大豆苷元对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

1、大豆苷元对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用作者：张生枝，钟星明，黄虎龙，陈洁玲，冒宸，叶丽 娟，曾靖【摘要】目的研究。方法应用大鼠离体心肌缺血再灌 注损伤模型，在灌流液中加入高、低剂量的大豆苷元。测定 冠脉流量、心率、左心室收缩压、左心室内压最大变化速率 及心肌组织乳酸脱氢酶(l dh)和心肌肌酸激酶活性的变化。 结果与溶剂组比较，大豆苷元能使左心室收缩压升高、左心 室内压最大变化速率增大；能使心肌ldh及ck的活性升高； 冠脉流量、心率未见明显变化。结论大豆苷元可通过增大左 心室内压最大变化速率、增强心肌收缩力及减少心肌酶的释 放对离体心脏缺血再灌注损伤起保护作用。【关键词】大豆苷元；缺血再

2、灌注损伤a bstract：objectivet oexplorethetherapeuticeffectsofdaidz yocardialischemia/ ardialischemia/rep lwasmadeandwastrea andlowdose). thecha rybloodflowlevels, entricularsystolicein (dd)onisolatedm reperfusionratmyoc erfusioninjurymode tedwithdd(highdose ngesofcoronaryarte heartrate,andleftv pressure,

3、aswellastheactivitiesoflact dh)andcreatinekina ated.resultscompar edwi ththedmsogroup eisolatedmyocardiaheleftventricularseleftventriculardihangingspeedincreaticactivitiesofldhissueincreased. thehenthetheleftventr ssuref schangingspe edandlimitstherele aseofckandldh.key words:daudzein (dd) ； myocard

4、ialischem ia/reperfusioninjury大豆苷元(daidzein，dd)系葛根中的主要成分之一，葛 根的有效成分为大豆苷元、染料木苷、黄豆黄苷、染料木素、 黄豆黄素。葛根素的临床应用非常广泛，对心脑血管疾病dflowlevelsandtheh bviouschange. concl ticeffectonmyocard usioninjurybecause esmyocardialcontraatedehydrogenase(l se (ck)wereinvestig,aftertreatment, thltissueshowedthatt ystolicpressure

5、,th astolicpressure1 sc sed,aswellasenzyma andckinmyocardialt coronaryarteryblooeartratesshowednoousionddhastherapeu ialischemia/reperf itdilatestheenhancctileforce,strongt iculardiastolicpre1，2、视网膜疾病3等具有良好疗效；大豆苷元也具 有抗心律失常4、抑制胆囊收缩5、耐缺氧6、影响 免疫器官7等作用。本实验通过lang endorff心脏灌流 装置研究dd对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。1材料与仪器药

6、物大豆苷元由沈阳药科大学植化教研室提供，纯度为98%,实验前用二甲基亚砜溶解，使用时用k-h液稀释至所 需浓度，ldh和ck检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。动物sd大鼠购自江西中医学院实验动物中心，体质量220250g，雌雄各半。仪器心脏灌流装置，rm6240bd型多道生理信号采集处理 系统，hss-1型恒温裕槽及lokpa压力换能器，均购自成都 仪器厂。2 方法心脏灌流及给药的方法健康sd大鼠24只，体质量220 250g,随机分为4组，每组6只，分别为心脏缺血再灌注模 型组，溶剂对照组(dmso)，dd高、低剂量组。大鼠10°/。水 合氯醛(3ml/kg)腹腔麻醉后，开胸迅

7、速取出心脏，置于4°c 改良k_h液中。迅速将主动脉套上langendorff心脏灌流装 置，以37°c新鲜k-h液、左心室收缩压、左心室内压最大变 化速率(土dp/d tmax)。用量筒测定同时间点各组的灌流量。 每个样本以心脏停灌前各项指标为1，计算出各时段的心脏灌流量、hr、lvsp及土dp/dtmax与心脏停灌前的比值。心肌组织生化指标测定心脏灌流结束后，将心肌组织制 成10%的匀浆，于-80°c保存。按试剂盒说明，测定各组心肌 组织乳酸脱氢酶(ldh )、心肌肌酸激酶(ck)活性。统计学方法运用prism统计软件，对各剂量药物处理组 与模型组之间进行单因

8、素方差分析。3结果dd对心脏缺血再灌注时lvsp, 士dp/dtmax的影响如 13所示，各剂量的dd均能在一定程度上增大lvsp和左心 室内压最大变化速率。两种浓度的dd对灌流量及心率无明 显影响。dd对心脏缺血再灌注时心肌ldh的影响高、低剂量dd再 灌注后，心肌ldi4的活性较模型组均升高。结果见图4。dd对心脏缺血再灌注损伤时心肌ck的影响低剂量dd再 灌注后，心肌ck的活性升高。结果见图5。4讨论心脏疾病是目前危害人类健康的三大疾病之一。20世纪 80年代以来，随着各种冠状动脉再通技术广泛应用于临床， 心肌再灌注损伤(myoc ardialreperfusioni njury； mr

9、i)越 来越受到重视。心肌缺血再灌注导致的心肌可逆性或不可逆 性损伤均造成心肌舒缩功能降低，表现为持久的心输出量减 少，心室内压最大变化速率降低，再灌性心律失常、心肌内 酶的外漏和冠脉流量减少等8。本实验主要观察dd对离体心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的心率、左心室内压最大变化速率(土dp/dtmax)、lvsp的 变化以及对心肌酶的影响。实验结果表明，dd能通过升高 lvsp,增大左心室内压最大变化速率，能减少心肌ck和ldh 酶的溢出，抑制心肌内酶的释放，从而保护缺血再灌注损伤 的心肌。dd减少心肌ck和ldh酶的溢出，这可能与稳定心肌 细胞膜，增强心肌细胞对缺血及缺氧的耐受能力有关。目前 认

10、为心肌缺血再灌注损伤的机制主要与氧自由基的生成、钙 超载和白细胞激活有关9。本课题组的前期研究表明，dd 具有抗实验性心律失常、局麻、影响心房肌电生理特性、ca2+ 拮抗、耐缺氧、抗过氧化损伤等作用1015。也有人报 道dd具有抗氧化、扩血管等作用1618 。那么，dd是 否能通过抗氧化作用保护缺血再灌注心肌，有待于进一步研 究。【参考文献】1高艳芳.葛根素治疗冠心病心绞痛临床疗效观察 j.实用全科医学，xx，3(5):410.2林乐整，王齐兰.中医综合疗法治疗急性脑梗死疗 效观察j.河北中医，xx，27(6):410.3张芹莲.葛根素注射液在眼科学的临床应用j.长春中医学院学报，1999，1

11、5(3):45.4 叶和杨，邱峰，曾靖，等.大豆苷元的抗心律失常 作用j.中国中药杂志，xx，9(9):853.5 曾靖，李冬莲，邱峰，等.大豆苷元对豚鼠胆囊自 发性收缩运动的影响j.赣南医学院学报，xx，25(1):1.6 曾靖，黄志华，邱峰，等.大豆苷元的抗缺氧作用 j.中国现代应用药学，xx，21(6):145.7 曾靖，邱峰，叶和杨，等.大豆苷元对免疫器官的 影响j.贛南医学院学报，xx，24(2)：9.8 梁日欣，肖永庆，高伟，等.川芎内酯a预处理 对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用j.中药药理 与临床，xx，20(6):1.9 金铭，王建枝.病理生理学m.北京：人民卫生 出版社

12、，xx : 202.10 叶和扬，邱峰，曾靖，等.大豆苷元抗心律失常 作用的研究j.中国中药杂志，xx，23(9 ): 853.11 曾靖，邱峰，叶和扬，等.大豆苷元局部麻醉作 用的研究j.赣南医学院学报，xx，24(6):637.12 叶和杨，陈秋英，邱峰，等.大豆苷元对离体豚 鼠心房肌电生理特性的作用j.中药材，xx，29(4):312.13 曾靖，李良东，邱峰，等.大豆苷元对家兔胸主 动脉条收缩的影响j.中药材，xx，28(11):1024.14 曾靖，黄志华，邱峰，等.大豆苷元耐缺氧的实 验研究j.中国现代应用药学，xx，21(6):454.15 黄玉珊，曾靖，黄玉萍，等.大豆苷元对大

13、鼠心、 脑、肝组织中sod和mda的影响j.华西药学，xx，2 2(2): 138.16 unga ry, osundahunsiof, s himonie. thermalstabilityofgenisteinanddaidzinanditseffectontheirantioxid antactivity j . jagrcfoodchemxx,51(15)： 4394.17 woodmanol,boujaoudem. chr onictreatmentofmaleratswithdaidzeinandl7betaoestradio1 inducesthecontributionofedhftoendothelium-dependentr