中药化学强心苷

1、 第第8章章 强心苷强心苷 （Cardica glycosides）学习目的学习目的：1 掌握 强心苷的结构类型和结构特征2 掌握 强心苷的理化性质3 掌握 强心苷的检识4 掌握 强心苷一般提取、分离方法5 熟悉 强心苷的结构测定6 了解 强心苷的含义、分类和生理活性第一节第一节 概述概述强心苷(cardiac glycosides)是指生物界中一类对心脏有显著生理活性的甾体苷类,用于治疗充血性心力衰竭和节律障碍等心脏疾病。 甾体+糖（1 1）加强心肌收缩力，减慢窦性心率。）加强心肌收缩力，减慢窦性心率。 临床上主要用于治疗心力衰竭临床上主要用于治疗心力衰竭 （Cardiac Failure）

2、 强心作用强心作用（2 2）兴奋延髓催吐化学感受区）兴奋延髓催吐化学感受区 可引起恶心、呕吐等胃肠反应可引起恶心、呕吐等胃肠反应. .（3 3）抗肿瘤活性）抗肿瘤活性 细胞毒活性细胞毒活性 紫花洋地黄a毛花洋地黄黄花夹竹桃黄花夹竹桃临床上常用的强心苷临床上常用的强心苷Cedilanid 西地兰西地兰去乙酰毛花苷注射液去乙酰毛花苷注射液甾体苷元甾体苷元D-洋地黄毒糖洋地黄毒糖Digoxine（地高辛地高辛 口服口服）D-洋地黄毒糖洋地黄毒糖甾体苷元甾体苷元非苷类强心药非苷类强心药 受体激动药受体激动药：多巴酚丁胺及多巴胺属此类：多巴酚丁胺及多巴胺属此类非苷类强心药非苷类强心药 磷酸二酯酶抑制药磷

3、酸二酯酶抑制药：如氨利酮及米利酮等：如氨利酮及米利酮等 。非苷类强心药非苷类强心药 高血糖素高血糖素：用于治疗洋地黄无效的急性心力衰：用于治疗洋地黄无效的急性心力衰竭，顽固性心源性休克。竭，顽固性心源性休克。 胰岛素 胰高血糖素 u西地兰西地兰、地高辛地高辛作用机制：作用机制： 被普遍认为是通过其抑制心肌细胞膜上被普遍认为是通过其抑制心肌细胞膜上Na+-K+-ATPNa+-K+-ATP酶，使心肌细胞内过多的酶，使心肌细胞内过多的Na+Na+不不能泵出到细胞外，然后通过能泵出到细胞外，然后通过NaNaCaCa2 2交换交换机制使心肌细胞中机制使心肌细胞中CaCa2 2浓度增加，于是心浓度增加，于

4、是心肌细胞的兴奋一收缩耦联作用增强，心肌肌细胞的兴奋一收缩耦联作用增强，心肌收缩力增强。收缩力增强。The discoverer of the heart drug DigitalisAn Account of the Foxglove and its Medical uses William Withering ，1785 小剂量的毒物是最好的药物小剂量的毒物是最好的药物,而再好的药过量就是毒物而再好的药过量就是毒物 。第二节第二节 结构与分类结构与分类 结构特征强心苷是由强心苷元与糖缩合而成的一类苷。强心苷元C3-O-六碳糖强心苷甾体母核C17-不饱和内酯 7123456910111213

5、141516171819ABCD8一.苷元部分（1） 甾体母核甾体母核 特点:甾核的四个环甾核的四个环稠合方式 A/B B/C C/D 分类 顺(多) 反 顺 强心甾 反(少) 异强心甾 A/B B/C C/D 分类 顺(多) 反 顺 强心甾 反(少) 异强心甾 A/B B/C C/D 分类 顺(多) 反 顺 强心甾 反(少) 异强心甾C17位上连接的不饱和内酯环 特点 分类A C17-五元不五元不饱和内酯环饱和内酯环甲型强心苷元（强心甾烯类）BC17-六元不饱和内酯环， 较少乙型强心苷元（蟾蜍甾二烯类、海葱甾二烯类）202122232420222123基本结构中含23个碳基本结构中含24个碳

6、（2）根据C17-内脂环结构不同分为两类7123456910111213141516171819ABCD8（3） C10、C13、 C17的的取代基均为取代基均为-型型 C C1313：甲基取代；：甲基取代； C C1010：甲基、甲醇基、醛基、：甲基、甲醇基、醛基、羧基取代；羧基取代； C C1717：不饱和内酯环取代。：不饱和内酯环取代。（4）C14-羟基是强心活性的必备结构。羟基是强心活性的必备结构。（5）C3-OH多为多为构型，与连接糖成苷，少数为构型，与连接糖成苷，少数为构型。如为构型。如为构型，则命名前加构型，则命名前加“表表” 。 （6）其它位置均可见羟基、羰基等取代，少数有）其

7、它位置均可见羟基、羰基等取代，少数有双键。双键。 二. 糖部分（20余种）：根据C2位上有无羟基取代分类：（一）-羟基糖或2-羟基糖 123456 6-去氧糖 6-去氧糖甲醚二. 糖部分：根据C2位上有无羟基取代分类：（二）-去氧糖或2-去氧糖 2,6-二去氧糖2,6-二去氧糖甲醚二. 糖部分：根据糖的个数分类： 单糖、低聚糖、多聚糖根据糖苷键是否水解分类： 原生苷、次生苷三.糖和苷元的连接方式 糖与苷元的C3-OH缩合成苷。 型：苷元-(2,6-二去氧糖)x-(D-葡萄糖)y 型：苷元-(6-去氧糖)x-(D-葡萄糖)y 型：苷元-(D-葡萄糖)y x=13, y=12 植物界中以、型较多I

8、型强心苷：OOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOOOHCH3OOOHCH3洋地黄毒苷元D-葡萄糖(D-洋地黄毒糖)3洋地黄毒苷紫花洋地黄苷A苷元苷元-(2,6-(2,6-二去氧糖二去氧糖)x-(D-)x-(D-葡萄糖葡萄糖)y)yOOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOHOCH3羟基洋地黄毒苷元D-葡萄糖D-洋地黄糖美丽毒毛旋花子苷真地吉他林型：苷元-(6-去氧糖)x-(D-葡萄糖)yOHOOOHCOOOHCH2OHHOOH绿海葱苷绿海葱苷元-D-葡萄糖型：苷元-(D-葡萄糖)y第三节第三节 结构与强心作用的关系结构与强心作用的关系1.甾体母核uA/BA/B顺式稠合的甲型

9、强顺式稠合的甲型强心苷元中，心苷元中，C C3 3位位-OH-OH必须必须是是- -构型，构型， - -构型活构型活性降低或消失。性降低或消失。uC/DC/D环须是顺式稠合，环须是顺式稠合，C C1414-OH-OH须是须是- -构型，否构型，否则无活性。则无活性。主要取决于苷元部分，但糖部分对其生理活性也有影响。2.2.不饱和内酯环不饱和内酯环uC C1717位连接的位连接的型不饱和型不饱和内酯环是强心作用的主内酯环是强心作用的主要基团。要基团。 u 如果不饱和内酯环异构如果不饱和内酯环异构化为化为- -型或开环或不饱型或开环或不饱和内酯环被氢化或双键和内酯环被氢化或双键位移，则无活性或活性

10、位移，则无活性或活性显著降低。显著降低。u甲型强心苷元乙型强甲型强心苷元乙型强心苷元。心苷元。 a3.3.取代基取代基uC C1414-羟基是强心活性的必羟基是强心活性的必备结构。备结构。u如如C C1010-CH-CH3 3，氧化成，氧化成-CH-CH2 2OHOH、-CHO-CHO、-COOH-COOH，影响活性。，影响活性。u母核上引入羟基、双键，对母核上引入羟基、双键，对活性都有影响。活性都有影响。u苷元或糖基上增加乙酰基均苷元或糖基上增加乙酰基均可增强活性。可增强活性。a4.4.糖部分糖部分 构成强心苷的糖的数目和种类的不构成强心苷的糖的数目和种类的不同，对强心苷活性影响不同。同，对

11、强心苷活性影响不同。一般情况一般情况下，糖的连接越多，毒性越小，疗效越下，糖的连接越多，毒性越小，疗效越高。高。毒性比较：毒性比较：u甲型：苷元单糖苷二糖苷三甲型：苷元单糖苷二糖苷三糖苷糖苷u甲型强心苷的单糖苷：甲型强心苷的单糖苷： 葡萄糖苷甲氧基糖苷葡萄糖苷甲氧基糖苷6-6-去氧去氧糖苷糖苷2,6-2,6-二去氧糖苷二去氧糖苷u乙型：苷元单糖苷二糖苷乙型：苷元单糖苷二糖苷第四节 理化性质和颜色反应1.1.物理性质：性状物理性质：性状 溶解度溶解度2.2.化学性质：脱水反应化学性质：脱水反应 酸水解酸水解 水解反应水解反应 酶水解酶水解 碱水解碱水解 乙酰解乙酰解 3.3.颜色反应：作用于甾体

12、母核的反应颜色反应：作用于甾体母核的反应 作用于作用于,不饱和内酯环的反应不饱和内酯环的反应 作用于作用于-去氧糖的反应去氧糖的反应1 物理性质（1）性状 无色晶体或无定形粉末 有旋光性 对粘膜有刺激性 C-17b苦味 C-17a无苦味（2）溶解度可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等极性溶剂可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等极性溶剂难溶于乙醚、苯、石油醚等非极性溶剂。难溶于乙醚、苯、石油醚等非极性溶剂。（2）溶解度强心苷的溶解性随分子中糖基的数目、糖强心苷的溶解性随分子中糖基的数目、糖的种类、所含羟基多少和位置的不同而异。的种类、所含羟基多少和位置的不同而异。 糖基数目：糖基数目：原生苷次生苷苷元原生苷次生

13、苷苷元 种类：种类：羟基糖去氧糖羟基糖去氧糖 -OH-OH的数目：的数目：多多-OH-OH少少-OH-OH 位置：位置：不能形成分子内氢键能形不能形成分子内氢键能形成氢键（羟基数目相同时）成氢键（羟基数目相同时）OOOHOHOOOHCH3OHHO乌本苷HOHOHOOOOHOOOHCH3OOOHCH3OOOHCH3洋地黄毒苷HOOOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOOOHCH3OOOCOCH3CH3RR毛花洋地黄苷乙:R=OH, R=H毛花洋地黄苷丙:R=H, R=OH141612HOOOOHOHOH3 35 514141616强心苷强心苷HOOO强心苷元强心苷元脱水强心苷元脱水强心

14、苷元2 化学性质化学性质叔醇羟基最易发生叔醇羟基最易发生脱水脱水(O)C=C-C-C-OH,(O)C=C-C-C-OH,双双键易使该键易使该-OH-OH活化活化而脱水。而脱水。（1 1）脱水反应）脱水反应（混合强酸，加热）（混合强酸，加热）（2）水解反应化学方法生物方法酸水解碱水解乙酰解酶水解n酸水解温和的酸水解法强烈的酸水解法氯化氢丙酮法温和的酸水解u条件：条件：用浓度为0.020.05mol/L的盐酸或硫酸，在含水醇中，短时间加热回流。u水解机制： 反应速度：反应速度：C C2 2-OH-OH会阻碍质子化会阻碍质子化u水解能力：水解能力：型型、型型 （- -去氧糖苷去氧糖苷 - -羟基糖苷

15、）羟基糖苷）H3O+H+ROHH2O质子化苷糖u特点：特点：仅断裂仅断裂 -去氧糖与苷元之间的糖苷键；去氧糖与苷元之间的糖苷键； -去氧糖与去氧糖与-去氧糖之间的糖苷键；去氧糖之间的糖苷键；不断裂不断裂 - -去氧糖和去氧糖和- -羟基糖之间的糖苷键；羟基糖之间的糖苷键；型强心苷可水解成苷元、型强心苷可水解成苷元、- -去氧糖、低聚糖。去氧糖、低聚糖。 型、型、型不水解。型不水解。C C1616- -甲酰基的强心苷，甲酰基也易水解。甲酰基的强心苷，甲酰基也易水解。aOOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOOOHCH3OOOCOCH3CH3毛花洋地黄苷丙HO完整苷元单糖或低聚糖温和酸水

16、解强烈的酸水解u 条件：3%5%无机酸，长时间加热或加压 u 特点：可水解-羟基糖苷（型、型用此法）。苷元与糖、糖与糖之间的苷键都切断，得到单糖和脱水苷元使糖完全水解，可得到定量的葡萄糖苷元易脱水，不能得到原型苷元三毛地黄毒糖羟基毛地黄毒苷三毛地黄毒糖羟基毛地黄毒苷OOOOHHOH(D-digitoxose)3OOH3-5%HCl3-5%HCl三脱水羟基毛地黄毒苷元三脱水羟基毛地黄毒苷元aOOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOOOHCH3OOOCOCH3CH3毛花洋地黄苷丙HO脱水苷元单糖强烈的酸水解氯化氢丙酮法：u条件：苷溶于1% HCl的丙酮中，室温2周u机制：缩酮形成反应，例

17、如： H+缩酮u特点： 因缩酮结构，保护苷元免受脱水，可得到原型苷元。 适用于多数型苷。 多用于单糖苷；多糖苷难溶于丙酮，用其它溶剂代替丙酮。OOOO HOC H3CC H3C H3O HO HOOOO HO HOC H3O = C HOOO HO = C H1%HCl1%HCl( (丙酮丙酮, ,室温室温/ /2 weeks)2 weeks)铃兰毒苷丙酮化物丙酮化物丙酮化物OHOOOHOHO=CHOCH3CCH3CH3OO+HCl毒毛旋花子苷元毒毛旋花子苷元氯代氯代-L-L-鼠李糖丙酮化合物鼠李糖丙酮化合物水解水解n碱水解内酯环水解酰基水解20（22）转位酰基水解机制：碱处理使酯键水解脱去酰

18、基机制：碱处理使酯键水解脱去酰基 e.g.e.g.水解酰基化糖、酰基化苷水解酰基化糖、酰基化苷规律：规律：碳酸氢钠（钾碳酸氢钠（钾）：）：- -去氧糖酰基水解去氧糖酰基水解。氢氧化钙（钡氢氧化钙（钡）：）：水解糖和苷元上的酰基水解糖和苷元上的酰基。水解速度：水解速度： - -去氧糖上的酰基最易脱去去氧糖上的酰基最易脱去; ; 甲酰基甲酰基 乙酰基乙酰基上述四种碱只水解酰基，不影响内酯环。上述四种碱只水解酰基，不影响内酯环。 但但NaOHNaOH、KOHKOH由于碱性太强，不仅使所有酰基水解，而且由于碱性太强，不仅使所有酰基水解，而且还会使内酯环开裂。还会使内酯环开裂。内酯环的水解： KOH或N

19、aOH水溶液可使强心苷内酯环开裂，酸化后又闭环。 KOH或NaOH醇溶液可使强心苷内酯环开裂，酸化后不闭环（属于不可逆过程！）OOOHOHCH2CHCCOOOHCHCH2CCOOHCCHH2CCOOOHCCHH2CCOOHOHOKOHCH3OHOHCCHHCHCOKOHCH3OHOOOHOHOOCH3H2OCOOCH31720212223202122232021222314202122231420212223强心甾烯H转移内酯型异构化苷开链型异构化苷1417202122231420212223海葱甾烯甲酯异构化苷2414202122232424141414注意： 醇性KOH或NaOH溶液中，甲

20、型强心苷由于20（22）双键转移，而形成活性亚甲基（C22）；乙型不转移，但发生异构化。利用活性亚甲基的显色反应，可以区别甲型和乙型强心苷。20（22）移位u条件： KOH/NaOH的醇溶液中，甲型强心苷（或苷元）中的20（22） 20（21） ，产生C22活性亚甲基n水解反应-乙酰解条件：苷溶于醋酐与冰醋酸的混合液，加入35量的浓硫酸，室温放置1-10天特点： 为确定糖与糖之间的连接位置，乙酰解可开裂一部分苷键，保留另一部分苷键，然后用色谱法鉴定水解得到的乙酰化单糖和乙酰化低聚糖。 水解部位：苷键 水解易难：1,6键1,4和1,3键1,2键OOOHOOOHCH3OCH3ROHOOHOHHOC

21、H2OHOOOHCH2OHOHOOHOHHOCH2OHOOOHCH2OHHO吉托司廷 R=新吉托司廷 R=酶水解速度： 糖基上有乙酰基的强心苷糖基上无乙酰基的强心苷 甲型强心苷乙型强心苷外来酶共存酶强心苷植物中有水解glc的酶，无水解-去氧糖的酶，所以水解除去分子中的葡萄糖而保留-去氧糖如：蜗牛酶几乎能水解所有的苷键n生物方法-酶水解OOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOOOHCH3OOOCOCH3CH3毛花洋地黄苷丙氢氧化钙HOOOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOOOHCH3OOOHCH3HO苦杏仁苷酶OOOHOOOHOHHOCH2OHOOHCH3OOOHCH3OO

22、OHCH3HO氢氧化钙HOH,OH温和的酸水解强烈的酸水解碳酸氢钠溶液氢氧化钠的水溶液氢氧化钠的醇溶液 温和的酸水解强烈的酸水解碳酸氢钠溶液氢氧化钠的水溶液氢氧化钠的醇溶液（1 1）作用于甾体母核的反应）作用于甾体母核的反应u机制：机制： 在一定条件下，甾体化合物经脱水在一定条件下，甾体化合物经脱水形成双键、双键移位、分子间缩合形形成双键、双键移位、分子间缩合形成共轭双键系统，并在浓酸溶液中形成共轭双键系统，并在浓酸溶液中形成多烯阳碳离子的盐而呈现一系列的成多烯阳碳离子的盐而呈现一系列的颜色变化。颜色变化。3 3 颜色反应颜色反应u乙酐浓硫酸反应乙酐浓硫酸反应(Liebermann-Burch

23、ard(Liebermann-Burchard反应反应) )：操作：操作： 样品溶于冰醋酸，加浓硫酸样品溶于冰醋酸，加浓硫酸- -乙酐乙酐(1:20)(1:20)，反应，反应液呈黄液呈黄 红红 蓝蓝 紫紫 绿等变化，最后褪绿等变化，最后褪色。色。特点：特点： 呈色变化过程随分子中双键的数目与位置不同呈色变化过程随分子中双键的数目与位置不同而有所差异。而有所差异。u三氯乙酸三氯乙酸- -氯胺氯胺T T反应反应( (chloramine T反反应应) )操作：操作： 样品醇溶液点在滤纸样品醇溶液点在滤纸( (或薄层板上或薄层板上) )，喷以三氯，喷以三氯乙酸乙酸- -氯胺氯胺T T试剂，纸片干后，

24、试剂，纸片干后，100100加热数分钟，紫加热数分钟，紫外光下观察。外光下观察。特点：特点： 可利用这一试剂区别洋地黄强心苷的各类苷元。可利用这一试剂区别洋地黄强心苷的各类苷元。OOOHHOOOOHHOOHOOOHHOHO洋 地 黄 毒 苷 元羟 基 洋 地 黄 毒 苷 元异 羟 基 洋 地 黄 毒 苷 元3331414141216黄 色 荧 光亮 蓝 色 荧 光灰 蓝 色 荧 光 Tschugaev 反应：S/HOAc+ZnCl2+ClAc 磷酸反应 Salkowski反应: S/CHCl3+H2SO4 三氯化锑反应 反应名称 反应试剂 反应现象Libermann-Burchard反应浓硫酸

25、-乙酐（1：20）黄-红-蓝-紫-绿-褪色Salkowski反应浓硫酸氯仿层：血红色或青色，硫酸层：绿色荧光三氯乙酸-氯胺T反应三氯乙酸-氯胺T显色洋地黄毒苷类：黄色荧光 羟基洋地黄毒苷类，亮蓝色荧光 异羟基洋地黄毒苷类，灰蓝色荧光三氯化锑反应三氯化锑显色洋地黄毒苷：红-蓝灰色羟基洋地黄毒苷：紫-灰色Tschugaev反应无水氯化锌-乙酰氯紫红-蓝-绿（2 2）作用于作用于，不饱和内酯环的反应不饱和内酯环的反应 ( (甲型强心苷甲型强心苷) )机制：甲型强心苷在碱性醇溶液中，双键由机制：甲型强心苷在碱性醇溶液中，双键由2020（2222）转移到）转移到2020（2121），生成），生成C C2

26、222活性亚甲基，能与活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂缩合（氧化）而显色。活性亚甲基试剂缩合（氧化）而显色。OOOHOHCH2CHCCOOOHCHCH2CCOOKOHCH3OH17202122232021222320212223强心甾烯H转移141414Legal反应亚硝酰铁氰化钠亚硝酰铁氰化钠深红深红 褪色褪色 470Kedde3,5-二硝基苯甲酸二硝基苯甲酸红或紫红色红或紫红色 590Raymond间二硝基苯间二硝基苯紫红色紫红色 620Baljet反应苦味酸苦味酸橙或橙红色橙或橙红色 490反应名称反应名称试剂试剂颜色颜色maxmaxu亚硝酰铁氰化钠试剂（亚硝酰铁氰化钠试剂（Legal反应

27、）反应）操作：操作：样品样品1 12mg2mg，溶在，溶在2 23 3滴吡啶中，加滴吡啶中，加1 1滴滴3 3亚硝酰铁氰化钠溶液和亚硝酰铁氰化钠溶液和1 1滴滴2mol/L2mol/L的的NaOHNaOH溶液，反应液呈溶液，反应液呈深红色深红色并渐渐褪去。并渐渐褪去。机制：机制：特点：特点：凡分子中有活性亚甲基者均有此呈色反应凡分子中有活性亚甲基者均有此呈色反应（3 3）作用于）作用于-去氧糖的反应去氧糖的反应vKeller-Kiliani(K-K)反应过程：过程：强心苷强心苷 冰醋酸冰醋酸+Fe+Fe3+3+ 浓硫酸浓硫酸现象：现象： 醋酸层醋酸层 蓝或蓝绿色（蓝或蓝绿色（-去氧糖）去氧糖）

28、 两液间两液间 洋地黄毒苷元，洋地黄毒苷元，草绿色草绿色 羟基洋地黄毒苷元，羟基洋地黄毒苷元，洋红色洋红色 久置后变暗久置后变暗 异羟基洋地黄毒苷元，异羟基洋地黄毒苷元，黄棕色黄棕色 Keller-Kiliani(K-K)反应反应特点：特点： - -去氧糖的特征反应。去氧糖的特征反应。此反应要求存在此反应要求存在- -去氧糖或能水解出去氧糖或能水解出- -去氧糖（对游离去氧糖（对游离的的- -去氧糖或去氧糖或- -去氧糖与苷元连接的苷去氧糖与苷元连接的苷都能呈色）都能呈色）-去氧糖与葡萄糖或其他羟基糖相连接的去氧糖与葡萄糖或其他羟基糖相连接的双糖、叁糖，因在此条件下较难水解出双糖、叁糖，因在此

29、条件下较难水解出-去氧糖，故不呈色。去氧糖，故不呈色。所以反应阴性时，未所以反应阴性时，未必不含此糖必不含此糖。u对二甲氨基苯甲醛反应 灰红色u占屯氢醇反应 显红色u过碘酸-对硝基苯胺反应u对硝基苯肼反应 CH2CH=OCH=OCHCH=OCH-OHNO2NH2CHCHCHNNHNO2NO222-2-去氧糖去氧糖过碘酸过碘酸( (黄色黄色) )第五节第五节 提取分离提取分离1.含量低含量低2.2.存在形式：结构相似存在形式：结构相似, ,性质相似的；性质相似的；原生苷原生苷, ,次生苷次生苷3.3.多种杂质共存，多种杂质共存，e.g.e.g.糖类、皂苷、糅糖类、皂苷、糅质质4.4.植物酶共存植

30、物酶共存5.5.不稳定，易受酸、碱或共存酶的作用不稳定，易受酸、碱或共存酶的作用抑制共存酶水解：抑制共存酶水解：u新鲜原料采收后，尽快干燥，最好在新鲜原料采收后，尽快干燥，最好在50506060通风快速烘干或晒干，避潮保存。通风快速烘干或晒干，避潮保存。u70708080的乙醇处理原料，抑制酶的活性的乙醇处理原料，抑制酶的活性u加入酶的沉淀剂：一定饱和度的硫酸铵加入酶的沉淀剂：一定饱和度的硫酸铵（一）一般提取方法：u提取溶剂：提取溶剂： 70708080乙醇溶液乙醇溶液u注意：注意： 原料含脂类杂质，先用石油醚脱脂原料含脂类杂质，先用石油醚脱脂 原料含叶绿素，析胶或用活性炭吸附法除去原料含叶绿

31、素，析胶或用活性炭吸附法除去 鞣质等杂质，铅盐沉淀、聚酰胺吸附等法除去鞣质等杂质，铅盐沉淀、聚酰胺吸附等法除去（二）一般分离方法：（1 1）粗分：）粗分： 除去杂质后的强心苷提取液，如含有除去杂质后的强心苷提取液，如含有醇，可浓缩除去醇，得浓缩水溶液，再用醇，可浓缩除去醇，得浓缩水溶液，再用CHClCHCl3 3和不同比例的和不同比例的CHClCHCl3 3-MeOH(-MeOH(或或EtOHEtOH) )依依次次萃取萃取，将强心苷按极性大小划分为，将强心苷按极性大小划分为亲脂亲脂性、弱亲脂性等几个部分性、弱亲脂性等几个部分，供进一步分离，供进一步分离. .中药原料粗粉(应先脱脂,脱叶绿素或酶

32、解)70-80%乙醇回流(或温浸,渗漉)提取乙醇提取液减压回收乙醇,静置析胶 胶状物(叶绿素,树脂等)浓缩液氯仿萃取氯仿层水层水洗氯仿层水层减压回收溶剂亲脂性强心甙类加乙醇至含醇量为20%,氯仿提取氯仿层减压回收溶剂弱亲脂性强心甙类（二）一般分离法：（2）精分：通常用：溶剂萃取法逆流分溶法色谱分离法少数：少数含量高的成分，反复重结晶，得单体多数情况下，往往需要多种方法配合使用，反复分离才能得到单一成分吸附色谱法：u吸附剂：中性氧化铝或硅胶u洗脱剂：苯、苯-氯仿、氯仿、氯仿-甲醇u特点： 一般用于分离亲脂性强心苷（单糖苷或次生苷和苷元）u例如： 黄花夹竹桃果仁中分离黄夹次苷甲、乙等分配色谱法：u支持剂：硅胶、硅藻土或纤维素u洗脱剂：不同比例的氯仿-甲醇-水、 乙酸乙酯-甲醇-水、 水饱和的丁酮等u特点：分离弱亲脂性强心苷效果较好重结晶：u特点：对含量较高的组分，反复结晶（三）分离提取实例实例 （1