抗体联合应用与病理诊断

1、免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体郑鹏才长江大学医学院形态学部 2010.11.13免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体免疫组化应用的意义 鉴别诊断 预后判断 指导治疗 查找病原体 分子分型 免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体抗体为何要联合使用抗体为何要联合使用 肿瘤的发生和进展是多分子信号通路发生异常改变的结果，单一的生物标志常难以鉴别诊断。 没有100%针对某一抗原（某一疾病）的特异抗体。 一种抗体常在多种疾病中表达。 联合应用可以达到1+12的效果。 免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体 一. 乳腺癌 er/pr/her2 每个病人需要常规检测 判断预后、决定治疗方案、生物靶

2、向治疗的依据 er、pr判读标准 阳性信号定位于细胞核 判定方法和标准有差异。建议采用：1. 注明阳性（需给出比例）、阴性，如er（+，90%），pr（-）。2. 阳性临界值选择：只要存在明确的瘤细胞核染色即可，如er（+，8%）；当阳性细胞特少时，可也可表述为er（+，1%）。3. 不必考虑染色强度。免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体er（+，90%）pr（+，70%）er（）（）er（+，2%）免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体 er、pr表达的意义： er、pr阴性的癌细胞增殖不受内分泌激素的调控，肿瘤分化程度较低，预后较差，内分泌治疗无效。 er、pr阳性，特别是高表达者，肿瘤

3、组织分化程度较高，恶性度低，预后较好，内分泌治疗往往有效。 pr、er阳性患者辅助治疗的选择要视其术后复发的风险级别而定，而复发风险与淋巴结转移和her-2表达等有密切关系，一般低危险和中危险首选内分泌治疗，高风险则以化疗为主。免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体her2基因扩增（过表达）的临床意义 表皮生长因子受体-2(her-2) 是位于染色体17q21，编码185kda具有跨膜酪氨酸激酶活性的生长因子受体，参与细胞生长、分化的调节。 乳乳 腺腺 癌癌免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体her2：预后指标 her2阳性患者生存期较低 平均生存期 her2阳性 3年 her2阴性 67年

4、免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体her2：乳腺癌危险因素的定义 g1 t2 er/pr+淋巴结淋巴结-her2 -lvi 无无淋巴结淋巴结-，her2 +， er/pr-或或lvi浸润，淋巴结浸润，淋巴结1-3her2 -， er/pr+ 年龄年龄35 g2-3 t2淋巴结淋巴结1-3和和her2 +， er/pr-或或淋巴结淋巴结4低 中 中 高 低高免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体her2：预测指标 her2状态预示肿瘤对治疗的反应 内分泌治疗 her2阳性患者相对耐药 cmf方案 her2阳性患者相对耐药 蒽环类 对大剂量蒽环类相对敏感 紫杉类药物 相对敏感 her2状态提示

5、病人预后 her2阳性者肿瘤进展快，恶性度高。 her2阳性者赫赛汀治疗有效，预后反而好。免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体her-2的检测方法 免疫组化（ihc） 方法简单、价廉 显色原位杂交（cish） 荧光原位杂交（fish） 金标准 条件苛刻、昂贵免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体her2免疫组化判读标准 浸润性肿瘤细胞无着色为阴性(0) 瘤细胞呈弱且不完整的胞膜着色或10瘤细胞呈较弱的胞膜染色为 (1+) 10瘤细胞有较弱但完整的胞膜着色或30瘤细胞呈强且完整的胞膜着色为 (2+) 免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体her2 (0)her2 (1+)her2 (3+)he

6、r2 (2+)免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体图图1图图2图图3图图41+2+2+3+免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体二. 甲状腺癌 ck19/gal-3/hbme-1 甲状腺病变鉴别难点 甲状腺滤泡性腺瘤（fa）和滤泡性癌（fc）微小浸润 良性乳头状增生（主要是结节性甲状腺肿）和乳头状癌（pc） 滤泡性腺瘤和滤泡型乳头状癌免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体 ck19、gal3、hbme-1、erk、ret、p16、cyclind1、p27、cited-1、fni和hnwck在甲状腺良、恶性肿瘤之间的表达均有差异， 但前三种对诊断最有帮助。expression of the m

7、arkers in differentiated thyroid carcinoma (dtc) and benign thyroid nodule 引自park报道免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体papillary carcinoma showing diffuse expression of galectin-3 (a), hbme-1 (b), 免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体papillary carcinoma showing diffuse expression of ck19 (c), and cyclin d1 (d).免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体beni

8、gn papillary hyperplasia in nodular hyperplasia showing focal expression of galectin-3 (a) and no expression of hbme-1 (b).免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体follicular carcinoma showing focal expression of galectin-3 (a) and diffuse expression of hbme-1 (b) in area of capsular invasion. 免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体follicul

9、ar adenoma showing no expression of galectin-3 (c) and focal expression of hbme-1 (d).免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体 在对三者联合应用的研究中观察到。96.5(8184)的乳头状癌和63.1(2438)的滤泡性癌至少出现三者中的一个标志阳性；三者同时阳性对诊断癌具有54(2037)的敏感性和100(053)的特异性；而三者同时阴性对诊断甲状良性病变具有38(2053)的敏感性和100(3737)的特异性。两者以上的抗体联合应用共表达对鉴别良恶性的作用明显增强。 免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体s

10、ensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, and diagnostic accuracy of the immunohistochemical markers in the diagnosis of differentiated thyroid carcinoma 3项抗体同时标记，可起到取长补短的作用，提高特异性和准确率。由于免疫组化结果受诸多因素的影响，在实际应用中一定要以组织学为主诊断，免疫组化能提高我们对组织学诊断的信心和把握，它不能作为独立诊断的依据。 引自park报道

11、免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体提示 ck19在淋巴结异位甲状腺肿为阴性，而在淋巴结转移性pc为阳性，对二者有较好的鉴别作用。 gal-3对fc的敏感性稍低（60%），但在包膜下明显阳性，故对fc的微小浸润有特殊的标记作用， gal-3甲状腺包块穿刺细胞学可出现假阳性应引起注意。免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体三. 子宫颈上皮内瘤变 p16/ki-67 最常使用的抗体。 宫颈活检的重要任务 识别宫颈上皮内瘤变和hpv感染 hpv感染与p16 高危型的hpv感染 癌基因蛋白e7产生 e7结 合在rb基因 rb基因功能丧失 p16蛋白过表达。p16：免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗

12、体p16免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体cin1cin2/3p16p16p16p16p16p16p16p16免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体ki-67抗原是除g0期外所有细胞周期上都有表达的一种非组蛋白性蛋白质 ki-67在大多数低级别sil和宫颈湿疣的鳞状上皮上2/3细胞中有表达。 正常宫颈组织，慢性宫颈炎，及鳞状上皮化生仅在基底层有少量上皮表达。 注意鳞状上皮化生偶尔也在上皮上层表达ki-67，但阳性细胞数量较少。hpv感染 上皮细胞程度增殖 ki-67染色增强免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体 在宫颈病变中的作用cin1cin2cin3免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗

13、体 hpv感染的直接证据是原位杂交等分子病理技术检测到病毒的dna p16和ki-67间接反应hpv感染 p16不能区别lsil和hsil p16和ki-67可用来推断是否hpv感染和cin以及cin的级别提示免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体四. 胃肠道间质瘤 cd117/ cd34/sma/ s-100/ desmin/ ki-67 中国胃肠道间质瘤病理专家组推荐 1. cd117 （95%病例特征性表达） 2. cd34 （70%病例表达） 3. sma （40%局灶性表达） 4. s-100 （5%） 5. desmin （2%） 6. ki-

14、67 用于标记瘤细胞增殖指数。免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体 gist cd117 cd34免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体五. 转移性腺癌来源判断 ck7/ck20/villin 原发灶不明的转移性肿瘤约占5一15%。 确定肿瘤原发灶有助于确定治疗方案和病人预后的评估。 单一的抗体很难从众多的肿瘤中找到其来源。 抗体联合使用可以缩小原发灶的搜寻范围。ck7、 ck20及villin用于判断转移性腺癌的来源免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体实际应用 第一步先检测这三种抗体 参照表格来推断肿瘤可能存在于哪些范围中，哪些肿瘤可以排除。 根据肿瘤检出率来考虑其发生的可能性。 第二步根据具体情况，采用其他相对特异的抗体 免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体结肠癌卵巢转移ck20ck20ceacea免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体转移性粘液腺癌ck20ck20ck20ck20ceacea免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体原发性卵巢癌ck20ck20ck7ck7免疫组化免疫组化. .联用抗体联用抗体六. 不易明确组织来源的肿瘤 ck-pan(ae1/ae3)/vimentin/s-100/lca