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文档简介

1、木聚糖酶活力测定原理：木聚糖是植物半纤维素的主要成分，为自然界中广泛存在、含量仅次于纤维素 的可再生多糖资源，占细胞干重的7% 35%。木聚糖酶是一类可将木聚糖降解成低聚糖和木糖的复合酶系。它以内切方式降解木聚糖主链架的B-I , 4-木糖苷键，其水解产物主要是木二糖和木寡糖，少量的木糖和阿拉伯糖。木聚糖酶水解木聚糖底物生成的还原性糖，可在煮沸条件下与DNS显色剂生成棕红色的氨基化合物。在一定范围内，还原糖的生成量与反应 液的颜色强度成正比。因此可通过测定棕红色的氨基化合物540nm波长下吸光度来测定木聚糖酶活力。试剂：DNS溶液：酒石酸钾钠182 g，溶于500mL蒸馏水中，加热，于热溶液中

2、依次加入 3, 5- 二硝基水杨酸6.3 g , NaOH 21g,苯酚5 g，搅拌至全溶，冷却后用蒸馏水定容至 1000 mL, 贮于棕色瓶中，室温保存1mg/mL木糖标准溶液：无水木糖于 80 °C烘至恒重，称取0.1 g于烧杯中，加适量蒸馏水 溶解，转入容量瓶中并定容至100 mL。方法：标准曲线的绘制：取6支20m啲试管按下表顺序依次加入各试剂试管号试剂（单位：1234561mg/mL木糖标准溶液00.20.40.60.81.0蒸馏水21.81.61.41.21.0DNS1.51.51.51.51.51.5沸水中煮沸5min,流水冷却2min,各管中加16.5 mL蒸馏水，定

3、容到20mL摇匀，放置20min 后，测定540nm处吸光度。y = 0.8537X + 0.02150.8R2 = 0.9955 j6 40 0O4<0.2000.20.40.60.8木糖量（mg）1.21.4待测液木聚糖酶活力的测定待测样品1. 加底物1%勺木聚糖溶液 4 mL2.50 °C预热 3 min3. 加酶液1 mL4. 混合5.50 °C 水解 10 min6. 力口 DNS试齐U 2 mL7. 混合8. 沸水浴中10 min9. 冷却定容至20 mL10. 样品540 nm下测定空白对照1. 加酶液1 mL2. 沸水煮沸10 min3. 加底物1%勺木聚糖溶液4 mL4. 混合5. 50°C 水解 10 min6. 力口 DNS试齐U 2 mL7. 混合8. 沸水浴中10 min9. 冷却定容至20

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