化学药品质量标准中对制定和复核有关物质检查项的技术要求的探讨

1、化学药品质量标准中对制定和复核有关物质检查项的技术要求的探讨浙江省药品检验所化药室李会林一、固定相的选择和确定1、根据待研究的药物的特性选择合适填料的柱子。参考该品种含量测定项下的色谱条件。参考含有相同主成分的其他制剂的标准中的有关物质或含量项下的色谱条件。参考同系物相应标准和资料中的相关色谱条件。选择不同填料的柱子进行比较（出峰时间、柱效、各杂质的分离情况）而定。当各情况无较大差异时，应选择较普遍使用的柱子（c8、c18）注意不同品牌柱子在耐用性方面的研究：特别当杂质峰与主峰的分离情况不十分完美时，应用不同品牌的柱子进行比较。在确定敷料峰的相对保留时间时（用于定位扣除敷料峰的干扰），应以不同

2、品牌的柱子进行比较。在确定特定杂质的相对保留时间时（自身对照法，以相对保留时间定位特定杂质，或将定位的杂质进行校正因子校正后，并对该杂质有特定的限度要求），应进行不同品牌的比较。确定有关物质出峰完毕的保留时间时，应进行不同品牌的柱子，对各杂质出峰时间的比较，以防制定检毕时间不妥，漏检杂质。当不同品牌而引起以上各因素不固定时，应在标准中注明品牌。二、流动相的选择与优化同上。对流动相的选择同样以出峰时间、分离情况、柱效为主要依据，但也应进行耐用性方面的考查。ph在标准值略微变化时对上述3个因素的影响是否明显，如明显应选择最佳ph值，并在标准中注明。流动相比例在10以内的变化的影响。流速变化的影响三

3、、样品液浓度的选择较高浓度的样品液一般利于杂质检出，但要注意样品量超载情况，要选择一个即有一定的浓度确保检出灵敏性，又要防止超载、影响分离和柱效。四、波长的选择选择的原则时大部分主要杂质与主成分均在此波长下有吸收。原料药的主要杂质是后几步的中间体、副产物以及易降解物，它们大部分应在选定的波长处有吸收。采用自身对照法还应对主要杂质的响应灵敏度进行比较性研究，利用在研发阶段可得到的主要杂质、测定其最低检出量、以及响应值，与主成分比较。响应因子之间最好在0.81.2之间，如果差异过大，可进行波长调整以减少差异，或将其以相对主峰的保留时间进行定位，加以校正因子的校正。制剂的主要杂质是降解产物，波长的选

4、择应考虑各降解物与主成分在此波长是否有吸收。考虑检出灵敏度。还应考虑如何避免辅料的吸收干扰，避开辅料存在吸收的波长。方法专属性验证原料药利用在研发阶段可得到的中间体、副产物等进行分离度、检测灵敏度（最小检出量）、响应因子的因素的测定。将样品用合适的方法进行降解（酸、碱、氧化、光照、加热）对降解样品进行三维图谱的扫描，降解杂质是否在此波长下有适当的吸收。各中间体、副产物的响应值与主成分的响应值的比较，是否在合适的范围内。当各主要降解产物与中间体、副产物在该系统下能与主成分分离，能在该波长出峰，且检测灵敏度合适，说明该系统是基本可控的。注意：降解程度。 当降解产物、中间体、副产物吸收波长不同时的处

5、理制剂主要以进行样品的降解破坏进行验证，原则同原料药相同。消除辅料的干扰是验证的一个主要内容。当无法避开辅料的干扰时应对辅料进行定位予以扣除。1、辅料峰的定位（耐用性）。2、证实在扣除辅料峰的记录时间段内无杂质峰（将主成分的原料药进行降解测定）。3、利用辅料与主药的溶解性差异，将辅料峰降至最小的干扰，以便可忽略不计。六、保留时间的确定原料药应将主要中间体、副产物的出峰时间均在规定的保留时间的倍数内。同时应对粗品进行长时间的扫描记录，以确保在规定的保留时间倍数内无杂质漏检。要进行不同品牌柱子的比较，确定制定的标准合理合法。制剂要验证确保各降解物、辅料峰均在规定的保留时间倍数内出峰（进行不同品牌柱

6、子的比较)因某个主要杂质出峰过缓而使保留时间延长到5倍以上时，应考虑采用梯度洗脱，将记录时间缩短，保证杂质峰的峰型和检出灵敏度。七、溶液的稳定性考察一般在常温、常光情况下进行，对同一份样品溶液进行长时间的测定，以杂质量的变化进行考查。如果不稳定，应进行避光、降温等条件的考查。如是光或温度引起，应在标准中说明避光或实验温度。如果不能在长时间内稳定，但在较短的时间（起码能在此时间内完成实验的全过程）是稳定的，应在标准上注明操作时间的限度。八、分离度的考察应重视高低浓度之间的分离情况。1有关物质检查项的标准复核中遇到的几个问题及处理方法：1，照搬国外药典的检验方法 色谱条件、一般杂质、特定杂质、特定

7、杂质的相对保留时间和校正因子以及限度完全一致。 色谱条件、一般杂质限度一致。 色谱条件不一致、一般杂质、特定杂质限度完全一致。 色谱条件一致，一般杂质、特定杂质不同或限度不一致。 2，更改已有国标的方法 法改为法 特定杂质的外标法改为自身对照法3，复方制剂有关物质的检验方法 只进行其中某一成分的杂质检查 在一个色谱条件下按出峰时间段对两个成分的杂志分别进行自身对照法测定 在一个色谱条件下对总杂质按其中一个成分的峰面积进行自身对照法测定 在一个色谱条件下对总杂质按两个成分的平均峰面积进行自身对照法测定4，异构体的检验方法 用相应的异构体的对照品的外标法（或用相应的异构体的对照品定位采用归一化法） 用消旋体的对照品的外标法（或有相应的消旋体的对照品定位采用归一化法） 采用相对保留时间或以出峰次序定位的归一化法，对一个成分有两个色谱峰的检验方法及限度的确定的讨论化学药品室近两年开展的生物利用度化学药品室近两年开展的生物利用度1.复方二甲双胍片2.罗红霉素片3.舍曲林片/胶囊4.卡托普利片5.克拉霉素胶囊6.辛伐他汀片7.霉酚酸酯胶囊8.雷米普利片/