高三生物第一轮复习专题2微生物的利用课件新人教版选修1

1、专题2微生物的利用考纲考纲考情考情三年三年1313考高考指数：考高考指数：1.1.微生物的分离和培养微生物的分离和培养2.2.某种微生物数量的测定某种微生物数量的测定3.3.培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作用三年三年考题考题20142014年年(6(6考考) )：新课标全国卷：新课标全国卷T39T39，新课标全国卷，新课标全国卷T39T39，山东，山东T34T34，江苏，江苏T30T30，四川，四川T10T10，浙江自选，浙江自选T17T1720132013年年(5(5考考) )：新课标全国卷：新课标全国卷T39T39，山东，山东T34T34，江苏，江苏T18T18，四川，四川T

2、10T10，重庆，重庆T5T520122012年年(2(2考考) )：北京：北京T5T5，浙江自选，浙江自选T17T17考情考情播报播报1.1.考查内容：主要考查微生物培养中的培养基的制备、微生物的考查内容：主要考查微生物培养中的培养基的制备、微生物的纯化、计数和微生物的选择培养等基本知识。纯化、计数和微生物的选择培养等基本知识。2.2.考查方式：通常结合发酵食品的制作、酶的应用等知识综合考考查方式：通常结合发酵食品的制作、酶的应用等知识综合考查微生物的培养、纯化等知识。个别省份也会单独考查微生物的查微生物的培养、纯化等知识。个别省份也会单独考查微生物的培养与应用的有关知识。培养与应用的有关知

3、识。3.3.考查题型：多数省份以一道非选择题的形式出现，个别省份出考查题型：多数省份以一道非选择题的形式出现，个别省份出现在选择题中，属中低档题。现在选择题中，属中低档题。【知识梳理知识梳理】一、微生物的实验室培养一、微生物的实验室培养1.1.培养基：培养基：(1)(1)概念：人们按照微生物概念：人们按照微生物对对_的不同需求，配制出供其的不同需求，配制出供其生长繁殖的生长繁殖的_。营养物质营养物质营养基质营养基质(2)(2)营养构成：营养构成：培养基组分培养基组分含量含量牛肉膏牛肉膏5.0 g5.0 g蛋白胨蛋白胨10.0 g10.0 gNaClNaCl5.0 g5.0 gH H2 2O O

4、定容至定容至1 000 mL1 000 mL上表为牛肉膏蛋白胨培养基的配方，分析并填写以下空白。上表为牛肉膏蛋白胨培养基的配方，分析并填写以下空白。该培养基中的牛肉膏可以提供的主要营养有该培养基中的牛肉膏可以提供的主要营养有_。该培养基中的蛋白胨可以提供的主要营养有该培养基中的蛋白胨可以提供的主要营养有_。该培养基中该培养基中NaClNaCl提供提供_。若要制备牛肉膏蛋白胨固体平板培养基，还应加入的物质是若要制备牛肉膏蛋白胨固体平板培养基，还应加入的物质是_。碳源、氮源、磷酸盐碳源、氮源、磷酸盐和维生素和维生素氮源和维生素氮源和维生素无机盐无机盐凝固剂凝固剂( (琼脂琼脂) )2.2.无菌技术

5、：无菌技术：(1)(1)目的：获得目的：获得_。(2)(2)关键：防止关键：防止_的入侵。的入侵。(3)(3)无菌技术的主要方法及适用对象无菌技术的主要方法及适用对象( (连一连连一连) )：纯净的培养物纯净的培养物外来杂菌外来杂菌3.3.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算_溶化溶化_。4.4.纯化大肠杆菌：纯化大肠杆菌：(1)(1)上图上图A A可表示用可表示用_接种获得的平板，菌体的分离是通接种获得的平板，菌体的分离是通过过_操作实现的。操作实现的。(2)(2)上图上图B B可表示用可表示用_接种获得的平板，菌体的分散接种获得的平板，菌体的分散是通过一系列的是

6、通过一系列的_操作实现的。操作实现的。称量称量灭菌灭菌倒平板倒平板平板划线法平板划线法连续划线连续划线稀释涂布平板法稀释涂布平板法梯度稀释梯度稀释5.5.菌种的保存方法：菌种的保存方法：(1)(1)对于频繁使用的菌种，可以采用对于频繁使用的菌种，可以采用_的方法。的方法。(2)(2)对于需要长期保存的菌种，可以采用对于需要长期保存的菌种，可以采用_的方法。的方法。临时保藏临时保藏甘油管藏甘油管藏二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.1.筛选菌株：筛选菌株：(1)(1)寻找目的菌株的原则：根据它对寻找目的菌株的原则：根据它对_的要求，到相应的环的要求，到相应

7、的环境中去寻找。境中去寻找。(2)(2)实验室筛选尿素分解菌的方法：使用以实验室筛选尿素分解菌的方法：使用以_为唯一氮源的为唯一氮源的_培养基进行培养。培养基进行培养。(3)(3)选择培养基：在微生物学中，将允许选择培养基：在微生物学中，将允许_的微生物生长，的微生物生长，同时同时_其他种类微生物生长的培养基。其他种类微生物生长的培养基。2.2.微生物的计数：常用的方法有显微计数法和微生物的计数：常用的方法有显微计数法和_。生存环境生存环境尿素尿素选择选择特定种类特定种类抑制或阻止抑制或阻止稀释涂布平板法稀释涂布平板法3.3.实验流程：实验流程：(1)(1)土壤取样：富含有机质的土壤土壤取样：

8、富含有机质的土壤_土。土。(2)(2)样品的稀释：通常选用样品的稀释：通常选用_的样品液进行培养，以保的样品液进行培养，以保证获得菌落数在证获得菌落数在_、适于计数的平板。、适于计数的平板。(3)(3)微生物的培养与观察：根据微生物的培养与观察：根据_的特征区分微生物。的特征区分微生物。(4)(4)细菌的计数：统计细菌的计数：统计_的数目，根据公式的数目，根据公式“每克样品中的菌落每克样品中的菌落数数=_C=_C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V V代表代表涂布平板时所用的稀释液的体积涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)(mL)，M M代表稀释倍

9、数代表稀释倍数 ”进行计算。进行计算。表层表层一定稀释范围一定稀释范围3030300300菌落菌落菌落菌落(C(CV)V)M M4.4.分解尿素的细菌的鉴定：分解尿素的细菌的鉴定：(1)(1)方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_指示剂培养分解指示剂培养分解尿素的细菌。尿素的细菌。(2)(2)原理：原理：酚红酚红脲酶脲酶2NH2NH3 3三、分解纤维素的微生物的分离三、分解纤维素的微生物的分离1.1.纤维素酶：纤维素酶：(1)(1)组成：纤维素酶是一种组成：纤维素酶是一种_，一般认为它至少包括三种，一般认为它至少包括三种组分，即组分，即_。(2)(2)作

10、用：作用：纤维素纤维素 _ _ _复合酶复合酶C C1 1酶、酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶1XCC 酶酶 糖葡萄糖苷酶纤维二糖纤维二糖葡萄糖葡萄糖2.2.纤维素分解菌的筛选：纤维素分解菌的筛选：(2)(2)筛选方法：挑选菌落周围出现筛选方法：挑选菌落周围出现_的菌落。的菌落。(3)(3)培养基：培养基：_的选择培养基。的选择培养基。透明圈透明圈富含纤维素富含纤维素红色复合物红色复合物透明圈透明圈(4)(4)实验流程。实验流程。土壤取样：富含土壤取样：富含_的环境。的环境。选择培养：用选择培养：用_培养，以增加纤维素分解菌的浓度。培养，以增加纤维素分解菌的浓度。_：制备系列稀释液

11、。：制备系列稀释液。涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。挑选产生挑选产生_的菌落。的菌落。纤维素纤维素选择培养基选择培养基梯度稀释梯度稀释透明圈透明圈【速记卡片速记卡片】1.1.培养基：培养基：(1)(1)培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。供其生长繁殖的营养基质。(2)(2)培养基的营养成分：培养基可为微生物提供碳源、氮源、无机盐培养基的营养成分：培养基可为微生物提供碳源、氮源、无机盐和水等主要营养物质。和水等主要营养物质。2.2

12、.无菌技术：无菌技术：(1)(1)措施：无菌技术的主要措施包括消毒和灭菌。措施：无菌技术的主要措施包括消毒和灭菌。(2)(2)常用方法：培养基灭菌常采用高压蒸汽灭菌法，接种环灭菌常采常用方法：培养基灭菌常采用高压蒸汽灭菌法，接种环灭菌常采用灼烧灭菌法。用灼烧灭菌法。3.3.微生物的纯化与计数：微生物的纯化与计数：(1)(1)纯化微生物的方法：常用平板划线法和稀释涂布平板法。纯化微生物的方法：常用平板划线法和稀释涂布平板法。(2)(2)微生物的计数方法：常用显微计数法和稀释涂布平板法。微生物的计数方法：常用显微计数法和稀释涂布平板法。4.4.微生物的筛选：微生物的筛选：(1)(1)尿素分解菌的筛

13、选：以尿素为唯一氮源的选择培养基可以筛选分尿素分解菌的筛选：以尿素为唯一氮源的选择培养基可以筛选分解尿素的细菌。解尿素的细菌。(2)(2)尿素分解菌的鉴别：在以尿素为唯一氮源的选择培养基中添加酚尿素分解菌的鉴别：在以尿素为唯一氮源的选择培养基中添加酚红，指示剂可以鉴别分解尿素的细菌。红，指示剂可以鉴别分解尿素的细菌。(3)(3)纤维素分解菌的筛选：利用富含纤维素的选择培养基可以选择培纤维素分解菌的筛选：利用富含纤维素的选择培养基可以选择培养分解纤维素的微生物。养分解纤维素的微生物。(4)(4)纤维素分解菌的鉴别：在富含纤维素的培养基中添加刚果红，可纤维素分解菌的鉴别：在富含纤维素的培养基中添加

14、刚果红，可以从周围存在不变红的透明圈的菌落中挑选分解纤维素的微生物。以从周围存在不变红的透明圈的菌落中挑选分解纤维素的微生物。考点一考点一微生物的纯化与计数微生物的纯化与计数1.1.纯化大肠杆菌：纯化大肠杆菌：(1)(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。(2)(2)纯化微生物的接种方法：纯化微生物的接种方法：比较比较项目项目平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法关键关键操作操作接种环在固体平板培养基表接种环在固体平板培养基表面连续划线

15、面连续划线一系列的梯度稀释一系列的梯度稀释涂布平板法操作涂布平板法操作注意注意事项事项每次划线先后均需灼烧接种每次划线先后均需灼烧接种环环稀释度要足够高，为确保实验稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度的范围成功可以增加稀释度的范围菌体菌体获取获取在具有显著的菌落特征的区在具有显著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体域菌落中挑取菌体从适宜的稀释度的平板上的菌从适宜的稀释度的平板上的菌落中挑取菌体落中挑取菌体优点优点可以根据菌落的特点获得某可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能既可以获得单细胞菌落，又能对微生物计数对微生物计数缺点缺点不能对微生

16、物计数不能对微生物计数操作复杂，需要涂布多个平板操作复杂，需要涂布多个平板2.2.微生物的计数：微生物的计数：(1)(1)两种计数方法的比较：两种计数方法的比较：比较比较项目项目间接计数法间接计数法( (稀释涂布平板法稀释涂布平板法) )直接计数法直接计数法( (显微计数法显微计数法) )原理原理当样品的稀释度足够高时，培养基表当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌多少活菌利用特定细菌计数板或利用特定细

17、菌计数板或血细胞计数板，在显微血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样镜下计算一定容积的样品中微生物的数量品中微生物的数量比较比较项目项目间接计数法间接计数法( (稀释涂布平板法稀释涂布平板法) )直接计数法直接计数法( (显微计数法显微计数法) )公式公式每克样品中的菌落数：每克样品中的菌落数：(C(CV)V)M MC C：某稀释度下平板上生长的平均菌落：某稀释度下平板上生长的平均菌落数；数；V V：涂布平板时所用的稀释液的体：涂布平板时所用的稀释液的体积积(mL)(mL)；M M：稀释倍数：稀释倍数每毫升原液所含细菌数：每毫升原液所含细菌数：每小格平均细菌数每小格平均细菌数40040010

18、 00010 000稀释稀释倍数倍数缺点缺点当两个或多个菌体连在一起时，平板上当两个或多个菌体连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落观察到的只是一个菌落不能区分细胞死活不能区分细胞死活结果结果比实际值偏小比实际值偏小比实际值偏大比实际值偏大(2)(2)设置对照和重复：设置对照和重复：比较比较项目项目对照对照重复重复目的目的排除非测试因素对实验结果排除非测试因素对实验结果的影响的影响排除偶然因素对实验结排除偶然因素对实验结果的影响果的影响实例实例空白对照：确定培养基制作空白对照：确定培养基制作是否合格是否合格同一稀释度涂布至少同一稀释度涂布至少3 3个个平板平板【高考警示高考警示】“选择菌落数在

19、选择菌落数在3030300300的平板的平板”的两个提醒的两个提醒用稀释涂布平板法计数微生物时，要求选择菌落数在用稀释涂布平板法计数微生物时，要求选择菌落数在3030300300的的平板进行计数。解题时易出现以下误解：平板进行计数。解题时易出现以下误解：(1)(1)只得到只得到1 1个菌落数在个菌落数在3030300300的平板是错误的。错误的原因是不符的平板是错误的。错误的原因是不符合实验的重复原则，易受到偶然因素的影响。合实验的重复原则，易受到偶然因素的影响。(2)(2)得到得到3 3个或个或3 3个以上菌落数在个以上菌落数在3030300300的平板，也不一定正确，这可的平板，也不一定正

20、确，这可能有两种情况：能有两种情况：不同平板间差异较大，如得到不同平板间差异较大，如得到3 3个平板，菌落数分别为个平板，菌落数分别为230230、3434、240240，虽然菌落数均在虽然菌落数均在“3030300300”，这也是不正确的，因为，这也是不正确的，因为“3434”与与“230230”“240240”差异太大，应重新实验找出原因。差异太大，应重新实验找出原因。不同平板之间差异不大，是符合要求的，用其平均值作为估算的最不同平板之间差异不大，是符合要求的，用其平均值作为估算的最终结果。终结果。 可见，并不是只要得到可见，并不是只要得到3 3个个“菌落数在菌落数在3030300300的

21、平板的平板”即可，而即可，而应该是涂布的同一稀释度的平板均符合应该是涂布的同一稀释度的平板均符合“菌落数在菌落数在3030300300的平板的平板”且且无较大差异，说明实验操作合格，才能按照计算公式进行计算。无较大差异，说明实验操作合格，才能按照计算公式进行计算。【考题回访考题回访】1.(20141.(2014新课标全国卷新课标全国卷)为了调查某河流的水质状况，某研究小组为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：列问题：(1)(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量

22、。在涂布接种前，该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将然后，将1 mL1 mL水样稀释水样稀释100100倍，在倍，在3 3个平板上用涂布法分别接入个平板上用涂布法分别接入0.1 mL0.1 mL稀释液；经适当培养后，稀释液；经适当培养后，3 3个平板上的菌落数分别为个平板上的菌落数分别为3939、3838和和3737，据此可得出每升水样中的活菌数为，据此可得出每升水样中的活菌数为。(2)(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种

23、环通过该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是末端开始划线，这样做的目的是。(3)(3)示意图示意图A A和和B B中，中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。得到的结果。(4)(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培

24、养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中中的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。的利用率。【解题指南解题指南】(1)(1)题干关键词：题干关键词：“先行培养先行培养”“”“振荡培养振荡培养”。(2)(2)隐含信息：隐含信息：A A图中菌落是采用平板划线法培养的结果，图中菌落是采用平板划线法培养的结果，B B图中菌落图中菌落分布相对均匀，为稀释涂布平板法接种培养的结果。分布相对均匀，为稀释涂布平板法接种培养的结果。(3)(3)关键知识：稀释涂布平板法检测细菌含量、平板

25、划线法分离细菌。关键知识：稀释涂布平板法检测细菌含量、平板划线法分离细菌。【解析解析】本题考查微生物培养、细菌分离的相关知识。本题考查微生物培养、细菌分离的相关知识。(1)(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：活菌数： =3.8=3.810107 7/L/LCM()V381000.1

26、 mL接种计数结果平均值稀释倍数接种体积(2)(2)接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使一次划线的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。(3)(3)根据示意图根据示意图A A和和B B中生长出的菌落形态，判定中生长出的菌落形态，判定B B图中为稀释涂布平板图中为稀释涂布平板法接种培养的结果法接种培养的结果( (菌落分布相对均匀菌落分布相对均匀) )。(4

27、)(4)振荡培养可以增加液体培养基溶解氧的含量，促进好氧型微生物振荡培养可以增加液体培养基溶解氧的含量，促进好氧型微生物的生长；另外振荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物的生长；另外振荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。质的利用率。答案：答案：(1)(1)检测培养基平板灭菌是否合格检测培养基平板灭菌是否合格3.83.810107 7(2)(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(3)B(4)(4)溶解氧营养物质溶解氧营养物质【易错提醒易错提醒】本题第本题第(1)(1)题第题第2 2空易错答为空易错答为3.83

28、.810104 4。出错原因是忽视。出错原因是忽视了单位，课本计算公式是每克样品中的细菌数，而本题要计算每升水了单位，课本计算公式是每克样品中的细菌数，而本题要计算每升水样中的活菌数，应再乘以样中的活菌数，应再乘以10103 3。2.(20152.(2015玉溪模拟玉溪模拟) )炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病，炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状，对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。细菌培养：采集疑似患者的

29、样本，分离培养，获得可疑菌落。细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。细菌鉴定：实验流程如图所示。细菌鉴定：实验流程如图所示。(1)(1)挑选可疑菌落制片后，用挑选可疑菌落制片后，用观察，可看到呈竹节状排观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。列的杆菌。(2)(2)对配制的液体培养基等需采取对配制的液体培养基等需采取灭菌；实验所用液体灭菌；实验所用液体培养基的碳源为培养基的碳源为( (填填“无机碳无机碳”或或“有机碳有机碳”) )。 (3)(3)接种可疑菌落后，接种可疑菌落后，3535培养培养24 h24 h，液体培养基变浑浊，原因，液体培养基变浑浊，原因是是，对照组试管中应加入，对照组

30、试管中应加入，与实验组同时培养与实验组同时培养6 h6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组( (填填“高高”或或“低低”) )，则可明确疑似患者被炭疽，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。杆菌感染；反之则排除。(4)(4)对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T T细胞、细胞、B B细胞外，还细胞外，还有有和和。【解题指南解题指南】(1)(1)图示关键信息：噬菌体液用生理盐水配制。图示关键信息：噬菌

31、体液用生理盐水配制。(2)(2)题干题干关键信息：由关键信息：由“炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病”可知，炭疽杆可知，炭疽杆菌营寄生生活，为异养型生物。菌营寄生生活，为异养型生物。【解析解析】(1)(1)炭疽杆菌是原核生物，为单细胞生物，观察它的结构应炭疽杆菌是原核生物，为单细胞生物，观察它的结构应借助显微镜。借助显微镜。(2)(2)微生物培养基需采用高压蒸汽灭菌。实验所用培养微生物培养基需采用高压蒸汽灭菌。实验所用培养基的碳源应为有机碳，因为炭疽杆菌为异养型微生物。基的碳源应为有机碳，因为炭疽杆菌为异养型微生物。(3)35(3)35培养培养24 h24 h，细

32、菌大量繁殖会导致液体培养基变浑浊，对照组不能含有细菌，细菌大量繁殖会导致液体培养基变浑浊，对照组不能含有细菌，根据等量原则故应该加入等量的生理盐水，实验组加入噬菌体液后，根据等量原则故应该加入等量的生理盐水，实验组加入噬菌体液后，由于噬菌体能够使炭疽杆菌死亡，故实验组液体培养基的浑浊度比对由于噬菌体能够使炭疽杆菌死亡，故实验组液体培养基的浑浊度比对照组低。照组低。(4)(4)抗体是由体液免疫过程产生，参与体液免疫的细胞有抗体是由体液免疫过程产生，参与体液免疫的细胞有T T细细胞、胞、B B细胞、吞噬细胞、浆细胞等。细胞、吞噬细胞、浆细胞等。答案：答案：(1)(1)显微镜显微镜(2)(2)高压蒸

33、汽有机碳高压蒸汽有机碳(3)(3)细菌大量繁殖等量生理盐水低细菌大量繁殖等量生理盐水低(4)(4)吞噬细胞浆细胞吞噬细胞浆细胞3.(20153.(2015定西模拟定西模拟) )急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然检验大肠杆菌的含量时，通常将水样

34、进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为行培养，记录菌落数量，这种方法称为。在下。在下图所示的四种菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是图所示的四种菌落分布图中，不可能是用该方法得到的是。(2)(2)图中用该方法得到的菌落分布图中，最符合计数要求的是图中的图中用该方法得到的菌落分布图中，最符合计数要求的是图中的 。(3)(3)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？ 。为什么？为什么？。(4)(4)分别取分别取

35、0.1 mL0.1 mL、已稀释、已稀释10103 3倍的水样分别涂布到倍的水样分别涂布到3 3个琼脂固体培养个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落平均数为基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落平均数为5050。则每。则每升原水样中大肠杆菌数为升原水样中大肠杆菌数为。【解析解析】(1)(1)据图可知，据图可知，D D图所示的菌落分布为平板划线法接种获得的。图所示的菌落分布为平板划线法接种获得的。(2)(2)利用稀释涂布平板法进行微生物计数时，需要得到利用稀释涂布平板法进行微生物计数时，需要得到3030300300个菌落个菌落的平板进行计数。的平板进行计数。(3)(3)

36、为了增强实验的说服力，通常要设置对照实验，本实验可设置空为了增强实验的说服力，通常要设置对照实验，本实验可设置空白对照排除培养基污染产生的影响。白对照排除培养基污染产生的影响。(4)(4)根据公式计算每升原水样中大肠杆菌数为根据公式计算每升原水样中大肠杆菌数为505010103 30.10.11 0001 000=5.0=5.010108 8。答案：答案：(1)(1)稀释涂布平板法稀释涂布平板法D D(2)C(2)C(3)(3)需要培养基制备不合格会导致菌落数增加需要培养基制备不合格会导致菌落数增加(4)5.0(4)5.010108 8【易错提醒易错提醒】(1)(1)不理解平板划线法和稀释涂布

37、平板法接种的结果而不理解平板划线法和稀释涂布平板法接种的结果而不能对图中结果作出正确的判断。不能对图中结果作出正确的判断。(2)(2)套用计算公式时要注意单位，容易将升与毫升混淆而出错。套用计算公式时要注意单位，容易将升与毫升混淆而出错。【加固训练加固训练】1.1.下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验，完成下列下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验，完成下列问题：问题：实验原理：实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，土壤制成的稀泥浆，接种到无

38、氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离。他细菌分离。材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有盛有9 mL9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有有90 mL90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。无菌水的锥形瓶、恒温箱。(1)(1)方法步骤：方法步骤：倒平板：分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在倒平板：分别将无氮培养

39、基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在旁操作。旁操作。制备土壤稀释液：取土样制备土壤稀释液：取土样10 g10 g加入盛有加入盛有90 mL90 mL无菌水的锥形瓶中，无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL1 mL，转至盛有，转至盛有9 mL9 mL的无菌水的试的无菌水的试管中，依次稀释到管中，依次稀释到10107 7稀释度。稀释度。涂布：按照由涂布：按照由10107 710103 3稀释度的顺序分别吸取稀释度的顺序分别吸取0.1 mL0.1 mL进行平板涂布，进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布个平板，

40、牛肉膏蛋白个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布胨培养基涂布个。个。培养：放入恒温箱内，在培养：放入恒温箱内，在28 28 3030下培养下培养3 34 d4 d。细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在的的平板进行计数。如果测定的平均值为平板进行计数。如果测定的平均值为5050，则每克样品中的菌株数，则每克样品中的菌株数是是。( (稀释度是稀释度是10105 5) )(2)(2)预期结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数预期结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数( (选填选填“多于多于”或或“少于少于”) )无氮培养基上的数目。原因是无

41、氮培养基上的数目。原因是_。【解题指南解题指南】(1)(1)题干关键词：题干关键词：“分离自生固氮菌分离自生固氮菌”“”“计数计数”。(2)(2)隐含信息：无氮培养基为选择培养基；牛肉膏蛋白胨培养基无选隐含信息：无氮培养基为选择培养基；牛肉膏蛋白胨培养基无选择功能。择功能。(3)(3)必备知识：为增强实验说服力，要设置重复和对照。必备知识：为增强实验说服力，要设置重复和对照。稀释涂布平板法计数微生物的计算公式。稀释涂布平板法计数微生物的计算公式。【解析解析】(1)(1)在酒精灯火焰旁倒平板，可以减少杂菌的污染。为了在酒精灯火焰旁倒平板，可以减少杂菌的污染。为了保证结果准确，一般设置保证结果准确

42、，一般设置3 35 5个平板，选择菌落数在个平板，选择菌落数在3030300300的平的平板进行计数，并取平均值，则每克样品中的菌株数为板进行计数，并取平均值，则每克样品中的菌株数为(50(500.1)0.1)10105 5=5.0=5.010107 7。(2)(2)牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，以消除无关变量牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，以消除无关变量对实验结果的影响，该培养基适合土壤中几乎所有细菌生存，所以，对实验结果的影响，该培养基适合土壤中几乎所有细菌生存，所以，它比无氮培养基上的菌落数目多。它比无氮培养基上的菌落数目多。答案：答案：(1)(1)酒精灯火焰酒精灯火焰3 31 1303030

43、03005.05.010107 7(2)(2)多于无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生长繁殖，而牛多于无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生长繁殖，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存【延伸探究延伸探究】用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比如何？并说明原因。实际值相比如何？并说明原因。提示：提示：比实际值低。培养基上的一个菌落也可能是相连的两个或多个比实际值低。培养基上的一个菌落也可能是相连的两个或多个细菌繁殖形成的，而统计结果一般用菌落数来表示，因此统计的菌落细菌繁

44、殖形成的，而统计结果一般用菌落数来表示，因此统计的菌落数要少于样品中活菌的实际值。数要少于样品中活菌的实际值。2.(20142.(2014西城模拟西城模拟) )赤霉病是由雪腐镰刀菌等真菌感染引起的，广泛赤霉病是由雪腐镰刀菌等真菌感染引起的，广泛发生在小麦等粮食作物上。雪腐镰刀菌代谢产生的脱氧雪腐镰刀菌烯发生在小麦等粮食作物上。雪腐镰刀菌代谢产生的脱氧雪腐镰刀菌烯醇醇(DON(DON，分子式为，分子式为C C1515H H2020O O6 6) )严重影响禽畜生产和人体健康。请分析回严重影响禽畜生产和人体健康。请分析回答下列问题：答下列问题：(1)(1)下列微生物与雪腐镰刀菌的细胞结构类似的是下

45、列微生物与雪腐镰刀菌的细胞结构类似的是( (选填选项选填选项前的符号前的符号) )。A.A.酵母菌酵母菌B.B.醋酸菌醋酸菌C.C.毛霉毛霉D.D.乳酸菌乳酸菌E.E.大肠杆菌大肠杆菌(2)(2)某同学为筛选专一降解某同学为筛选专一降解DONDON的菌，配制了下列培养基，在适宜条件的菌，配制了下列培养基，在适宜条件下培养：下培养：实验实验步骤步骤取样取样培养基培养基培养培养结果结果土壤样品土壤样品葡萄糖，葡萄糖，(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4，K K2 2HPOHPO4 43H3H2 2O O，KHKH2 2POPO4 4，NaClNaCl，CaClCaCl2 2，MgSOMgS

46、O4 47H7H2 2O O，加水定容，加水定容培养液培养液a a1mL1mL培养液培养液a a同上同上菌落菌落挑取单菌落挑取单菌落真菌培养基真菌培养基培养液培养液b b为实现筛选目的，步骤为实现筛选目的，步骤所使用的培养基配方中，应去除所使用的培养基配方中，应去除并加入并加入。该培养的目的是。该培养的目的是。为实现目的菌的分离和计数，步骤为实现目的菌的分离和计数，步骤所使用的培养基中还应所使用的培养基中还应加入加入制成平板，采用的接种方法是制成平板，采用的接种方法是。步骤步骤的目的是的目的是。【解题指南解题指南】(1)(1)题干关键信息：雪腐镰刀菌为真菌；题干关键信息：雪腐镰刀菌为真菌；DO

47、NDON只含有只含有C C、H H、O O三种元素。三种元素。(2)(2)必备知识：必备知识：筛选专一降解筛选专一降解DONDON的菌，培养基应以的菌，培养基应以DONDON为唯一碳源。为唯一碳源。目的菌的分离和计数应用固体平板培养基。目的菌的分离和计数应用固体平板培养基。【解析解析】(1)(1)雪腐镰刀菌是真菌，选项中酵母菌和毛霉均为真菌，其雪腐镰刀菌是真菌，选项中酵母菌和毛霉均为真菌，其细胞为真核细胞。而醋酸菌、乳酸菌和大肠杆菌均为细菌，其细胞为细胞为真核细胞。而醋酸菌、乳酸菌和大肠杆菌均为细菌，其细胞为原核细胞。原核细胞。(2)(2)为筛选专一降解为筛选专一降解DONDON的菌，因的菌，

48、因DONDON只含有只含有C C、H H、O O三种元素，可以三种元素，可以作为微生物的碳源，因此利用以作为微生物的碳源，因此利用以DONDON为唯一碳源的选择培养基进行选为唯一碳源的选择培养基进行选择培养，故培养基中应去掉葡萄糖并添加择培养，故培养基中应去掉葡萄糖并添加DONDON。步骤。步骤用液体培养基，用液体培养基，主要目的是增加专一降解主要目的是增加专一降解DONDON的微生物的浓度。的微生物的浓度。步骤步骤培养的结果为菌落，因此要在固体培养基上进行培养，因此培养的结果为菌落，因此要在固体培养基上进行培养，因此培养基中应加入凝固剂培养基中应加入凝固剂琼脂，利用菌落进行微生物的计数时，要

49、琼脂，利用菌落进行微生物的计数时，要用稀释涂布平板法进行接种，根据平板上的菌落数计算微生物的数目。用稀释涂布平板法进行接种，根据平板上的菌落数计算微生物的数目。步骤步骤用液体培养基，接种的是纯化的专一降解用液体培养基，接种的是纯化的专一降解DONDON的真菌，目的的真菌，目的是快速增加目的菌的种群数量是快速增加目的菌的种群数量( (扩大培养扩大培养) )。答案：答案：(1)A(1)A、C C(2)(2)葡萄糖葡萄糖DONDON增加专一降解增加专一降解DONDON的微生物的浓度的微生物的浓度琼脂稀释涂布平板法琼脂稀释涂布平板法快速增加目的菌的种群数量快速增加目的菌的种群数量( (扩大培养扩大培养

50、) )考点二考点二微生物的筛选与鉴别微生物的筛选与鉴别1.1.筛选微生物的两个实例比较：筛选微生物的两个实例比较：比较比较项目项目土壤中分解尿素土壤中分解尿素的细菌的分离的细菌的分离分解纤维素的分解纤维素的微生物的分离微生物的分离方法方法利用以尿素为唯一氮源的选利用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行选择培养择培养基进行选择培养利用富含纤维素的选择培养基利用富含纤维素的选择培养基进行选择培养进行选择培养原理原理只有分解尿素的细菌能够合只有分解尿素的细菌能够合成脲酶，才能在以尿素为唯成脲酶，才能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长一氮源的培养基上生长因为培养基中含有丰富的纤维因为培养基中含有丰富的纤维素

51、，因此能够分解纤维素的微素，因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大生物具有更多的生存机会而大量繁殖量繁殖鉴定鉴定在培养基中加入酚红指示剂，在培养基中加入酚红指示剂，指示剂变红说明菌落中的菌指示剂变红说明菌落中的菌体为分解尿素的细菌体为分解尿素的细菌刚果红染色法，菌落周围出现刚果红染色法，菌落周围出现不变红的透明圈的菌落为分解不变红的透明圈的菌落为分解纤维素的微生物的菌落纤维素的微生物的菌落2.2.微生物的鉴别方法：微生物的鉴别方法：(1)(1)菌落特征鉴别法：根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落菌落特征鉴别法：根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等

52、特征进行鉴别。的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别。(2)(2)指示剂鉴别法：如培养基中加入酚红指示剂，培养某种微生物后，指示剂鉴别法：如培养基中加入酚红指示剂，培养某种微生物后，培养基变红说明该种微生物能够分解尿素。培养基变红说明该种微生物能够分解尿素。(3)(3)染色鉴别法：如利用刚果红染色法，根据培养基中出现以纤维素染色鉴别法：如利用刚果红染色法，根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物。分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物。【提分技法提分技法】筛选微生物的三种方法筛选微生物的三种方法(1)(1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到

53、固体平单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。得目的微生物。(2)(2)选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。目的微生物。(3)(3)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微生物。然后筛选目的微生物。【考题回访考题回访】1.(20141.(2014新课标全国卷新课标全国卷)

54、植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：解。回答下列问题：(1)(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3 3种组分组种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成分解成。(2)(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)(CR)时，时，CRCR可与纤维素形成可与纤维素形成色复合物。用含有色复合物。用含有CRCR的该种培养基培养纤维素分解菌时，的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的培养基上会出现以该

55、菌的菌落为中心的。(3)(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基学设计了甲、乙两种培养基( (成分见下表成分见下表) )：酵母膏酵母膏无机盐无机盐淀粉淀粉纤维纤维素粉素粉琼脂琼脂CRCR溶液溶液水水培养培养基甲基甲+ + + + +- -+ + +培养培养基乙基乙+ + + +- -+ + + +注：注：“+”+”表示有，表示有，“-”-”表示无。表示无。据表判断，培养基甲据表判断，培养基甲( (填填“能能”或或“不能不能”) )用于分离和鉴别用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是纤维素分解菌，原

56、因是；培养基乙；培养基乙( (填填“能能”或或“不能不能”) )用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是是_。【解题指南解题指南】(1)(1)题干关键词：题干关键词：“纤维素酶纤维素酶”“”“刚果红刚果红”。(2)(2)隐含信息：两种培养基中有琼脂的为固体培养基，无琼脂的为液隐含信息：两种培养基中有琼脂的为固体培养基，无琼脂的为液体培养基；淀粉是微生物的碳源，不含纤维素粉不能作为分离和鉴别体培养基；淀粉是微生物的碳源，不含纤维素粉不能作为分离和鉴别纤维素分解菌实验的选择培养基。纤维素分解菌实验的选择培养基。(3)(3)关键知识：土壤中某些微生物的分解作用和筛选纤维素分

57、解菌的关键知识：土壤中某些微生物的分解作用和筛选纤维素分解菌的方法。方法。【解析解析】本题主要考查纤维素酶的作用、刚果红染色法、分离和鉴别本题主要考查纤维素酶的作用、刚果红染色法、分离和鉴别纤维素分解菌的方法。纤维素分解菌的方法。(1)(1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被纤维素酶分解为葡萄糖，如图：丰富的多糖类物质。纤维素能被纤维素酶分解为葡萄糖，如图： (2)(2)刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合

58、物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可以通红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(3)(3)分离和鉴别纤维素分解菌的培养基为固体培养基，且需要以纤维分离和鉴别纤维素分解菌的培养基为固体培养基，且需要以纤维素为唯一碳源。素为唯一碳源。答案：答案：(1)(1)纤维二糖葡萄糖纤维二糖葡萄糖(2)(2)红透明圈红透明圈(3)(3)不能液体培养基不能分离单菌落不能培养基乙中没有纤维不能液体培养基不能分离单菌落不能培养基乙中没有纤维素，不会形成素，不会形成CR-CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不

59、能确定其纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌为纤维素分解菌2.(20152.(2015临沂模拟临沂模拟) )莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌( (目的目的菌菌) )。请据图回答：。请据图回答：( (已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明体培养基不透明) )(1)(1)由图推断，从由图推断，从A A瓶到瓶到C C瓶液体培养的过程称为瓶液体培养的过程称为，目的

60、是目的是。(2)(2)在将在将C C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行，将，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和法，从图法，从图中看本实验采用的是中看本实验采用的是( (填填“前者前者”或或“后者后者”) )。(3)(3)一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落，我们筛一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落，我们筛选的目的菌是菌落中选的目的菌是菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来自来自。(4)(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自为弄清固体培养基中的非