长成约2cm小芽，平均每个材料可增殖3-4倍，苗高2-3cm。经30天左右就长满培养瓶，即可再继代培养。按照3种不同培养基方案，即C1:MS+6-BA1.0mgL+NAA0.2mgL；C2:MS+6-BA1.5mgL +NAA0.2mgL ；C3:MS+BA2.OmgL +NAA0.2mgL；每种培养基各转接10瓶，每瓶转接5个未生根的不定芽。接种后观察、记录不定芽增殖情况，观察数据并记录，制表4。以上培养基均附加蔗糖，琼脂，pH值为5.8，并在高压灭菌锅中灭菌。1.2.4生根培养将增殖得到的不定芽丛接种到生根培养基中诱导生根，不定芽丛在生根培养基上生长一周后，可观

11、察到不定芽丛基部开始有白色根长形成。随着时间的推移，根毛也逐渐增多。到3周后，可以观察到不定芽丛长出1-3条的肉质的，白色的根。之后根的数量渐渐增多，并逐渐伸长，根长为0.5-2.5cm，且芽丛的高度也有比较明显的增长。按照3种不同培养基方案，即D1:1/2MS+IBA0.05mgLD2:1/2MS+IBA0.1mgL D3:1/2MS+IBA0.15mgL每种培养基各转种10瓶，每瓶转接5个的不定芽丛。接种后观察、记录不定芽丛生根情况，3周后观察数据并记录，制表5。2结果与分析2.1不同消毒时间对外植体的影响表1：不同消毒时间对长寿花嫩叶片再生能力的影响消毒时间/分钟接种瓶数天数成活瓶数死亡

12、率/% 污染率/%61071090810760401010701000由表1可以看出,不同灭菌时间对长寿花茎段的污染率影响较大。消毒时间8分钟效果最好,污染率为40%,未污染的茎段嫩绿；消毒时间6分钟有9瓶污染,污染率达90%； 消毒时间10分钟没有被污染,但茎段被杀死且均变褐色。从污染率可看出，随消毒时间的增加而减少，在一定时间达到最低，但随时间的增加而死亡数增加。消毒剂处理时间不宜过长，时间过长也要杀死植物，从表中可知消毒时间为分钟是长寿花灭菌最佳时间，在这时间处理污染率最低，死亡率也最低。84消毒液是一种以次氯酸钠为主的高效消毒剂，主要成分为次氯酸钠。次氯酸钠溶液具有高效、快速的消毒作用

13、，去除容易，并且安全、无毒对植物及人体无毒副作用，价格便宜，可降低实验成本，也用利于环境的保护。制备外植体在一定处理时间范围内可安全使用。2.2不同浓度的6-BA对长寿花不定芽诱导的影响由表2得接种第9天时,发现三种培养基均有污染，但B2污染率最低。由表3可以知道，不同培养基对长寿花茎段不定芽诱导的情况不同。经过18天时接左右的培养，长寿花茎段在不同的培养基中有产生了不定芽，并随着培养天数的增加而增加。其中，B2培养基MS+6-BA l.5 mgL+IBA02 mgL分化的诱导的不定芽的芽数最高, 芽苗也最健壮，嫩芽的颜色也最绿，诱导率达66.7%。因此，B2培养基适合长寿花茎段不定芽的分化诱

14、导。表2：9天后不同浓度的6-BA对长寿花茎段不定芽诱导的影响培养基消毒时间（min）接种瓶数成活瓶数污染瓶数污染率%B17.51410428.5B27.51512320.0B37.586225.0表3：18天后不同浓度的6-BA对长寿花茎段不定芽诱导的影响培养基接种数诱导数诱导率生长情况B1422457%产生不定芽少，色淡绿B2453066.7%产生不定芽多, 浓绿B3241562.5%产生不定芽较多，色绿（注：B1:MS+6-BA l.0 mgL +IBA 02 mgL，B2:MS+6-BA l.5 mgL+IBA02 mgL，B3:MS十6-BA 2 mgL+IBA0.2mg）2.3不同

15、浓度的6-BA对长寿花增殖培养的影响表4:不同浓度的6-BA对长寿花增殖培养的影响培养基接种芽数增殖数增殖倍数C1501673.34C2502034.06C3501863.72（注：C1:MS+6-BA1.0mgL+NAA0.2mgL，C2:MS+6-BA1.5mgL +NAA0.2mgL ,C3:MS+BA2.OmgL +NAA0.2mgL）由表4可以看出，中等浓度的6-BA可促进芽的分化，浓度较高或较低则反而抑制生长. C2培养基的增殖不定芽的数是最高的，C3次之，C1最差。因此， C2培养基适合长寿花茎段不定芽的增殖。但随着培养时间的增加，培养瓶中的营养物质逐渐的消耗，生长状态变差，应及

16、时转接到新鲜的培养瓶中，以保持其旺盛的生长力。2.4不同浓度的生长调节剂对长寿花生根培养的影响由表5可知，当IBA浓度为0.1mgL时，生根率最高为86%，根毛少，毎芽丛生根数多，而且芽苗生长健壮。当浓IBA度从0.05mgL到0.1mgL，生根率是呈增长趋势。但随着浓度的升高，生根率呈下降趋势，对根的生长起到了抑制作用。因此最适合长寿花生根的培养基为D2:1/2MS+IBA0.1mgL 。表5 不同浓度的生长调节剂对长寿花生根的影响培养基接种芽丛数生根数生根率%D1503672D2504692D3503468（注：D1:1/2MS+IBA0.05mgL，D2:1/2MS+IBA0.1mgL

17、,D3:1/2MS+IBA0.15mgL）3小结结果表明,长寿花茎段消毒的最佳处理为用84消毒液消毒8分钟，但注意对幼嫩的茎段掌握好消毒时间，不足则消毒效果不彻底，过之则是外植体受到伤害,都会对实验的下一个步骤产生影响。其原理是根据不同浓度的激素对长寿花茎段形成不定芽及不定芽增殖有一定的影响，最适宜长寿花茎段形成不定芽与不定芽的诱导的培养基为：MS十6-BA 2.0mgL +IBA0.2mgL,最适合长寿花不定芽增殖的培养基是MS+6-BA1.5mgL +NAA0.2mgL，最适合长寿花不定芽生根的培养基为1/2MS+IBA0.1mgL ，最合理的84消毒液消毒的时间是8min。不同的培养基中

18、激素的种类、浓度对长寿花茎段诱导不定芽，不定芽增殖和不定芽生根有很大的影响。供试的3种不定芽诱导培养基均可诱导出不定芽,培养基B1、B2、B3培养的外植体都要经过愈伤阶段然后再分化出不定芽,而培养基B：MS+6-BA l.5 mgL+IBA02 mgL分化的愈伤组织生长健壮, 浓绿, 产生不定芽多, 可以确定其为长寿花茎段的最佳分化培养基,而从C2 ：MS+6-BA1.5mgL +NAA0.2mgL，增殖不定芽的数目最多。无菌苗的生根诱导相对较为容易，在本次试验中，不定芽生根的生根率都在65%以上。IBA对于根的产生的促进作用是显而易见的，但是要掌握好IBA的浓度，过多过少都会影响不定芽生根。

19、这三个培养基可缩短长寿花组培时间。 在长寿花增殖培养过程中出现了玻璃化现象，表现为长寿花叶片呈畸形生长、嫩梢肿胀，质地呈水浸透明或半透明状，枝脆弱易碎。试管苗玻璃化是植物组织培养过程中所特有的一种生理失调或者生理病变，严重影响繁殖率的提高7。在不定芽分化，不定芽增殖的过程中，通过提高6-BA的浓度来到达比较高的增殖率，可能会出现试管苗的玻璃化现象。所以选择合适的激素以及合适的浓度在组织培养中是十分重要的。本实验采用的是温室内长寿花的茎段, 由于所选部位，生长环境的不同所需要的组培条件也有差异, 所以在尝试室外长寿花组织培养时需要在此基础上进一步探寻。谢辞这些年感谢老师，感谢学校的细心栽培。论文

20、即将完成之际，我的心情久久无法平静，从开始选题到顺利论文完成，有不知多少多少可敬的师长、给了我无数的帮助。经过几个月的查找资料、整理材料、写作论文，今天终于顺利的完成论文。论文得以完成，要感谢的人实在太多了，首先要感谢贾春蕾老师，因为论文是在贾老师的指导下完成的。贾老师渊博的专业知识，严谨的治学态度，精益求精的工作作风，诲人不倦的高尚师德。论文从选题到完成，每一步都是在贾老师的指导下完成的，倾注了贾老师大量的心血。 贾老师指引我的论文的任务书的确定，并对我在做论文数据是指出我实验过程中的错误。在论文初稿进行逐字批阅，指正出其中误谬之处，使我有了思考的方向，他的循循善诱的教导和不拘一格的思路给予

21、我无尽的启迪，她的严谨细致、一丝不苟的作风，将一直是我工作、学习中的榜样。同时选贾老师做指导老师的不在少数，加上本来就处于期末阶段，工作量之大可想而知，但在一次次的回稿中，精确到每一个字的的批改给了我深刻的印象，使我在论文之外明白了做学问所应有的态度。另外，要感谢在大学期间所有传授我知识的老师，是你们的教导使我有了良好的专业课知识，这也是论文得以完成的基础。 感谢所有给我帮助的老师和同学,谢谢你们！ 参考文献1施振周,刘祖棋.园林花木栽培新技术M.北京:中国农业出版社,19992华金渭等，长寿花的栽培技术J.农村实用工程技术,温室园艺,2004(11): 48.3程广有，名优花卉组织培养技术M

22、.北京: 科学技术出版社, 2001.4蔡玲,王以红,吴幼媚等.山苍子芽器官组培技术研究J.西部林业科学, 2010,( 4): 44-47.5苏慧, 尉红梅. 长寿花快繁体系的建立 J.内蒙古农业科技, 2005( 2): 23.6汤洁，长寿花叶片的组织培养与快速繁殖研究J.北方园艺,2007( 10):188-189.7李云，林果花菜组织培养快速育苗技术M.北京：中国林业出版社，2001:1328孙鹄. 园亭如画.建筑工人.2006(2)9孟兆祯. 中国风景园林的特色. 广东园林.2006(1)10陈宇英. 城市绿化常用园林建筑小品简介. 国土绿化.2001(6)11李健. 浅谈中国园林中

23、的景观建筑. 广东园林.2006(1)12胡宗荣. 中国古代园林建筑初探. 当代建设.1999(4)13夏更寿. 园林建筑小品的应用研究. 安徽农业科学,.2004(1)14张春霞. 浅谈建筑小环境在城市景观环境中的地位和作用. 安徽建筑.2002(1)15石红旗. 园林绿地中的明珠园林建筑小品. 科技情报开发与经济.2003(12)毕业论文（设计）开题报告论文题目长寿花的组织培养1.立题依据（包括研究背景、理论依据及立题意义）2.研究内容及方案（包括研究目标、论文提纲、预期达到的研究结果和创新点、完成论文需具备的条件以及参考文献等）3.进度安排（完成时间及撰写阶段计划，要求与学院毕业论文（设

24、计）进度安排相一致）一、研究背景、理论依据及立题意义在观赏花卉中选取长寿花为例，旨在说明如何在短时间内提高产量。选用长寿花茎段作为外植体，选用不同浓度的6-BA对长寿花茎段形成不定芽与不定芽的诱导、增殖生长的影响，和选用不同浓度的IBA对长寿花不定芽丛生根的影响及研究不同消毒时间对外植体的影响。结果表明：不同浓度的激素对长寿花茎段形成不定芽及不定芽增殖有一定的影响，最适宜长寿花茎段形成不定芽与不定芽的诱导的培养基为：MS十6-BA 2.0mgL +IBA0.2mgL,最适合长寿花不定芽增殖的培养基是MS+6-BA1.5mgL +NAA0.2mgL，最适合长寿花不定芽生根的培养基为1/2MS+I

25、BA0.1mgL ，最合理的84消毒液消毒的时间是8min。从以上几个方面的实验，可以提高长寿花产量，对园林布景有一定的影响。二、研究目标、论文提纲、预期达到的研究结果和创新点、完成论文需具备的条件以及参考文献研究目标：期望通过笔者的研究，在理论上有一定的突破，对园林建筑小品在园林设计中的应用有一定的指导意义。论文提纲：1、引言，介绍研究背景、目的和意义。2、介绍地被植物；玉环园林绿化；应用。3、结束语，对论文进行总结。预期达到的研究结果和创新点：通过研究，能对前人的研究成果进行归纳分析，对园林建筑小品在园林景观设计中的应用提出作者的看法。完成论文需具备的条件：相对充裕的时间、丰富的素材以及社

26、会实践。参考文献：1施振周,刘祖棋.园林花木栽培新技术M.北京:中国农业出版社,19992华金渭等，长寿花的栽培技术J.农村实用工程技术,温室园艺,2004(11): 48.3程广有，名优花卉组织培养技术M.北京: 科学技术出版社, 2001.4蔡玲,王以红,吴幼媚等.山苍子芽器官组培技术研究J.西部林业科学, 2010,( 4): 44-47.5苏慧, 尉红梅. 长寿花快繁体系的建立 J.内蒙古农业科技, 2005( 2): 23.6汤洁，长寿花叶片的组织培养与快速繁殖研究J.北方园艺,2007( 10):188-189.7李云，林果花菜组织培养快速育苗技术M.北京：中国林业出版社，2001:1328孙鹄. 园亭如画.建筑工人.2006(2)9孟兆祯. 中国风景园林的特色. 广东园林