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文档简介
1、母菌、霉菌常用培养基得配制一、目得要求了解合成培养基、半合成培养基与天然培养基得配制原理、学习与掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基与察氏 培养基得配制方法。二、基木原理麦芽汁培养基与马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌与霉菌。马铃薯葡 萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也就是培养酵母菌及霉 菌得一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为 天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基与豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而 察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现得自然pH系指培养基不经酸、碱 调节而自然呈现得pHo三、实验材料(一)药
2、品葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP O4、KCk M g SO4- 7 H2O,F e SO4、琼脂。(二)仪器天平、高压蒸汽灭菌锅。(三)玻璃器川L移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养川L、玻璃漏斗等。(四)其她物品药匙、PH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报 纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。四、实验内容(一)麦芽汁培养基得配制1、培养基成分新鲜麦芽汁一般为1 0 15波林、2. 配制方法(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡61 2h,置于15°C阴凉处发芽,上盖纱 布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒得两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,
3、研磨成麦芽粉,贮存备用。(2 )取一份麦芽粉加四份水,在6 5°C水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至 糖化完全(检查方法就是取Oo 5m 1得糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化 完全)。(3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清, 加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)、(4) 用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到1 0-15波林,调p H 至6、4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花得新鲜麦芽汁,加水稀释到10-1 5波林后使用。(5) 如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水
4、。(6) 分装、加塞、包扎、(7) 高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 m i n o(二) 马铃薯葡萄糖培养基得配制1、培养基成分马铃薯20 g葡萄糖2g琼脂1、52g水100m 1自然pH2.配制方法配制2 0%马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1 000m 1。 80°C浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积、100 Pa灭菌2 0 min。即成 20%马铃薯浸汁,贮存备用、(2)配制时,按每100 ml马铃薯浸汁加入2 g葡萄糖,加热煮沸后加入2 g琼脂,继 续加热融化并补足失水。(3) 分装、加塞、包扎、(4)高压蒸汽灭菌100 Pa灭菌2 0 min。
5、(三) 豆芽汁葡萄糟培养基得配制1.培养基成分黄豆芽10g葡萄糖5g琼脂1。52g水1 0 0m 1自然pH2.配制方法(1)称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入1 00 ml水,小火煮沸3 0 min,用纱布 过滤,补足失水,即制成1 0 %豆芽汁。(2)配制时,按每1 0 0 ml 10%豆芽汁加入5 g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继 续加热融化,补足失水。(3)分装、加塞、包扎。(4) 高压蒸汽灭菌100 P a灭菌20 min。(四)察氏(cz a pck)培养基得配制1、培养基成分蔗糖3gNaN030.3 g0 o lgK ?HP04KC1Oo 05gMgS04-7HzO0 05gFeS 0 40. 0 0 1 g琼脂1.52g蒸懈水10 0 ml自然pH2 o配制方法(1)称量及溶化 量取所需水量约2/ 3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、Na NO3、K2HPO4、KC1、MgSO4,依次逐一加入水中溶解。按每100 m 1培养基 加入lml 0。1%得FCSO4溶液。(2)定容候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。(3
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