月季的花药培养

1、练习：小麦高杆（练习：小麦高杆（D）对矮杆（）对矮杆（d）为显性，抗锈病（）为显性，抗锈病（T）对不抗锈病（对不抗锈病（t）为显性，现有高杆抗锈病和矮杆不抗病）为显性，现有高杆抗锈病和矮杆不抗病的两种纯合体，如何快速获得矮杆抗锈病的纯种？的两种纯合体，如何快速获得矮杆抗锈病的纯种？ 高杆抗锈病（高杆抗锈病（DDTT） 矮秆不抗锈病矮秆不抗锈病 （ddtt） F1：的基因型和表现型的基因型和表现型 a 各种配子的种类各种配子的种类 a 符合要求的单倍体的基因型符合要求的单倍体的基因型 良种的基因型表现型良种的基因型表现型 单倍体育种方法的主要优点是单倍体育种方法的主要优点是 。1 可以明显缩短育

2、种年限可以明显缩短育种年限2 后代为纯合子后代为纯合子P：DdTt，高秆抗锈病，高秆抗锈病DT，Dt, dT, dtddTT矮秆锈病矮秆锈病杂交杂交花药离体培养花药离体培养DT，Dt, dT, dt秋水仙素处理秋水仙素处理 花中皇后月季又称花中皇后月季又称“月月红月月红”，自然花期自然花期5至至11月月，开花连续不断开花连续不断 ，通常扦插就可以成活通常扦插就可以成活。 （一）被子植物的花粉发育（一）被子植物的花粉发育花药花药花丝花丝柱头柱头花柱花柱子房子房雄蕊雄蕊雌蕊雌蕊胚珠胚珠1.被子植物的花的结构：被子植物的花的结构：花药的结构花药的结构花粉囊花粉囊药隔药隔花粉囊花粉囊花粉花粉2.植物的

3、双受精作用：植物的双受精作用：（胚芽（胚芽 胚根胚根 子叶子叶 胚轴）胚轴）花粉管细胞核花粉管细胞核生殖生殖细胞细胞核核小孢小孢子母子母细胞细胞花粉母花粉母细胞细胞4 4个小个小孢子孢子减减数数分分裂裂 小孢子小孢子四分体四分体时期时期单核居中期单核居中期单核靠边期单核靠边期双核期双核期_分裂分裂_个精子个精子2有丝有丝_分裂分裂有丝有丝营养细胞营养细胞单核期单核期生殖细胞生殖细胞小孢子母细胞小孢子母细胞小孢子小孢子花粉囊花粉囊花药花药花粉粒（双核期）花粉粒（双核期）成熟花粉成熟花粉思思 考考 ： 1.1.一个小孢子母细胞产生一个小孢子母细胞产生几个精子？几个精子？1 1个个4 4个个4 4个

4、个4 4个个8 8个个花粉管细胞核花粉管细胞核生殖生殖细胞细胞核核小孢小孢子母子母细胞细胞花粉母花粉母细胞细胞4 4个小个小孢子孢子减减数数分分裂裂 小孢子小孢子四分体四分体时期时期单核居中期单核居中期单核靠边期单核靠边期双核期双核期_分裂分裂_个精子个精子2有丝有丝_分裂分裂有丝有丝营养细胞营养细胞单核期单核期生殖细胞生殖细胞思思 考考 ： 2.2.如果生殖细胞完成分裂，如果生殖细胞完成分裂，则一个成熟的花粉粒含几个细则一个成熟的花粉粒含几个细胞核？胞核？3个个营养细胞在花粉萌发过程中的作用营养细胞在花粉萌发过程中的作用 ：控制花粉的萌发并提供营养控制花粉的萌发并提供营养 n1、关于被子植物

5、花粉发育的说法，不正确的是、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ ）nA、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的nB、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果nC、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段核期、双核期等阶段nD、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央移到细胞中央BD（二）产生花粉植株的两种途径（二）产生花粉植株的两种途径阅读阅读P38教材内容，说出产生花粉植株教材内容，说出产生花粉植株的两种途径

6、及原因的两种途径及原因 1.产生花粉植株的两条途径产生花粉植株的两条途径2.产生花粉植株具有两条途径的原因：产生花粉植株具有两条途径的原因：花粉花粉花粉花粉丛芽丛芽丛芽丛芽移栽移栽脱脱分化分化诱导诱导胚状体胚状体愈伤组织愈伤组织分化分化再再分化分化生根生根主要取决于培养基中主要取决于培养基中 的种类及其的种类及其 的配比。的配比。 激素激素浓度浓度体细胞体细胞类似类似合子发育成的胚合子发育成的胚的结构的结构（具有胚根、胚芽、胚轴等结构）（具有胚根、胚芽、胚轴等结构）体细胞胚体细胞胚植物组织培养过程中植物组织培养过程中单倍体性细胞单倍体性细胞花粉胚花粉胚胚状体胚状体胚状体的结构及其发育过程与种子

7、相似胚状体的结构及其发育过程与种子相似 植株，植株植株，植株 ，一般高度，一般高度 。分化分化 胚状体胚状体丛芽丛芽 再分化再分化 愈愈伤组织伤组织 丛芽丛芽 2.2.花粉植株的特点？花粉植株的特点？思思 考：考： 3.3.花粉植株弱小，高度不育，是否花粉植株弱小，高度不育，是否就没有利用价值？就没有利用价值？ 用于单倍体育种技术，可明显缩短育用于单倍体育种技术，可明显缩短育种周期，培育纯合新品种。种周期，培育纯合新品种。 1.1.分化和再分化？分化和再分化？单倍体单倍体弱小弱小不育不育（类似种子中的胚）（类似种子中的胚）（三）影响花药培养的因素（三）影响花药培养的因素月季的为月季的为MSMS

8、培养基培养基 阅读教材阅读教材P3839页，找出哪些因素能页，找出哪些因素能够影响花药的培养？够影响花药的培养？1、材料的选择、材料的选择2、培养基的组成、培养基的组成 植物的种类植物的种类 亲本植株的生理状况亲本植株的生理状况 花粉的发育期花粉的发育期 亲本植株生长条件、材料的低温预处理、接亲本植株生长条件、材料的低温预处理、接种密度等种密度等3、其他因素、其他因素（ ）（ ）花期早期花期早期单核居中期与靠边期之间单核居中期与靠边期之间 为什么不选择使用单核期之前或之后为什么不选择使用单核期之前或之后的花药接种？的花药接种？ 单核期之前的花药，质地幼嫩，单核期之前的花药，质地幼嫩，极易破碎。

9、极易破碎。单核期之后的花药，花瓣已有些松单核期之后的花药，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难动，又给材料的消毒带来困难。 为什么花瓣松动会给材料的消为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？毒带来困难？该材料还有？该材料还有什么优点？什么优点？花瓣松动后，微生物就可能侵花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来入到花药，给材料的消毒带来困难。困难。材料的选取材料的选取 实验操作的流程包括：实验操作的流程包括：（一）（一） _； （二） _；（三）（三） _。材料的消毒材料的消毒接种和培养接种和培养1 1选择花药时一般通过选择花药时一般通过_确定花粉发育确定花粉发育时期，此时需要对花粉

10、细胞核进行染色，最时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是常用的染色剂是_和和_，它们分别可以将细胞核染成它们分别可以将细胞核染成_色和色和_色。色。2 2在使用焙花青铬钒溶液时，需要首先在使用焙花青铬钒溶液时，需要首先将花药用将花药用_处理处理20min20min。该试。该试剂的配制方法是将剂的配制方法是将_按体按体积比为积比为_的比例混合均匀。的比例混合均匀。（一）材料的选取（一）材料的选取焙花青焙花青- -铬矾铬矾阅读阅读“（一）材料的选取（一）材料的选取”，回答下列问题：，回答下列问题： 镜检镜检醋酸洋红醋酸洋红蓝黑蓝黑红红卡诺氏固定液卡诺氏固定液无水酒精与冰醋酸无水酒精与

11、冰醋酸3 3 ：1 1（二）材料的消毒（二）材料的消毒阅读阅读“（二）材料的消毒（二）材料的消毒”，填写下列流程图：，填写下列流程图： 花花蕾蕾（_）清洗清洗吸干水分吸干水分消毒消毒24min冲洗冲洗35次次浸泡约浸泡约30s（_）（_）（_）（_）70%70%酒精酒精无菌吸水纸无菌吸水纸无菌水无菌水无菌水无菌水1%1%氯化汞溶液氯化汞溶液1%1%次氯酸钙溶液次氯酸钙溶液饱和漂白粉溶液饱和漂白粉溶液1%1%氯化汞溶液氯化汞溶液说明：说明：用于培养的花药，实际上多数未熟，由于它的用于培养的花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常

12、处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。 月季花蕾的消毒与菊花外植体的月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？消毒相比较，二者有何不同？ 在酒精消毒前，花药不需在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。和软刷刷洗。（三）接种和培养（三）接种和培养阅读阅读“（三）（三）接种和培养接种和培养”，回答下列问题：回答下列问题：1剥取花药：消毒后的花蕾，要在剥取花药：消毒后的花蕾，要在_条件下除去花萼、花瓣。条件下除去花萼、花瓣。2接种花药：剥取的花药要立刻接种到接种花药：剥取的花药要立刻接种到_上。

13、每个培养瓶接种上。每个培养瓶接种_个花药。个花药。3培养：花药培养利用的培养基是培养：花药培养利用的培养基是_培养基，培养基，pH为为_ ，温度为，温度为_ ，幼苗形成之前（需要、不需要）光照。幼苗形成之前（需要、不需要）光照。无菌无菌培养基培养基710MS5.825（三）接种和培养（三）接种和培养阅读阅读“（三）（三）接种和培养接种和培养”，回答下列问题：回答下列问题：4培养培养2030d后，花药开裂，长出后，花药开裂，长出_或释放出或释放出_ 。前者还要转移到。前者还要转移到_ 上进行分化培养成再生植株；后者要尽快上进行分化培养成再生植株；后者要尽快_并转移到新的培养基上。并转移到新的培养

14、基上。5通过愈伤组织形成的植株，常常会出现通过愈伤组织形成的植株，常常会出现_的变化，因而需要鉴定和筛选。的变化，因而需要鉴定和筛选。愈伤组织愈伤组织胚状体胚状体分化培养基分化培养基在花药在花药开裂后将幼小植株分开开裂后将幼小植株分开染色体组数目染色体组数目 剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是剥取花药时，一是注意不要损伤花药，原因是_；二是要彻底；二是要彻底除去花丝，原因是除去花丝，原因是_。 在花药培养基中，用量最高的激素是在花药培养基中，用量最高的激素是_ ；在诱导丛芽或胚状体培养基中，用量最高的激在诱导丛芽或胚状体培养基中，用量最高的激素是素是_；在诱导生根的培养；在诱导生根的培养

15、基中，用量最高的激素是基中，用量最高的激素是_ 。BA （细胞分裂素）（细胞分裂素） IAA（生长素）（生长素） IAA（生长素）（生长素） 为什么通过愈伤组织形成的为什么通过愈伤组织形成的植株会发生染色体倍性的变植株会发生染色体倍性的变化？化？ 主要原因是营养核和生主要原因是营养核和生殖核融合造成的殖核融合造成的。1、选材是否恰当、选材是否恰当2、无菌技术是否过关、无菌技术是否过关3、接种是否成功、接种是否成功选材是否成功是花药培养成功的关键。选材是否成功是花药培养成功的关键。如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。如

16、培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。如果接种的花药长出愈伤组织或释放出如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体，花药培养的第一步就成功了。要胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体适时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。进一步分化成再生植株。培养基配制方法、培养基配制方法、无菌技术、接种操无菌技术、接种操作、培养的基本过作、培养的基本过程（程（等等基本相同。基本相同。才能才能获得正常可育的个体获得正常可育的个体 被子植物花粉发育过程中的四分体时被子植物花粉发育过程中的四分体时期是指期是指4个单倍体细胞连在一起的时期；个单倍体细胞连在一起的时期；

17、 减数分裂过程中的四分体时期是指同减数分裂过程中的四分体时期是指同源染色体配对后，一对同源染色体含有四源染色体配对后，一对同源染色体含有四条染色单体的阶段。条染色单体的阶段。 被子植物花粉发育过程中的四分体时被子植物花粉发育过程中的四分体时期与减数分裂过程中的四分体时期的含义期与减数分裂过程中的四分体时期的含义2、关于花药培养产生花粉植株的途径，、关于花药培养产生花粉植株的途径，下列叙述错误的是下列叙述错误的是()A花粉可通过愈伤组织发育成植株花粉可通过愈伤组织发育成植株B花粉可通过胚状体进一步分化成植株花粉可通过胚状体进一步分化成植株C主要由培养基中激素的种类及用量决主要由培养基中激素的种类

18、及用量决定途径定途径D产生胚状体是花药离体培养中特有的产生胚状体是花药离体培养中特有的途径途径3、关于月季的花药培养技术与菊花的组织培、关于月季的花药培养技术与菊花的组织培养技术的不同，下列说法不正确的是养技术的不同，下列说法不正确的是()A花药培养需发育时期适宜的花蕾花药培养需发育时期适宜的花蕾B花药培养对培养基配方的要求更为严格花药培养对培养基配方的要求更为严格C培养基配制方法完全不同培养基配制方法完全不同D花药裂开后长出的愈伤组织或释放的胚状花药裂开后长出的愈伤组织或释放的胚状体要及时换培养基体要及时换培养基 4、下面是被子植物花粉发育过程的简略表下面是被子植物花粉发育过程的简略表示，请回答：示，请回答：小孢子母细胞小孢子母细胞双核期双核期(1)是指是指_时期，由小孢子母细胞经时期，由小孢子母细胞经_分裂形成。分裂形成。(2)和和分别是指分别是指_期和期和_期，期，该期细胞的特点是